抑癌基因PBRM1在肾细胞癌中的作用研究进展

肾癌作为一种常见的泌尿系统肿瘤,其发生、发展涉及一系列遗传学包括表观遗传学水平的改变,且病因复杂,有着高度的异质性。肾细胞癌是肾癌的最主要类型,而透明肾细胞癌(CCRCC)是肾细胞癌最常见的亚型。近期通过外显子测序发现,多溴蛋白1(PBRM1)基因(编码BAF180蛋白)在CCRCC中的突变率可高达40%。BAF180蛋白是SWI/SNF染色质重塑复合体中PBAF(polybromo-associated BRG1-associated factor)的特异组成亚基之一,不仅参与了PBAF复合物的形成,还可介导该复合物与DNA特定区域的结合,从而影响基因的转录、翻译等过程,表明PBRM1在肾细胞癌发生发展中扮演着十分重要的角色。该文对肾细胞癌的主要癌相关基因尤其是抑癌基因PBRM1的研究现状、分子机制及临床转化研究进展进行综述,以期为SWI/SNF与肾细胞癌及其他相关肿瘤的基础和临床转化研究提供参考。

SMARCA4/BRG1缺失型非小细胞肺癌1例

1临床资料患者,男性,68岁,既往肺气肿及吸烟史(约25年,平均40支/d),姐姐、妹妹及哥哥均有肺癌病史。因新冠病毒感染后出现发热伴胸闷症状2周就诊于吉林大学白求恩第三医院。行胸部CT(图1)提示:左肺下叶背段可见团块状密度增高影,边界清晰,呈分叶状,大小为4.4 cm×3.8 cm,纵隔窗呈软组织密度影,CT值为57 Hu。入院后系统完善检查。肿瘤标志物示甲胎蛋白(AFP)23.09 ng/mL(参考值<20 ng/mL)。

Brahma相关基因1与激活转录因子2相互作用对皮肤鳞状细胞癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响

目的探讨Brahma相关基因1(BRG1)在皮肤鳞状细胞癌(cSCC)组织及细胞中的表达,及其与激活转录因子2(ATF2)相互作用调控cSCC细胞增殖、迁移、侵袭的分子机制。方法收集2015—2021年南通大学第二附属医院皮肤科经病理确诊为日光性角化病(AK)、cSCC(含原位鳞癌)患者的石蜡组织标本分别66例和80例,同时收集皮肤美容手术修整下的正常皮肤组织石蜡标本35例作为正常对照组。采用免疫组化染色法检测BRG1在cSCC、AK及正常皮肤组织中的表达,分析BRG1表达与cSCC患者临床病理参数之间的相关性。收集cSCC患者和健康对照新鲜组织标本各12例,常规培养cSCC细胞株A431和Scl-1及人永生化角质形成细胞株HaCaT,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测组织及细胞中BRG1 mRNA的表达,通过免疫共沉淀和细胞免疫荧光染色分析BRG1与ATF2的相互作用。通过RNA干扰法敲低A431、Scl-1细胞中BRG1(BRG1 siRNA1~5组)和ATF2表达(ATF2-shRNA组),并分别转染阴性对照siRNA或shNC作为对照(control siRNA组、shNC组),采用细胞计数(CCK8)实验、克隆形成实验、细胞划痕实验和Transwell实验分别检测敲低BRG1、ATF2对cSCC细胞增殖、迁移及侵袭的影响。多组间计量资料的比较采用单因素方差分析,两两多重比较采用Dunnett-t检验。结果免疫组化染色显示,BRG1蛋白在cSCC、AK组织中的表达强度显著低于正常皮肤组织(χ^(2)=44.40,P<0.001)。qRT-PCR显示,cSCC组织中BRG1 mRNA表达水平(1.345±0.956)显著低于正常皮肤组织(2.499±1.501,t=2.25,P=0.035),A431、Scl-1细胞中BRG1 mRNA表达水平(0.041±0.002、0.026±0.003)亦显著低于HaCaT细胞(0.135±0.033,t=4.95、5.73,P=0.008、0.005)。BRG1的低表达与cSCC患者癌组织位于曝光部位(P=0.041)、肿瘤低分化程度(P=0.001)、Broder高分级(P<0.001)有关。BRG1 siRNA1组和BRG1 siRNA2组A431、Scl-1细胞克隆形成数、迁移细胞数、侵袭细胞数及细胞迁移率均显著高于control siRNA组(均P<0.05)。免疫共沉淀实验表明,在A431、Scl-1细胞中BRG1蛋白与ATF2蛋白能相互结合,免疫荧光法显示二者存在共定位;与control siRNA组相比,A431(BRG1 siRNA1、2组)和Scl-1细胞(BRG1 siRNA1组)中敲低BRG1表达可促进ATF2磷酸化激活(均P<0.05);与shNC组相比,shATF2组A431、Scl-1细胞克隆形成数(均P=0.001)、24~96 h细胞增殖活性(均P<0.001)、迁移细胞数及侵袭细胞数均显著降低(均P≤0.001)。结论BRG1在cSCC及AK组织中低表达,且BRG1可抑制cSCC细胞增殖、迁移及侵袭;ATF2促进cSCC细胞增殖、迁移及侵袭;BRG1可能通过与ATF2蛋白相互作用并抑制ATF2磷酸化激活,从而发挥抑癌作用。

SMARCA4缺失的肿瘤2例并文献回顾

目的探讨SWI/SNF染色体重塑复合体的亚基之一——SMARCA4缺失肿瘤2例的临床病理学特征、诊断及鉴别诊断。方法收集2018年6月-2019年11月青岛市中医医院的SMARCA4缺失肿瘤2例,复阅病理形态特征,采用免疫组织化学方法检测SMARCA4/BRG1、AE1/AE3、Ki-67、Syn等的表达,并分析2例病例在病理学特征上以及免疫组织化学的表型上的相关性,且结合文献复习进行讨论。结果病理结果证实,1例为SMARCA4缺失的未分化肉瘤和1例为SMARCA4缺失的高钙血症型小细胞癌。2例在病理组织学形态上相似,低倍镜下肿瘤细胞呈弥漫浸润性或巢团状生长,常围绕血管生长,肿瘤性坏死明显;高倍镜下见肿瘤细胞主要呈横纹肌样或上皮样形态,胞质嗜酸性或者透明,核圆形,核仁明显,核分裂象易见。免疫表型:2例SMARCA4/BRG1均缺失,Vimentin胞浆阳性表达、Syn局灶阳性,AE1/AE3均为阴性,Ki-671例60%,另1例80%。结论SMARCA缺失的相关性肿瘤在病理学形态上及免疫组化表达上具有一定的相似性,有待收集更多的病例予以分析证实。