SYT—SSX融合基因及其亚型在滑膜肉瘤发生发展中的作用及预后意义

目的研究SYT—SSX融合基因及其亚型（SYT—SSX1和SYT—SSX2）在滑膜肉瘤中的表达情况，探讨它们在滑膜肉瘤发生发展中的作用，并评价其预后意义。方法筛选152例滑膜肉瘤组织标本（来自129例患者），提取石蜡包埋组织中的RNA，采用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测SYT—SSX及其亚型的表达，并比较SYT—SSX1和SYT—SSX2的表达与临床病理参数及预后之间的关系。结果145例（95．4％）组织标本表达SYT—SSX融合基因，其中50例（34．5％）呈SYT—SSX1阳性，91例（62．8％）呈SYT—SSX2阳性，4例（2．8％）SYT—SSX1和SYT—SSX2均为阴性。在SYT—SSX1阳性型滑膜肉瘤中，双相型、细胞角蛋白（CK）阳性和上皮膜抗原（EMA）阳性的比例显著高于SYT—SSX2阳性型（P均〈0．05）。多因素生存分析显示，肿瘤直径≥5cm[相对危险度（RR）=2．325，P=0．027]、有低分化区域（RR=2．122，P=0．048）、出现转移（RR=2．205，P=0．032）和SYT—SSX1阳性（RR=2．775，P=0．008）是提示患者预后不良的独立因素。结论大多数中国滑膜肉瘤患者可能为SYT—SSX2阳性；SYT—SSX亚型可以作为评估滑膜肉瘤患者预后的一项重要因素，SYT—SSX1阳性提示预后不良；SYT—SSX1和SYT—SSX2可能通过对不同的靶基因或对同一些靶基因不同程度的影响，呈现出调控滑膜肉瘤上皮分化能力的差异。

SYT-SSX融合基因E-钙粘素及β-连接素对滑膜肉瘤转移的影响

目的:探讨SYT-SSX融合基因、E-钙粘素、β-连接素及临床病理学参数对评估滑膜肉瘤患者转移的意义。方法:选择临床及随访资料完整的滑膜肉瘤98例,RT-PCR方法检测SYT-SSX融合基因的亚型,免疫组织化学SP法检测F-钙粘素、β-连接素的表达。单因素和多因素分析上述因素及临床病理学参数对滑膜肉瘤患者无转移生存的影响。结果:1)31例(31.6%)滑膜肉瘤为SYT-SSX1阳性,67例(68.4%)为SYT-SSX2阳性。2)E-钙粘素的阳性表达率为38.8%(38/98),β-连接素的细胞膜阳性表达率为39.8%(39/98),细胞核/浆阳性表达率为53.1%(52/98)。3)单因素分析结果显示,年龄(P=0.003)、组织学分级(P=0.001)、SYT-SSX亚型(P=0.014)、E-钙粘素(P=0.015)及β-连接素的细胞膜表达情况(P=0.020)与滑膜肉瘤患者的无转移生存有关,而性别(P=0.190)、肿瘤部位(P=0.105)、肿瘤大小(P=0.180)、组织学分型(P=0.354)、β-连接素的细胞核/浆表达(P=0.911)、放疗(P=0.193)及化疗(P=0.249)与患者的无转移生存无明显相关。4)多因素分析结果表明,SYT-SSX1(RR=2.505,P=0.003)、E-钙粘素的表达(RR=3.282,P=0.000)、年龄(RR=2.157,P=0.004)和组织学分级Ⅲ(RR=1.784,P=0.030)是影响滑膜肉瘤转移的独立危险因素。结论:SYT-SSX1融合基因、E-钙粘素表达、组织学分级及患者年龄可以作为评估滑膜肉瘤患者转移及预后的重要指标。

滑膜肉瘤SYT-SSX融合基因转录产物的检测及其与病理表型的关系

目的检测滑膜肉瘤新鲜冰冻标本中的SYT-SSX融合基因,分析融合基因亚型与病理表型之间的关系。方法取19例2000年6月至2004年9月间在我院诊断为滑膜肉瘤新鲜冰冻标本,提取组织RNA,应用RT-PCR检测标本中SYT-SSX融合基因,明确不同融合基因亚型所占的比例;再次确认各病例的病理诊断及病理表型,分析融合基因亚型与病理表型之间的关系。结果15例(79%)标本含有SYT-SSX融合基因,其中11例为SYT-SSX1,4例为SYT-SSX2,后者中1例为罕见的SYT-SSX2变异类型。未发现其他融合基因亚型。经再次病理组织学确认,15例被确诊为滑膜肉瘤,其中双向分化型4例,单向分化型10例,分化差型1例。确诊为滑膜肉瘤的15例标本均检测到SYT-SSX融合基因。SYT-SSX2仅见于单向分化型和分化差型的病例。结论应用RT-PCR检测SYT-SSX融合基因对诊断滑膜肉瘤具有高度的敏感性及特异性。保留新鲜冰冻标本,应用恰当的引物检测融合基因,对滑膜肉瘤的基础及临床研究均具有重要意义。

SYT-SSX融合基因亚型与滑膜肉瘤细胞增殖及凋亡的关系

目的:SYT-SSX融合基因是滑膜肉瘤的分子遗传学特征,影响滑膜肉瘤的发生发展,但作用机制不详。本研究通过分析SYT-SSX融合基因亚型与肿瘤细胞增殖及凋亡的关系,探讨SYT-SSX对滑膜肉瘤增殖、凋亡的影响。方法:选取141例SYT-SSX融合基因阳性的滑膜肉瘤,进行核分裂计数,通过Ki-67免疫组织化学染色计算Ki-67标记指数(labeling index,LI),反映肿瘤细胞的增殖情况;通过TUNEL染色计算凋亡指数(apoptosis index,AI),并结合Bcl-2和Bax免疫组织化学染色,分析肿瘤细胞的凋亡情况;最后,分析SYT-SSX亚型与核分裂数、Ki-67 LI、AT及Bcl-2、Bax表达的关系。结果:SYT-SSX1和SYT-SSX2阳性滑膜肉瘤分别为50例和91例;SYT-SSX1型和SYT-SSX2型滑膜肉瘤的核分裂数分别为(15.58±9.18)/10HPF和(11.02±8.78)/10HPF,前者显著高于后者(t=2.902,P=0.004);并且,SYT-SSX1型和SYT-SSX2型滑膜肉瘤的Ki-67 LI分别为(25.26±12.78)%和(19.77±11.44)%,前者明显高于后者(t=2.615,p=0.010)。另外,SYT-SSX1与SYT-SSX2型滑膜肉瘤的AI分别为(1.66±1.84)%和(1.65±2.22)%,两组无统计学差异(t=0.022,P=0.982);不同SYT-SSX亚型病例的Bcl-2和Bax表达情况无明显差别(分别P=0.156,P=0.321)。结论:SYT-SSX融合基因亚型可能影响滑膜肉瘤肿瘤细胞的增殖,SYT-SSX1型病例肿瘤细胞的增殖能力较强;但是,SYT-SSX1与SYT-SSX2可能在调节细胞凋亡方面的能力无明显差别。

滑膜肉瘤融合基因SYT-SSX的检测及意义分析

目的 研究逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)在滑膜肉瘤石蜡包埋组织中检测SYT SSX融合基因的可行性和意义。方法 2 0例滑膜肉瘤标本均用 10 %福尔马林固定、石蜡包埋。采用RT PCR检测SYT SSX融合基因。看家基因PBGD作为内参照。结果 所有标本均可检测到PBGDmRNA的表达。 18例 (90 % )检测到融合基因SYT SSX的表达。SYT SSX1型占12例 (6 6 7% ) ,SYT SSX2型占 6例 (33 3% )。结论 在经福尔马林固定经石蜡包埋组织的滑膜肉瘤用RT PCR方法检测SYT SSX融合基因是可行的 ,有较高的敏感性。融合基因亚型可能为预后提供重要信息。

一步法RT-PCR检测石蜡包埋滑膜肉瘤中SYT-SSX融合基因的表达

运用一步法RT PCR技术检测 14例石蜡包埋滑膜肉瘤组织中t(x ;18) (p11.2 ;q11.2 )染色体易位所致的融合基因SYT SSXmRNA的表达 ,尤文氏肉瘤和恶性黑色素瘤各一例做对照。结果表明 ,14例滑膜肉瘤中 12例有SYT SSX融合基因的表达 (85 7% ) 。

滑膜肉瘤融合基因SYT-SSX cDNA的克隆与序列分析

利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法获得SYT-SSX的cDNA。克隆入PUCm-T载体后,在美国ABI DNA自动测序仪上以反向引物测序法进行核苷酸序列的测定,扩增出98 bp的特异性片段,并筛选出阳性重组克隆质粒PUCm-SYT-SSX。获得的滑膜肉瘤融合基因SYT-SSX的cDNA,为深入揭示滑膜肉瘤分子发生机理奠定基础,同时可进一步完成原核表达。

荧光原位杂交技术检测SYT- SSX融合基因对滑膜肉瘤的诊断价值分析

目的:探讨荧光原位杂交技术(FISH)检测SYT-SSX融合基因对滑膜肉瘤的诊断价值。方法:选择2013年6月至2017年6月我院收治的96例经病理诊断为滑膜肉瘤患者为研究对象,所有患者经手术或活检取组织制作组织芯片,应用FISH技术检测SYT-SSX融合基因,免疫组化(IHC)检测常规抗体表达,对比两种检测方法的结果。结果:IHC结果显示,96例患者中Vimentin、CD99、AEl/AE3、EMA、CD34、Calponin、Ki-67的阳性表达率分别为100.00%、73.96%、90.63%、6.25%、29.17%、16.67%、60.42%。FISH检测结果显示,90例患者存在SYT基因易位,其中58例为考虑滑膜肉瘤,32例为可疑滑膜肉瘤,SYT-SSX阳性细胞百分率16.25%时诊断滑膜肉瘤的灵敏度、特异度、准确率分别为91.14%、100.00%、93.02%。FISH与IHC诊断滑膜肉瘤具有一致性(Kappa=0.43)。结论:FISH技术检测SYT-SSX融合基因灵敏度和特异度高,与IHC具有较高一致性,诊断滑膜肉瘤时可互相补充。

Detection of the SYT-SSX Fusion Gene in Synovial Sarcoma

Objective: To investigate the feasibility and significance of detecting SYT-SSX fusion gene in paraffin-embedded tissues of synovial sarcoma (SS) by reverse-transcriptase polymerase chain reaction(RT-PCR) methods. Methods: Twenty cases of SS tumors from archival materials were collected and all samples were formalin-fixed and paraffin-embedded (FFPE). SYT-SSX fusion transcript was detected by RT-PCR. Home-keeping gene Porphobilinogen Deaminase (PBGD) was regarded as internal control.Results: PBGD mRNA was detected in all 20 tumor cases (100%). SYT-SSX fusion transcript was detected in 18 tumor cases (90%). In 18 SYT-SSX positive SS cases, there are 12 present SYT-SSX1 fusion transcript and 6 present SYT-SSX2 fusion transcript. SYT-SSX1 fusion transcript can be seen in 9 monophasic SS and 3 biphasic SS. In 6 SYT-SSX2 positive SS cases, 4 were monophasic SS and 2 were biphasic. Conclusion: Detection of SYT-SSX fusion transcripts in FFPE tissues for diagnosis of SS is feasible and sensitive. Subtypes of SYT-SSX fusion gene may provide prognosis information.

应用RNA干扰技术阻断SYT-SSX表达治疗滑膜肉瘤的体外实验研究

目的研究siRNA(smallinterferingRNA)对滑膜肉瘤细胞系HS-SY-II中融合基因SYT-SSX表达的抑制作用,为RNAi技术在肿瘤生物治疗中的应用提供实验基础。方法体外合成3条针对滑膜肉瘤特异性融合基因SYT-SSX的siRNA,转染HS-SY-II细胞系,分别应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western杂交方法检测SYT-SSX基因和蛋白的表达情况,并用MTT比色法测定细胞的增殖活性,Annexin-FITC/PI双标记流式细胞计数检测细胞凋亡。结果设计的siRNA中,1条可以完全封闭SYT-SSX的转录,另2条分别使SYT-SSX基因表达降低至37.3%和70.1%。转染3条siRNA后,HS-SY-II细胞融合蛋白表达分别降低至75.03%、82.15%和16.59%。同时,细胞生长受到抑制,并发生细胞凋亡,凋亡率分别为32.51%、26.81%和47.19%。结论siRNA可以有效抑制HS-SY-II细胞系中融合基因SYT-SSX的表达,从而抑制细胞生长,并导致细胞凋亡。

SSX基因家族研究进展

SSX基因家族由9个成员组成,其中ssx-1、SSX-2和SSX-4经常出现在滑膜肉瘤t(x:18)染色体易位的SYT-SSX融合基因中。SSX基因家族可编码肿瘤/睾丸抗原,在睾丸以外的正常组织中,除甲状腺微弱表达外,没有发现它们的存在。HOM-MEL-40是最早用重组cDNA表达文库血清学分析技术确定的由SSX-2基因表达的抗原。近来的研究发现蛋白SSX-241-49是CD8+CTL免疫识别的优势表位,而SSX-237-58和SSX-219-34分别是CD4+T细胞识别相关的HLA-DR及HLA-DP限制表位。日本学者也发现SYT-SSX基因融合蛋白断裂点衍生肽是MHC工分子HLA-A24和HLA-B7限制的CTL识别的表位。所有这些研究,证明SSX基因家族编码蛋白是肿瘤免疫治疗有前景的靶标之一。

细胞周期调控相关蛋白表达与滑膜肉瘤融合基因分型的关系

目的:研究SYT-SSX融合基因不同亚型在滑膜肉瘤中的表达情况,从蛋白质水平研究不同融合基因类型在细胞周期因子cyclinD1、cDK4、p21WAF1/CIP1、p27等表达上的差异,从而为进一步探索融合基因的作用机制提供实验依据。方法:选取天津医科大学附属肿瘤医院1974年4月～2005年8月收治的滑膜肉瘤患者中SYT-SSX融合基因表达阳性的病例54例,提取石蜡包埋组织中的RNA,通过逆转录-聚合酶链反应检测SYT-SSX亚型的表达,制作组织芯片,使用免疫组织化学染色的方法检测不同类型融合基因CvclinD1、CDK4、p21WAF1/CIP1、p27的表达情况,比较这些细胞周期相关蛋白分别在SYT-SSX1和SYT-SSX2阳性病例中的表达差异。结果:54例滑膜肉瘤患者中SYT-SSX1型患者22例(40.74%),SYT-SSX2型患者32例(59.26%),SYT-SSX1与SYT-SSX2阳性滑膜肉瘤中,CyclinD1,CDK4,p21WAF1/CIP1和p27表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论:SSX1型滑膜肉瘤患者与SYT-SSX2型患者相比,肿瘤具有更强的增殖能力;SSX1型的融合基因表达更多的CyclinD1/CDK4,而表达较少的抑制肿瘤的CDI家族p21 WAF1/CIP1、p27,提示可能是因为SSX1促发了某种转录机制使得细胞较SSX2型更易进入细胞周期而获得恶性表型,同时促使肿瘤细胞逃避细胞增殖的监督机制。

滑膜肉瘤相关发病机制的研究进展

滑膜肉瘤(synovial sarcoma,SS)是源于关节、滑膜及腱鞘滑膜的软组织恶性肿瘤,因其在关节周围的经典表现而得名。滑膜肉瘤可发生在身体任何部位,但以四肢近关节处多见。95%的SS以t(X;18)(p11.2-q11.2)染色体易位为特点,形成融合基因SYT-SSX,从而通过Wnt/β-catenin、Pc G和ERK等信号通路促进SS细胞发生。另外,TGF-β1、Smad、Snail和Slug通过EMT途径也参与SS的发生发展。除此之外SS的发病还涉及有许多因子改变,如Twist1、Bmi1等。近年来研究表明上述因素均和SS的发病机制有关。本文将对这些因素在SS发生发展方面的作用作一概述。

34例滑膜肉瘤分子遗传学改变的诊断学意义

目的 探讨石蜡包埋滑膜肉瘤组织中t(x ;18) (p11.2 ;q11.2 )染色体易位融合基因SYT SSXmRNA表达的诊断学意义和应用价值。方法 收集滑膜肉瘤标本 34例 ,以 14例梭形细胞肉瘤和小圆细胞肉瘤做对照 (包括 2例纤维肉瘤、2例平滑肌肉瘤、1例恶性神经鞘膜瘤、4例Ewing肉瘤、2例腺泡型横纹肌肉瘤、2例恶性黑色素瘤、1例血管外皮瘤 )。在进行免疫组织化学指标检测的基础上 ,用一步法逆转录 -聚合酶链反应 (RT PCR)技术检测 34例石蜡包埋滑膜肉瘤组织中SYT SSX的表达。结果 34例滑膜肉瘤中 30例获得有效RNA ,2 8例 (93.3% )检出SYT SSX融合基因表达。其中 14例表达SYT SSX1型者中 10例为双相型 ,9例表达SYT SSX2型者中 5例为单相分化型 ,5例SYT SSX1/ 2均未检出。对照组均未检出SYT SSX基因的表达。结论 SYT SSX融合基因表达可作为诊断滑膜肉瘤新的分子诊断指标。一步法RT PCR是一种理想而可行的用于石蜡包埋滑膜肉瘤组织SYT SSX融合基因检测的分子诊断技术。

Detection of SYT-SSX fusion transcripts in paraffin-embedded tissues of synovial sarcoma by reverse transcription-polymerase chain reaction

OBJECTIVE: To assess the feasibility of detecting SYT-SSX fusion transcripts in paraffin-embedded tissues of synovial sarcoma by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). METHODS: RT-PCR was used to amplify the SYT-SSX fusion transcripts using archival formalin-fixed paraffin-embedded tumor specimens from a series of 37 synovial sarcoma cases. To investigate the specificity of the SYT-SSX fusion transcripts, a variety of non-synovial sarcoma tumors were included in the study as negative controls. The detected messages derived from fusion genes were confirmed by subsequent sequence analysis. RESULTS: SYT-SSX fusion transcripts were detected in 33 of 37 (89.2%) synovial sarcomas. None of the 34 cases of non-synovial sarcoma tumors showed amplified products of SYT-SSX fusion transcripts, although PBGD mRNA was detected in all specimens. Among 33 SYT-SSX-positive synovial sarcomas, 22 tumors had an SYT-SSX 1 fusion transcript, whereas 6 tumors had an SYT-SSX2 fusion transcript. Fusion types can not be distinguished in the remaining 5 cases. There was a significant relationship between SYT-SSX fusion type and histologic subtype. All 10 biphasic synovial sarcomas had the SYT-SSX1 fusion, whereas all tumors with SYT-SSX2 were of monophasic morphology (P

肺原发性滑膜肉瘤5例临床病理分析

目的探讨肺原发性滑膜肉瘤(primary pulmonary synovial sarcoma,PPSS)的临床病理学特征和影像学表现。方法回顾性分析苏州大学附属第一医院2011年7月~2019年5月确诊的5例PPSS临床病理学特征、影像学表现、免疫表型和SYT-SSX融合基因情况。结果5例PPSS年龄14~63岁,中位年龄29岁。2例因发热、不同程度的胸痛及胸闷等症状就诊,3例无明显症状,体检发现。镜检:4例为梭形细胞型,肿瘤细胞为均匀一致的梭形细胞,呈片状、束状排列,无腺体结构;1例为低分化型,由胖梭形细胞组成,具有明显异型性,核分裂象易见。免疫表型:5例vimentin、BCL-2、CD99、TLE-1和EMA均阳性,2例CD56灶状阳性,CK(AE1/AE3)、CK7、TTF-1、CD34、SMA、S-100等均阴性,Ki-67增殖指数为70%~80%。5例行FISH和SS18-SSX免疫组化检测,其中4例SS18-SSX融合基因阳性,5例均接受手术治疗,开胸术和胸腔镜术在手术时长和患者术后入院天数上无明显差异,随访期间3例死亡,1例复发。荟萃分析显示,SYT-SSX融合基因阳性明显提高PPSS的复发率(OR=2.47,95%CI:1.54~3.96,P<0.05)。结论PPSS预后差,临床特征及影像学表现特异性差,易与其他肺部肿瘤混淆,结合病理检查、免疫表型和SYT-SSX融合基因检测有助于确诊。

滑膜肉瘤中P300与EMT相关蛋白的表达及临床意义

目的通过检测滑膜肉瘤(SS)组织中组蛋白乙酰转移酶P300及上皮间叶转化(EMT)相关分子的表达,探讨P300在SS双相分化及EMT中的作用及临床意义。方法收集40例SS石蜡包埋组织样本,运用RT-PCR方法检测SS的SYT-SSX融合基因亚型;免疫组化检测P300及EMT相关分子的表达。结果①40例SS中[双相型滑膜肉瘤(BSS)30例,单相型滑膜肉瘤(MFSS)10例],37例存在SYT-SSX融合基因(包括SYT-SSX1、SYT-SSX2),其中BSS为90%(27/30)(SYT-SSX166.7%,SYT-SSX233.3%);MFSS为100%(10/10)(SYT-SSX180%,SYT-SSX220%),SS组织学类型与融合基因类型的差异无统计学意义。②95%(38/40)的SS病例表达P300,包括93.3%(28/30)的BSS以及100%(10/10)的MFSS,P300的表达与SS组织学类型的差异无统计学意义。③P300与SS患者临床病理参数间的差异无统计学意义;但COX回归分析显示肿瘤转移(P=0.019)和TNM分期(Ⅲ~Ⅳ)(P=0.003)是患者总体生存时间的独立危险因素。④BSS中P300阳性的病例与EMT相关蛋白β-catenin的表达差异有统计学意义(P=0.027);MFSS中P300阳性的病例与EMT相关蛋白Slug的表达差异有统计学意义(P=0.048),提示P300与EMT密切相关。结论P300可能参与SS的双相分化。P300可能参与SS的EMT过程,提示P300在SS的侵袭迁移中发挥了一定作用。

弥漫性特发性肺神经内分泌细胞增生合并肺原发性滑膜肉瘤1例临床分析并文献复习

目的提高对弥漫性特发性肺神经内分泌细胞增生(diffuse idiopathic pulmonary neuroendocrine cell hyperplasia,DIPNECH)及肺原发性滑膜肉瘤(primary pulmonary synovial sarcoma,PPSS)的认识,并探讨两种疾病发生的关联性。方法对本院确诊的1例DIPNECH合并PPSS的临床资料、病理学及影像学表现进行回顾性分析,并复习相关文献。结果患者为20岁男性,临床表现为胸闷、咳嗽、咯血。CT增强扫描发现:1)双肺多发斑片影;2)左肺上叶空腔伴壁结节;3)左肺下叶血肿伴肿块。术后病理诊断为弥漫性特发性肺神经内分泌细胞增生合并肺原发性单相纤维型滑膜肉瘤。随访10个月,患者无任何不适,未见复发和转移。结论 DIPNECH和PPSS均是极其罕见的疾病,临床及影像学表现复杂多样且无特异性,确诊有赖于病理学检查。

原发性心脏滑膜肉瘤1例临床病理分析

滑膜肉瘤是一类具有间叶和上皮双向分化的恶性肿瘤,可发生于任何部位,好发于四肢深部软组织,而原发心脏的滑膜肉瘤非常罕见。临床主要表现为心腔阻塞、栓塞和填塞而引起的相应症状。当发生部位不典型时,诊断往往具有挑战性,确诊依靠组织病理学形态、免疫组织化学及分子遗传学检查(SYT-SSX融合基因改变)。我们对1例原发心脏滑膜肉瘤的临床资料、病理特征、治疗及随访进行分析,并复习相关文献,以提高临床医师及病理医师对该病的认识。

原发性肾滑膜肉瘤1例报告并文献复习

目的:探讨原发性肾脏滑膜肉瘤的临床表现及病理特点,诊断和治疗方法。方法:回顾性分析1例原发性肾脏滑膜肉瘤的诊治资料并复习国内外文献。结果:患者行根治性肾切除术。经镜下检查及免疫组化染色后,病理诊断考虑为原发性肾脏滑膜肉瘤,通过RT-PCR方法检测出SYT-SSX融合基因表达,确诊为原发性肾脏滑膜肉瘤。患者未行规律化疗,术后4个月局部复发,死亡。结论:原发性肾脏滑膜肉瘤临床上罕见,免疫组化染色对鉴别诊断有重要价值,检测SYT-SSX融合基因作为确诊所需最重要的检查。患者预后差。