SYT-SSX1和SYT-SSX2基因在滑膜肉瘤中的表达及功能

目的 研究融合基因SYT-SSX1和SYT-SSX2在滑膜肉瘤中的表达及功能。方法 收集原发滑膜肉瘤标本22例及患者临床资料，采用反转录聚合酶链反应法检测SYT-SSX1和SYT-SSX2的表达并统计分析其与病理因素的相关性；应用脂质体将携带SYT-SSX1和SYT-SSX2基因的重组质粒转染到小鼠胚胎成纤维细胞系NIH3T3，四甲基偶氮唑蓝（MTT）法和迁移侵袭实验检测SYT-SSX1和SYT-SSX2的作用。结果 22例标本中11例表达SYT-SSX1，9例表达SYT-SSX2，2例两种基因均未检测到。融合基因的比例大约为1∶1，SYT-SSX1融合基因多见于在双向性滑膜肉瘤且SYT-SSX2阳性患者的肿瘤体积明显小于SYT-SSX1阳性患者的肿瘤体积（以5 cm为分隔）（P＝0.028）。稳定表达SYT-SSX1和表达SYT-SSX2的NIH3T3细胞的增殖、迁移和侵袭能力都明显增强，且SYT-SSX1阳性细胞强于SYT-SSX2阳性细胞。结论 SYT-SSX1和SYT-SSX2在滑膜肉瘤中的表达比例约为1∶1，SYT-SSX1及SYT-SSX2均能促进细胞的生长和转移，且SYT-SSX1的恶性表型更高。

SYT-SSX融合基因E-钙粘素及β-连接素对滑膜肉瘤转移的影响

目的:探讨SYT-SSX融合基因、E-钙粘素、β-连接素及临床病理学参数对评估滑膜肉瘤患者转移的意义。方法:选择临床及随访资料完整的滑膜肉瘤98例,RT-PCR方法检测SYT-SSX融合基因的亚型,免疫组织化学SP法检测F-钙粘素、β-连接素的表达。单因素和多因素分析上述因素及临床病理学参数对滑膜肉瘤患者无转移生存的影响。结果:1)31例(31.6%)滑膜肉瘤为SYT-SSX1阳性,67例(68.4%)为SYT-SSX2阳性。2)E-钙粘素的阳性表达率为38.8%(38/98),β-连接素的细胞膜阳性表达率为39.8%(39/98),细胞核/浆阳性表达率为53.1%(52/98)。3)单因素分析结果显示,年龄(P=0.003)、组织学分级(P=0.001)、SYT-SSX亚型(P=0.014)、E-钙粘素(P=0.015)及β-连接素的细胞膜表达情况(P=0.020)与滑膜肉瘤患者的无转移生存有关,而性别(P=0.190)、肿瘤部位(P=0.105)、肿瘤大小(P=0.180)、组织学分型(P=0.354)、β-连接素的细胞核/浆表达(P=0.911)、放疗(P=0.193)及化疗(P=0.249)与患者的无转移生存无明显相关。4)多因素分析结果表明,SYT-SSX1(RR=2.505,P=0.003)、E-钙粘素的表达(RR=3.282,P=0.000)、年龄(RR=2.157,P=0.004)和组织学分级Ⅲ(RR=1.784,P=0.030)是影响滑膜肉瘤转移的独立危险因素。结论:SYT-SSX1融合基因、E-钙粘素表达、组织学分级及患者年龄可以作为评估滑膜肉瘤患者转移及预后的重要指标。

滑膜肉瘤SYT-SSX融合基因转录产物的检测及其与病理表型的关系

目的检测滑膜肉瘤新鲜冰冻标本中的SYT-SSX融合基因,分析融合基因亚型与病理表型之间的关系。方法取19例2000年6月至2004年9月间在我院诊断为滑膜肉瘤新鲜冰冻标本,提取组织RNA,应用RT-PCR检测标本中SYT-SSX融合基因,明确不同融合基因亚型所占的比例;再次确认各病例的病理诊断及病理表型,分析融合基因亚型与病理表型之间的关系。结果15例(79%)标本含有SYT-SSX融合基因,其中11例为SYT-SSX1,4例为SYT-SSX2,后者中1例为罕见的SYT-SSX2变异类型。未发现其他融合基因亚型。经再次病理组织学确认,15例被确诊为滑膜肉瘤,其中双向分化型4例,单向分化型10例,分化差型1例。确诊为滑膜肉瘤的15例标本均检测到SYT-SSX融合基因。SYT-SSX2仅见于单向分化型和分化差型的病例。结论应用RT-PCR检测SYT-SSX融合基因对诊断滑膜肉瘤具有高度的敏感性及特异性。保留新鲜冰冻标本,应用恰当的引物检测融合基因,对滑膜肉瘤的基础及临床研究均具有重要意义。

细胞周期调控相关蛋白表达与滑膜肉瘤融合基因分型的关系

目的:研究SYT-SSX融合基因不同亚型在滑膜肉瘤中的表达情况,从蛋白质水平研究不同融合基因类型在细胞周期因子cyclinD1、cDK4、p21WAF1/CIP1、p27等表达上的差异,从而为进一步探索融合基因的作用机制提供实验依据。方法:选取天津医科大学附属肿瘤医院1974年4月～2005年8月收治的滑膜肉瘤患者中SYT-SSX融合基因表达阳性的病例54例,提取石蜡包埋组织中的RNA,通过逆转录-聚合酶链反应检测SYT-SSX亚型的表达,制作组织芯片,使用免疫组织化学染色的方法检测不同类型融合基因CvclinD1、CDK4、p21WAF1/CIP1、p27的表达情况,比较这些细胞周期相关蛋白分别在SYT-SSX1和SYT-SSX2阳性病例中的表达差异。结果:54例滑膜肉瘤患者中SYT-SSX1型患者22例(40.74%),SYT-SSX2型患者32例(59.26%),SYT-SSX1与SYT-SSX2阳性滑膜肉瘤中,CyclinD1,CDK4,p21WAF1/CIP1和p27表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论:SSX1型滑膜肉瘤患者与SYT-SSX2型患者相比,肿瘤具有更强的增殖能力;SSX1型的融合基因表达更多的CyclinD1/CDK4,而表达较少的抑制肿瘤的CDI家族p21 WAF1/CIP1、p27,提示可能是因为SSX1促发了某种转录机制使得细胞较SSX2型更易进入细胞周期而获得恶性表型,同时促使肿瘤细胞逃避细胞增殖的监督机制。

SYT—SSX融合基因及其亚型在滑膜肉瘤发生发展中的作用及预后意义

目的研究SYT—SSX融合基因及其亚型（SYT—SSX1和SYT—SSX2）在滑膜肉瘤中的表达情况，探讨它们在滑膜肉瘤发生发展中的作用，并评价其预后意义。方法筛选152例滑膜肉瘤组织标本（来自129例患者），提取石蜡包埋组织中的RNA，采用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测SYT—SSX及其亚型的表达，并比较SYT—SSX1和SYT—SSX2的表达与临床病理参数及预后之间的关系。结果145例（95．4％）组织标本表达SYT—SSX融合基因，其中50例（34．5％）呈SYT—SSX1阳性，91例（62．8％）呈SYT—SSX2阳性，4例（2．8％）SYT—SSX1和SYT—SSX2均为阴性。在SYT—SSX1阳性型滑膜肉瘤中，双相型、细胞角蛋白（CK）阳性和上皮膜抗原（EMA）阳性的比例显著高于SYT—SSX2阳性型（P均〈0．05）。多因素生存分析显示，肿瘤直径≥5cm[相对危险度（RR）=2．325，P=0．027]、有低分化区域（RR=2．122，P=0．048）、出现转移（RR=2．205，P=0．032）和SYT—SSX1阳性（RR=2．775，P=0．008）是提示患者预后不良的独立因素。结论大多数中国滑膜肉瘤患者可能为SYT—SSX2阳性；SYT—SSX亚型可以作为评估滑膜肉瘤患者预后的一项重要因素，SYT—SSX1阳性提示预后不良；SYT—SSX1和SYT—SSX2可能通过对不同的靶基因或对同一些靶基因不同程度的影响，呈现出调控滑膜肉瘤上皮分化能力的差异。