不同龋状况母子间口腔微生物群落结构分析

目的:应用PCR-DGGE(变性梯度凝胶电泳)技术,分析20对不同龋状况母子口腔唾液中微生物群落组成的多样性。方法:分别采集20名不同龋状况儿童及母亲的唾液样本,提取细菌总DNA,进行16SrDNA的PCR扩增及DGGE,克隆测序分析。结果:母子口腔唾液中分别检出42、48个菌种,其共同菌种为37个,归属于16个菌属,同时,检出新菌种Megasphaeraspp.,且在无龋儿童及高龋母亲唾液中分别检出Abiotrophiaspp.和Olsenellaspp.两个特异菌属。无龋组母子唾液中嗜血菌属的相对数量显著高于高龋组(P<0.001);无龋儿童携带的放线菌属相对数量也多于高龋组(P<0.001);而链球菌属,奈瑟菌属低于高龋组(P<0.001),而高龋组母亲口腔微生物中相对数量最多的为乳杆菌属,其次为放线菌属,奈瑟菌属,与无龋组比较差异显著(P<0.001)。结论:母子口腔唾液菌群组成具有多样性,且随龋状况不同而有所差异。

不同龋敏感青少年口腔细菌多样性分析

目的通过聚合酶链反应（PCR）-变性梯度凝胶电泳（DGGE）分析无龋及高龋青少年的唾液细菌多样性的差异。方法随机选择20名12~18岁青少年分为无龋组（n=10）和高龋组（n=10）,收集其非刺激性唾液,提取细菌全基因组DNA,采用通用引物进行PCR扩增,采用Quantity One软件对扩增产物DGGE指纹图谱进行分析。结果 DGGE图谱分析表明：唾液细菌的组成具有个体差异性;唾液样本中检测到的条带数无龋组为32.5±3.7,高龋组为27.3±3.4,差异有统计学意义（P=0.008）。高龋组和无龋组的Shannon-Wiener’s指数分别为2.5±0.2和2.6±0.2,二者之间的差异无统计学意义（P=0.405）。聚类分析发现,同组内大部分样本聚类位置相近,群落结构表现出较高的相似性;不同组的大部分样本未聚类在一起,群落结构呈现出一定的差异。结论无龋青少年唾液细菌的多样性显著高于高龋青少年,唾液细菌的多样性在龋病发展过程中有减少的趋势。

母子间口腔群落结构的相关性分析

目的应用聚合酶链反应（PCR）．变性梯度凝胶电泳（DGGE）技术，分析30对母子口腔唾液中菌群的相似性。方法选取3～5岁高龋、中龋和无龋儿童及其母亲各10对作为研究对象，取其非刺激性全唾液，分别提取细菌总DNA，进行16SrRNA的PCR扩增及DGGE分析。结果母子间口腔菌群组成具高度相似性。其中，无龋组母子间配对相似系数明显低于高龋组及中龋组（P〈0．05）；高龋儿童的母亲平均龋失补牙面数（DMFS）明显高于中龋和无龋儿童的母亲（P〈0．05）。结论母亲是儿童口腔菌群获得的主要来源。