上海市禽源阿贡纳沙门氏菌耐药性及脉冲场凝胶电泳分型研究

为了解上海市2010-2011年零售禽肉及禽类粪便中阿贡纳沙门氏菌（S．agona）的流行、耐药性和分子分型情况，本研究通过对零售禽肉及禽类粪便中的沙门氏菌进行分离鉴定得到14株禽源阿贡纳沙门氏菌，通过K-B法进行耐药性分析，并应用脉冲场凝胶电泳（pulsefieldgelelectrophoresis，PFGE）技术对菌株进行分型研究。结果显示，14株禽源阿贡纳沙门氏菌对头孢替呋、头孢吡肟、头孢噻肟、头孢噻甲羧肟、甲氧氨苄嘧啶等敏感，对磺胺异恶唑等具有较强耐药性（21．4％），对链霉素中度敏感率较高（92．8％），PFGE分型分为6个基因型。结果表明部分菌株间具有高度的同源性，且耐药菌株与PF—GE型间存在相关性。

从冻煮青柳蛤肉中检出阿贡纳沙门菌及定量分析

为了掌握丹东口岸进出口冷冻水产品中沙门菌的污染情况和污染程度,采用GB/T4789.4-2003前增菌和mini-VADIS法快速筛选,对阳性的样品用选择性琼脂平板划线分离并挑取可疑菌落,进行BBL.crysta自动细菌分析鉴定。采用此法从一批冻煮青柳蛤肉中检出了阿贡纳沙门菌,经MPN法计数结果为2.3/g。该血清型是引起畜禽类和人类沙门菌病传染的重要血清型,应加强对进出口冷冻水产品的卫生监测。

鸽源阿哥纳沙门菌的分离鉴定和生物学特性研究

为了解云南某鸽场的肉鸽发病原因,拟定治疗方案,试验无菌采集病鸽肝脏组织,划线于麦康凯培养基进行细菌分离培养、生化鉴定、血清型鉴定、16S rDNA同源性分析、动物回归试验、药敏试验及毒力分析。结果显示,在麦康凯培养基上可见圆形、光滑、无色半透明的菌落,初步鉴定为革兰氏阴性菌;经沙门菌属血清凝集试验和16S rDNA同源性分析,鉴定该菌为阿哥纳沙门菌(Salmonella Agona),其抗原结构式为:O抗原1(+)、4(+)、12(+),H抗原fg(+)、s(+),将其命名为SSYN036株。细菌生长曲线测定表明,该菌株生长速度较快;动物试验表明,该菌株对试验小鼠致病强,接种浓度为5×108、5×107、5×106和5×105 CFU/mL的小鼠在7 d内死亡率分别为100%、100%、60%和30%;病理切片显示产生明显的多灶性坏死炎症及炎性细胞浸润;药敏试验表明,该菌株对青霉素、苯唑西林、链霉素、强力霉素和四环素存在耐药,对利福平中度敏感,对阿莫西林、氨苄西林、庆大霉素、妥布霉素和头孢他啶等11种抗菌药物敏感;菌株毒力基因检测表明,菌株含有spvB、spiA、pagC、msgA、invA、sipB、prgH、spaN、tolC、iroN、sitC、lpfC、sifA、sopB和pefA共15种毒力基因。本研究为了解鸽源沙门菌的致病性和菌株生物学特性提供了新的信息,具有重要的公共卫生学意义。

一起由阿贡纳沙门菌引起的食物中毒的病原学研究及溯源分析

目的 对引起2022年夏季绍兴市某区一起食物中毒事件的沙门菌进行血清型、耐药表型及分子分型分析,研究分析其相关性。方法 使用玻片凝集法对6株沙门菌进行血清分型;采用微量肉汤稀释法测定分离株对14种抗生素的耐药性;采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)法对分离株进行分子分型和同源性分析,并与数据库中其他沙门菌比较。结果 6份患者肛拭子样本中检出1株阿贡纳沙门菌,7份从业人员肛拭子样本中检出2株阿贡纳沙门菌、1株婴儿沙门菌及1株阿姆德尼斯沙门菌,7份餐馆环境涂抹样本中检出1株阿贡纳沙门菌。对6株沙门菌进行脉冲场凝胶电泳分型,患者肛拭子样本、从业人员肛拭子样本、环境涂抹样本检出的3株阿贡纳沙门菌PFGE条带完全一致。6株分离菌株耐药谱相同。在绍兴市沙门菌PFGE数据库中未发现相同带型的菌株。结论 该事件是绍兴市首起由阿贡纳沙门菌感染引起的食物中毒事件,PFGE分型揭示分离株之间的相关性,为事件的分析和溯源提供了依据。

河南省德尔卑沙门菌和阿贡纳沙门菌耐药与分子分型研究

目的分析2009-2012年河南省德尔卑沙门菌和阿贡纳沙门菌临床分离株的耐药状况与脉冲场凝胶电泳（PFGE）带型,为以德尔卑沙门菌、阿贡纳沙门菌等非伤寒沙门菌为代表的食源性疾病暴发预警、调查、溯源及公共卫生意义上的抗生素使用策略提供基线与参考数据。方法根据国际PulseNet细菌性传染病分子分型监测网络公布的非伤寒沙门菌PFGE分型技术与美国临床与实验室标准协会（CLSI）沙门菌K-B法药敏测试方案,对2009-2012年分离自河南省5个哨点医院的德尔卑沙门菌与阿贡纳沙门菌进行13种抗生素的药敏测试及PFGE脉冲场凝胶电泳分子分型分析。结果 76株德尔卑沙门菌与84株阿贡纳沙门菌对8类13种抗生素均有不同程度的耐药,耐3种以上抗生素的有141株（88.13%）。其中耐3～5种抗生素38株（占23.75%）,耐6～8种抗生素66株（占41.25%）,耐9～10种抗生素22株（占13.75%）,耐11～12种抗生素15株（占9.38%）。84株阿贡纳沙门菌经XbaⅠ酶切与脉冲场凝胶电泳后获得36种带型,每种带型包含1～9个菌株,相似度50.77%～100%,以AGN27与AGN33为主要优势带型。76株德尔卑沙门菌经XbaⅠ酶切与脉冲场凝胶电泳后获得41种带型,每种带型包含菌株数1～12个菌株,相似度43.25%～100%,以DER17与DER34为主要优势带型。结论河南省临床分离株德尔卑沙门菌和阿贡纳沙门菌耐药状况较严重,PFGE带型呈现出多样性的同时又具有较显著的优势带型特点,部分带型与其对应的耐药谱具有一定的关联性及相同的聚集性。

阿贡纳沙门菌引起的聚集性腹泻病例监测及分析

目的应用脉冲场凝胶电泳(pulsed-field gel electrophoresis,PFGE)分子分型技术分析时间上高度集中的散发腹泻病例,发现可能的聚集性,并进行流行病学调查和追溯。方法利用已建立的北京市肠道多病原分子分型监测系统,采集腹泻病例粪便标本进行病原菌分离培养、生化鉴定、血清凝集、药敏试验及PFGE分子分型。结果2012年5月2-7日连续一周内,从北京市某区(县)肠道门诊采集的22份腹泻病例粪便标本中分离到9株沙门菌,血清学鉴定为阿贡纳沙门菌。XbaⅠ酶切的PFGE带型一致,与中国细菌性传染病分子分型实验室监测网络(PulseNet China)中心数据库及各地区网络实验室数据比对分析后,确认该带型为一新的图谱带型,编码为JABX01.CN0072。结论 9例阿贡纳沙门菌感染病例的发病时间和地理分布高度集中,且PFGE带型聚集成簇,提示感染菌株具有同一克隆来源。随后的流行病学调查和感染来源分析,虽并未发现共同暴露因素,但说明PFGE技术的应用可以提高监测的敏感性,应长期持续的进行病原菌分子分型监测,进一步完善PulseNet网络和运行机制。

阿贡纳沙门菌的分离鉴定及耐药性研究

目的了解阿贡纳沙门菌的污染现状及对常用抗菌药物的耐药性。方法根据GB/T4789.4-2008分离鉴定,药敏试验采用Kirby-Bauer法,判断标准按NCCLS2004年版进行。结果从所检样品中检出阿贡纳沙门菌8株,分离率为6.6%,在生禽肉中检出4株,占检出数的50%,该菌对庆大霉素、头孢曲松和氯霉素等敏感,而对四环素、磺胺甲基异恶唑和萘啶酸等具较强耐药性。结论阿贡纳沙门菌的污染较为严重,其对抗生素的敏感性和耐药性值得引起注意。

2008-2018年四川省阿贡纳沙门菌分子分型及耐药分析

目的了解2008—2018年四川省阿贡纳沙门菌(Salmonella agona)脉冲场凝胶电泳(PFGE)型别分布和耐药状况,为阿贡纳沙门菌引起的暴发预警、溯源调查及临床治疗提供依据。方法对经过生化和血清学鉴定的61株阿贡纳沙门菌进行PFGE分子分型分析,采用微量肉汤稀释法测定14种抗生素对菌株的最小抑菌浓度。结果61株阿贡纳沙门菌分离株共分为41个PFGE型,从不同年份、不同地区临床病例中分离到的部分菌株具有相同的PFGE型别,1株猪肉分离株与部分临床分离株具有相同的PFGE型别。28株阿贡纳沙门菌对14种抗生素均敏感,其余33株菌存在不同程度的耐药,其中四环素耐药率最高,为47.54%(29/61);多重耐药株共16株,占比为26.23%(16/61)。全部分离株均对亚胺培南敏感。结论2008—2018年四川省阿贡纳沙门菌分离株PFGE型别呈多样性,在四川省为散发流行状态。耐药情况较严重,耐药性存在上升趋势。

腹泻患者阿贡纳沙门菌耐药情况和毒力基因分析

目的研究急性腹泻患者分离的阿贡纳沙门菌的耐药状况、分子分型和毒力基因，为了解其流行趋势和防治其感染提供依据。方法记录2013至2014年每年4月至10月天津医科大学第二医院肠道门诊急性腹泻患者的临床资料并采集患者粪便标本，进行沙门菌分离培养、生物化学鉴定、血清型分型，对鉴定得到的阿贡纳沙门菌进行抗菌药物敏感试验、脉冲场凝胶电泳分型（PFGE）、多位点序列分型（MLST）、喹诺酮耐药决定区（QRDR）、质粒介导喹诺酮耐药基因（PMQR）和β-内酰胺酶基因（TEM、SHV、OXA和CTX-M）的PCR扩增与测序、沙门菌毒力岛（SPI）1～6、9～12和毒力质粒代表性基因的PCR检测，并分析阿贡纳沙门菌感染患者的临床特点。结果2年共检测到非重复非伤寒沙门菌119株，其中8株（6.7%）为阿贡纳沙门菌。阿贡纳沙门菌的耐药率依次为链霉素100.0%，氨苄西林和庆大霉素62.5%，萘啶酸、环丙沙星和左氧氟沙星25.0%，氯霉素、阿莫西林/克拉维酸钾和哌拉西林/他唑巴坦12.5%，对其余药物均敏感。阿贡纳沙门菌MLST分型均为ST13，PFGE显示5个克隆，有4株为同一克隆并且药敏表型完全相同。2株氟喹诺酮类（FQ）抗菌药物耐药株都出现GyrA亚基87位氨基酸密码子突变，未检出PMQR耐药基因，但其中1株环丙沙星K-B法显示敏感。5株氨苄西林耐药株都携带TEM-1b基因，其中1株对β-内酰胺/β-内酰胺酶抑制剂复合物耐药。全部阿贡纳沙门菌都扩增出SPI1～6、9、11、12的代表性基因hilA、sseL、mgtC、siiE、sopB、pagN、bapA、pagC和sspH2，未检出SPI10代表性基因sefA和毒力质粒基因spvB、prot6E。2例FQ耐药株感染者临床诊断为细菌性痢疾，其余6例FQ敏感株感染者临床诊断为急性胃肠炎。结论临床分离的阿贡纳沙门菌出现氟喹诺酮耐药和多重耐药，携带多种毒力基因，菌株对FQ的耐药性和患者病情可能有关。ST13可能是我国阿贡纳沙门菌的优势基因型，应注意防控其感染暴发。