全沟硬蜱Salp15蛋白家族成员基因的克隆与融合表达

为明确全沟硬蜱涎腺Salp15蛋白家族的基因表达情况，本文根据已知的Salp15序列设计引物对全沟硬蜱幼蜱的总RNA进行RT—PCR，克隆到可与莱姆病螺旋体外膜蛋白OspC互作的涎腺蛋白Salp15CDS序列，命名为I．Plarva5。对该蛋白做生物信息学预测，其肽链在N端含有信号肽，在c端含有与CD4分子的结合位点。与其他蜱种Salp15蛋白的相似性分别为：62．3％（北美的肩突硬蜱Ixodesscapularis）、74．5％（欧洲的篦子硬蜱Lricinusiric3）、59．4％（西伯利亚全沟硬蜱Lpersulcatus）、67．6％（日本地区的全沟硬蜱iperl）。将该cDNA序列分别加上EcoRI，SalI酶切位点，插入pMAL．c4X表达载体上，经IPTG诱导。在Transetta（DE3）上融合蛋白成功表达。此工作为研究全沟硬蜱的Salp15与莱姆病螺旋体，以及与宿主动物的相互关系奠定了基础。