Insights into salvianolic acid B biosynthesis from chromosome-scale assembly of the Salvia bowleyana genome

Salvia bowleyanais a traditional Chinese medic-inal plant that is a source of nutritional supple-ments rich in salvianolic acid B and a potentialexperimental system for the exploration ofsalvianolic acid B biosynthesis in the Labiatae.Here,we report a high‐quality chromosome‐scalegenome assembly of S.bowleyana covering 462.44 Mb,with a scaffold N50 value of 57.96 Mband 44,044 annotated protein‐coding genes.Evolutionary analysis revealed an estimateddivergence time betweenS.bowleyanaand its close relativeS.miltiorrhiza of~3.94 millionyears.We also observed evidence of a whole‐genome duplication in theS.bowleyanagenome.Transcriptome analysis showed that SbPAL1(PHENYLALANINE AMMONIA‐LYASE1)ishighlyexpressed in roots relative to stem and leaves,paralleling the location of salvianolic acid Baccumulation.The laccase gene family in S.bowley anaoutnumbered their counterparts inbothS.miltiorrhiza and Arabidopsis thaliana,suggesting that the gene family has undergoneexpansion inS.bowleyana.Several laccasegenes were also highly expressed in roots,wheretheir encoded proteins may catalyze the oxida-tive reaction from rosmarinic acid to salvianolicacid B.Thesefindings provide an invaluable ge-nomic resource for understanding salvianolicacid B biosynthesis and its regulation,and will beuseful for exploring the evolution of the Labiatae.

Observation and Comparision on Morphological Characteristics of the Seed-like Fruits of Salvia shandongensis and Its Relatives

[Objective] This study aimed to compare and analyse the morphological characteristics of the seed-like fruits between Salvia shandongensis J. X. Li et F. Q. Zhou and its relatives. [Method] The morphological characteristics of the mature seed-like fruits of Salvia shandongensis and its three congeners, S. miltiorrhiza, S. miltiorrhiza f. alba and S. bowleyana, were comparatively observed using both optical microscope and scanning electron microscope. [Result] The results showed that there were distinct differences in the shape, size and exine sculpture of the seed-like fruits of the four Danshen congeners： the seed-like fruits of S. shandongensis that were elliptical and had areolate sculpture with subquadrangular convex meshes as well as densely filamentous transverse lines were easy to be distinguished from those of S. miltiorrhiza Bge., which were broadly elliptical and had reticulate sculpture with subquadrate concave meshes. The seed-like fruits of S. bowleyana were fusiform and their ektexine had reticulate sculpture with polygonal meshes, which were slightly convex at the center, which are obviously different from those of S. shandongensis. [Conclusion] This study first accumulates data of the seed-like fruits of S. shandongensis, which provides important bases for establishing its taxonomical status and studying its germplasm. The morphological characteristics and reticulate sculpture on ektexine of the seed-like fruits S. miltiorrhiza Bge. are consistent with the previous report. The results in this study not only provide references for uncovering the genetic relationships between S. shandongensis and S. miltiorrhiza Bge., as well as the interspecific classification and identification. In addition, this study also provides new scientific proofs for the identification of Danshen species and their introduction and cultivation, genetics and breeding.

南丹参化学成分研究

目的研究南丹参的化学成分。方法对南丹参根的90%乙醇提取物,采用正相硅胶柱、SephadexLH-20以及半制备液相色谱分离纯化,通过1H NMR和13 C-NMR波谱技术对分离到的单体化合物进行结构鉴定。结果分离鉴定出11个化合物为:丹参酮(1)、隐丹参酮(2)、弥罗松酚(3)、munjistin methy lester(4)、nepetoidin B(5)、(E,E)-nepetoidin B(6)、β-谷甾醇(7)、麦角甾醇(8)、亚麻酸(9)、亚油酸(10)、salpalaestinin(11)。结论6个化合物为首次从南丹参分离得到,分别为:弥罗松酚(3)、munjistin methy lester(4)、(E,E)-nepetoidin B(6)、麦角甾醇(8)、亚麻酸(9)、salpalaestinin(11)。

秋水仙碱诱导南丹参多倍体的研究

目的：探讨秋水仙碱诱导南丹参多倍体的方法。方法：将秋水仙碱加入培养基中采用幼苗、叶片和愈伤组织3种不同的外植体进行诱导。结果：经预培养1周的叶片和愈伤组织以15mg·L^-1秋水仙碱处理1周的诱导效果最好，加倍率可达33．33％，且多数为整株加倍。加倍植株叶片较肥厚宽大、皱折增多、色深、根粗壮，气孔比二倍体明显增大，染色体数为8～64条不等。应用过氧化物酶和酯酶同工酶技术比较分析表明，变异植株与未加倍植株同工酶谱存在明显差异。结论：用秋水仙碱诱导南丹参成多倍体植株是有效的，已有部分植株已加倍成为同源四倍体。

南丹参离体快速繁殖与多倍体诱导

MS附加 6 BA 2 .0mg·L-1和IAA 0 .2mg·L-1的培养基上诱导南丹参丛生芽的频率最高 (达 10 0 % ) ,每一丛生芽数达 2 0～ 30个 ,移栽成活率 90 %。MS附加 6 BA 2 .0mg·L-1和 2 ,4 D 0 .2mg·L-1培养基上 ,叶缘及叶柄上长出绿芽或浅褐色愈伤组织 ,经多次继代仍具有分化植株能力。多倍体诱导以秋水仙碱 15mg·L-1处理愈伤组织和预培养 1周 ,处理时间 1周的叶片诱导效果较好 ,加倍率可达 33.33% ,且多数为整株加倍。加倍植株叶片较肥厚宽大、皱折增多、色深、根粗壮 ,气孔比二倍体明显增大 ,染色体数为 2 8～ 32条不等 。

基于MaxEnt的南丹参在中国的潜在分布区预测及适生性分析

[目的]对南丹参在中国的潜在分布区进行预测,并对适生性进行分析。[方法]通过收集中草药南丹参的分布信息,利用最大熵模型(MaxEnt)与地理信息系统(ArcGIS),综合相关68项环境因子,分析南丹参在中国的分布信息。[结果]全国适合于南丹参分布的地区主要集中在湖南、江西、浙江和福建等地,其高适生区面积依次为湖南省(319.44 km2)、江西省(251.39 km2)、浙江省(122.92 km2)、福建省(62.5 km2);刀切法(Jackknife)分析显示,南丹参分布主要受到降水的影响。[结论]该研究结果为南丹参的野生资源利用及其他南丹参相关研究提供了一定技术手段和理论依据。

南丹参三萜类化学成分的研究

为研究南丹参根中三萜类化学成分,该文采用95%乙醇浸泡提取,依次应用D101大孔吸附树脂、MCI、硅胶柱色谱、ODS及反相高效液相色谱方法进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定其化合物的结构。结果表明:从南丹参根提取物中分离得到9个化合物,分别鉴定为齐墩果酸(1)、2α,3α-二羟基-12-烯-28-齐墩果酸(2)、乌苏酸(3)、2α,3α-二羟基-12-烯-28-乌苏酸(4)、2α,3β-二羟基-12-烯-28-乌苏酸(5)、2α,3β,19α-三羟基-12-烯-28-乌苏酸(6)、2α,3β,24-三羟基-12-烯-28-乌苏酸(7)、psiguanin A(8)、正十六烷酸(9)。化合物1-9为首次从该植物中分离得到。

扫描电镜下山东丹参与近缘种花粉形态特征比较观察

采用光学显微镜和扫描电镜相结合,对山东丹参、丹参、南丹参发育良好成熟的花粉粒进行比较观察。结果表明:花粉粒形态、大小和外壁网状雕纹特征均具有较显著区别,首次为山东丹参新种积累孢粉学资料、确立其在植物分类学上的地位以及研究其种质,提供花粉形态的重要依据;丹参和南丹参花粉粒形态特征及外壁网状雕纹与前人报道相一致,为揭示山东丹参与丹参、南丹参之间的亲缘关系及种间分类鉴定提供了孢粉学依据;也为山东丹参药用植物新资源的开发提供科学依据。

南丹参药材薄层色谱研究

目的：建立南丹参药材的定性控制方法。方法：采用薄层色谱法分别检查药材中的丹参酮类和丹参酚酸类成分。结果：丹参酮类和丹参酚酸类成分分别在以石油醚（60-90℃）-乙酸乙酯（5∶1）和甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（2∶3∶4∶0.5∶2）为展开剂的条件下获得理想分离。结论：该方法简便、快速,可作为南丹参药材的定性控制方法 。

南丹参根化学成分及肿瘤细胞毒活性研究

目的:对南丹参根进行化学成分及肿瘤细胞毒活性研究。方法:采用硅胶柱色谱、MCI-gel、Sephadex LH-20、HPLC等方法进行分离纯化,通过核磁共振、质谱等波谱分析技术进行化合物结构鉴定;并通过MTT法进行化合物肿瘤细胞毒活性的测试。结果:从南丹参根中分离得到13个化合物,分别鉴定为:丹参酮ⅡA(1)、丹参酮Ⅰ(2)、二氢异丹参酮Ⅰ(3)、隐丹参酮(4)、15,16-二氢丹参酮Ⅰ(5)、丹参螺旋缩酮内酯(6)、表-丹参螺旋缩酮内酯(7)、柳杉酚(8)、紫丹参萜醚(9)、β-香树脂醇(10)、β-谷甾醇(11)、十六碳烯酸甲酯(12)、十八碳二烯酸(13)。结论:其中,化合物6、7和9为首次从该植物中分离得到。化合物1~5具有很好的肿瘤细胞毒活性。

南丹参化学成分研究

从南丹参根中分得分得16个化合物,经光谱和理化分析测定,鉴定了其中的10个,分别为丹酚酸C(sal-vianolic acid C)、4-羟基-1-乙烯羧基-7-(3,4-二羟基苯基)苯并[b]呋喃(4-hydroxy-1-vinyl carboxy-7-(3,4-dihydroxyphenyl)benzo[b]furan)、丹参酮ⅡA(tanshinoneⅡA),丹参酮Ⅰ(tanshinoneⅠ)、二氢异丹参酮(dihy-droisotanshinone)、7-羰基-12-羟基脱氢松香烷(7-carbonyl-12-hydroxy-dehydroabietane)、十八醇(octadecanol)、丹参内酯(tanshinlactone)、1,2-顺式-2-(3,4-二甲氧基-5-羟基苯基)-丙烯酸(1,2-cis-2-(3,4-dimethoxy-5-hydroxyphenyl)-acrylic acid、β-谷甾醇(β-sitosterol)。

丹参和南丹参及其制剂复方丹参片中丹参酮ⅡA的含量比较

目的:对丹参和南丹参及其制剂复方丹参片中丹参酮ⅡA的含量进行比较.方法:用中国药典HPLC方法对丹参和南丹参药材进行丹参酮ⅡA的含量测定;并建立了HPLC测定方法对复方丹参片中的丹参酮ⅡA进行含量测定.结果:南丹参及其为原料制成的复方丹参片中丹参酮ⅡA含量甚低,为南丹参不能作丹参入药提供了依据.结论:南丹参不可供丹参入药,不可作原料用于复方丹参片的生产.

南丹参中酚酸类成分抗氧化活性谱效关系研究

目的建立南丹参药材中酚酸类成分的指纹图谱,研究其与抗氧化活性相关性,为科学评价南丹参质量提供依据。方法采用高效液相色谱法,建立南丹参药材中酚酸类成分的指纹图谱,并通过灰色关联法和偏最小二乘法对不同产地药材指纹图谱中各共有峰的峰面积与体外抗氧化活性进行谱效相关性研究。结果获得了由12个共有峰组成的南丹参指纹图谱,结合两种统计学方法分析,明确了其抗氧化活性的4个主要有效成分。结论通过开展酚酸类成分抗氧化活性谱效关系的示范性研究,为中药南丹参的质量评价标准的制定提供了新的思路。