石见穿多糖对结肠癌SW620细胞上皮间质转化的影响

目的研究石见穿多糖对结肠癌SW620细胞上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响,探讨石见穿多糖抑制结肠癌侵袭转移的作用机制。方法采用不同浓度石见穿多糖对SW620细胞进行干预,干预时间分别为12小时和24小时;CCK-8法检测各组细胞的增殖,并选择后续实验的药物浓度和时间;细胞划痕和Transwell迁移实验来检测各组细胞的迁移能力;Transwell侵袭实验检测各组细胞的侵袭力;Western blot和qRT-PCR方法检测EMT相关蛋白E-cadherin、Vimentin及其mRNA,以及转录因子ZEB1、ZEB2、Twist1及其mRNA的表达。结果与对照组比较,石见穿多糖能够抑制SW620细胞的增殖,且浓度越高、干预时间越长,抑制作用越强,且呈浓度和时间依赖性。因此,在后续实验中,选择0.25 mg·mL^(-1)、1 mg·mL^(-1)、2 mg·mL^(-1)、3 mg·mL^(-1)作为干预浓度,选择24 h作为干预时间。与对照组比较,石见穿多糖能够抑制SW620细胞的迁移和侵袭,且浓度越高,抑制作用越强,呈浓度依赖性;与对照组比较,石见穿多糖能够上调E-cadherin及其mRNA的表达,且浓度越高,表达水平越高,呈浓度依赖性;同时下调Vimentin、ZEB1、ZEB2、Twist1及其mRNA的表达,且浓度越高,表达水平越低,呈浓度依赖性。结论石见穿多糖能够抑制SW620细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制可能与上调E-cadherin的表达,下调Vimentin、ZEB1、ZEB2和Twist1的表达,从而抑制EMT过程有关。

凉粉草多糖对鱼肌球蛋白理化性质和结构特征的影响

探究不同质量浓度凉粉草多糖(Mesona chinensis Benth polysaccharide,MCP)(0~0.10 mg/mL)对肌球蛋白理化特性(电位、粒径、表面疏水性、巯基)、结构特性(紫外光谱、荧光光谱、红外光谱、圆二色谱、电泳)和微观结构的影响,并阐明肌球蛋白-MCP相互作用机制。结果表明:随着MCP的增加,改变了肌球蛋白-MCP混合体系中的相互作用力,两者主要通过静电相互作用力、疏水相互作用等形成肌球蛋白-MCP复合物和肌球蛋白-肌球蛋白聚集体,从而使肌球蛋白-MCP混合体系的浊度增加,Zeta电位、表面疏水性整体呈下降趋势,内部颗粒的分布变宽、平均粒径(D50)整体呈减小趋势。同时,紫外光谱、荧光光谱、红外光谱、圆二色谱实验证明肌球蛋白结构因MCP质量浓度增加而改变。

凉粉草多糖的理化性质及其体外抗氧化活性

该文对不同处理方式得到的两种凉粉草多糖(Mesona chinensis polysaccharides,MCP)的理化性质和体外抗氧化活性进行研究,采用同步热分析仪、紫外光谱、红外光谱、X射线衍射、扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)等方法表征多糖结构,从DPPH自由基清除率、ABTS+自由基清除率以及还原力方面考察多糖抗氧化活性。结果表明,在动态旋转水合半径上MCP-A溶液比MCP-B溶液黏度大;热分析结果表明,MCP-A比MCP-B具有更强的耐热性;红外光谱结果表明,两种多糖都具有多糖的特征吸收峰,MCP-A为α-糖苷键和β-糖苷键的吡喃型糖苷环骨架,MCP-B为β-糖苷键的吡喃型糖苷环骨架;X射线衍射图谱表明两种多糖主要形态以非晶体存在;SEM结果表明MCP-B比MCP-A具有更大比表面积。体外抗氧化结果显示,MCP-A清除DPPH自由基、ABTS+自由基的能力比MCP-B强,二者均有较强的还原力。研究表明,两种处理方法得多糖的理化性质和抗氧化存在明显差异,MCP-A具有更高的热稳定性和抗氧化能力,可作为可潜在的抗氧化食品成分用于食品加工。

石见穿中两个酸性多糖的化学研究

目的 研究石见穿 Salvia chinensis全草中的多糖组份。方法 采用 DEAE-纤维素柱色谱和凝胶渗透色谱进行分离纯化 ,化学和光谱方法分析其结构特征。结果 分别从石见穿水提取物和稀碱提取物中分得 2个均一多糖组份 SC5和 SC6 ,其相对分子质量分别为 4 .8× 10 4和 >1.0× 10 6 ,二者均为结构复杂的酸性多糖组份。结论 SC5和 SC6都是首次从该植物分得的酸性杂多糖。

石见穿多糖对H22荷瘤小鼠的抗肿瘤免疫调节作用

前期研究发现石见穿多糖(polysaccharides from Salvia chinensis Benth.,PSSC)能有效抑制H22肝癌细胞在昆明小鼠体内的生长。在此基础上,本研究进一步探讨了PSSC对H22荷瘤小鼠免疫器官和免疫细胞的影响。通过在昆明小鼠右腋皮下注射H22肝癌细胞构建荷瘤小鼠模型。采用流式细胞术、免疫组织化学染色、酶联免疫法等实验方法评价PSSC对CD4+T细胞、CD8+T细胞、自然杀伤细胞(NK细胞)抗肿瘤免疫能力的影响。结果表明PSSC可以有效增加小鼠的脾脏/胸腺指数并促进Con A/LPS刺激的脾细胞增殖。同时,PSSC剂量依赖性地增加了荷瘤小鼠外周血单核细胞、脾脏及淋巴结中CD8+T细胞比例并提高CD8+T细胞与NK细胞在肿瘤组织中的组分含量。注射PSSC后,CD4+T细胞分泌免疫促进因子IFN-γ和IL-2的量增加,而分泌免疫抑制因子IL-4和IL-10的量减少。这一系列实验研究结果表明PSSC具有显著的抗肿瘤免疫增强活性。

石见穿化学成分的分离与鉴定

目的寻找石见穿（Salvia chinensis Benth．）的活性成分，阐明其药效物质基础。方法采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、十八烷基键合硅胶柱色谱分离；根据波谱数据分析鉴定化合物的结构。结果从石见穿中分离鉴定了9个化合物，分别为3一吲哚甲醛（indolyl-3-carbaldehyde，1）、芥子醛（sinapaldehyde，2）、松柏醛（coniferyl aldehyde，3）、丁香醛（syringaldehyde，4）、对羟基苯甲醛（p—hydroxybenzaldehyde，5）、香草醛（vanillin，6）、5-羟甲基糠醛（5-hydroxymethyl furaldehyde,7）、β-谷甾醇（β-sitosterol，8）、胡萝卜苷（daucosterol，9）。结论化合物1为首次从鼠尾草属植物中分离得到，化合物2—5、7为首次从石见穿中分离得到。

石见穿多糖SC3的化学研究

目的 研究从中药石见穿 (Salviachinensis)全草中得到的酸性多糖SC3的化学结构。方法 利用化学方法 (糖组成分析、甲基化分析、糖醛酸还原及部分酸水解 )和光谱方法 (IR ,NMR ,ESI MS)分析其结构特征。结果 SC3的分子量为 7 7× 10 4,由鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖和半乳糖醛酸组成 ,甲基化分析、部分酸水解和NMR ,ESI MS进一步分析了糖残基的连接方式和序列。结论 SC3为一结构复杂的酸性杂多糖 ,为首次从该植物中分得。

石见穿多糖对脂多糖和D-氨基半乳糖胺联合诱导小鼠急性肝衰竭的保护作用

目的研究石见穿多糖(PSSC)对脂多糖(LPS)/D-氨基半乳糖胺(Ga IN)诱导小鼠急性肝衰竭(ALF)的保护作用及可能机制。方法将昆明小鼠随机分为正常组、模型组、PSSC 30和100 mg·kg^(-1)给药组。给药组每日1次,连续给药1周。给药结束后,除正常组外,其余各组ip给予LPS 10μg·kg^(-1)和Gal N700 mg·kg^(-1),制备小鼠ALF模型。HE染色法检测肝组织病理变化;用试剂盒法检测血清谷草转氨酶(GOT)和谷丙转氨酶(GPT)及肝过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)水平;DCFH-DA荧光探针法检测肝组织活性氧(ROS)的相对含量;ELISA法测定血清及肝组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL^(-1)β)和IL-6的含量;胱天蛋白酶3活性测试试剂盒检测小鼠肝组织匀浆中胱天蛋白酶3的活性。结果与正常对照组相比,模型组小鼠肝细胞排列杂乱,胞质皱缩,细胞边界模糊,可见较大量的炎症细胞浸润和明显的肝组织内出血,病理评分明显升高(P<0.01);MDA和ROS含量分别升高至正常对照组的2.2倍和4.3倍(P<0.01),GSH含量下降至51%(P<0.01),抗氧化酶SOD,CAT和GSH-Px的活性分别降低至74%,36%和42%(P<0.01),TNF-α,IL^(-1)β和IL-6的水平有明显提高(P<0.01),胱天蛋白酶3活性升高至正常对照组的5.3倍(P<0.01)。与模型组相比,PSSC组小鼠存活比例明显升高(P<0.01);小鼠肝组织病理评分降低(P<0.01);MDA和ROS含量升高(P<0.01),GSH含量下降(P<0.01);TNF-α,IL^(-1)β和IL-6的含量降低(P<0.01);胱天蛋白酶3活性降低(P<0.01)。结论 PSSC对LPS和Gal N联合诱导的小鼠ALF具有良好的缓解作用,该作用可能与降低肝氧化应激、抑制肝炎症反应和细胞凋亡相关。

石见穿化学成分及药理研究进展

石见穿具有抗氧化、抗肿瘤等作用,目前对石见穿化学成分、药理作用的研究已取得一定的进展,尤其在其抗肿瘤方面的作用受到医药领域的广泛关注。对石见穿的化学成分和药理作用作进一步的研究将有利于开发新的药物和充分利用天然药用资源。

柱前衍生超高效液相色谱-串联四极杆质谱法测定仙草多糖组成及其含量

建立了测定仙草多糖组成及其含量的超高效液相色谱-串联四极杆质谱分析方法。仙草样品在碱性条件下用沸水提取,提取液经固相萃取小柱净化后加三氟乙酸在110℃水解,然后采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生。以Waters ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm i.d.×50 mm,1.7μm)为分析柱,乙腈和缓冲盐溶液(0.5 mmol/L乙酸铵-0.05%乙酸)为流动相进行梯度洗脱分离,流速0.5 mL/min,电喷雾正离子多反应监测模式检测,内标法定量。结果显示8种单糖在1～100μmol/L浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数r2均大于0.96,方法的回收率为84%～112%,相对标准偏差(RSD)不高于4.7%。仙草多糖由甘露糖、鼠李糖、核糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和木糖8种单糖组成,其摩尔百分比为7.4%、5.7%、4.2%、0.9%、28.4%、26.5%、16.4%和10.6%。该法简单、快速、灵敏高、重现性好,可用于仙草多糖的单糖组成分析和含量测定。

石见穿总酚酸对小鼠四氯化碳急性肝损伤的保护作用

[目的]研究石见穿总酚酸对受四氯化碳损伤的小鼠肝脏保护作用及其可能机制。[方法]将60只昆明种小鼠随机分为对照组和模型组,石见穿设高、中、低剂量组,阳性对照组(水飞蓟宾),共6个组。灌胃给药连续5d,皮下注射1ml/kg50%四氯化碳花生油溶液,24h测定血清天门冬氨基酸转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)及组织中总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)的含量。[结果]与模型组比较,石见穿总酚酸高、中、低剂量组血清AST、ALT活性均显著降低;组织中T-AOC能力、GSH含量显著增加,MDA含量降低,均呈现剂量依赖性变化。病理学切片也显示石见穿总酚酸对肝保护的作用有剂量依赖关系。[结论]石见穿总酚酸对小鼠四氯化碳急性肝损伤具有一定的保护作用,作用机制可能与其抗氧化作用有关,石见穿总酚酸可增强组织抗氧化能力,降低四氯化碳引起的脂类过氧化,保护细胞膜免受损伤。

RP-HPLC测定石见穿中丹参素的含量

目的:建立石见穿中丹参素的含量测定方法。方法:采用反相高效液相法,以甲醇-0.1%冰醋酸(20∶80)为流动相,柱温为30℃,检测波长为280nm。结果:丹参素进样量在1.9248～5.7744μg具有良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为100.6%,RSD=1.2%。结论:该法灵敏度高、重现性好,可用于石见穿的质量控制。

石见穿的药用成份及在抗肿瘤方面的研究

石见穿主要包括糖类、三萜类、多酚类等成分,在抗肿瘤领域研究广泛。本文通过查阅近几年国内外文献,对唇形科鼠尾草属植物石见穿的化学成分和抗肿瘤作用机理以及临床应用进行文献整理和分析,为其进一步研究和应用提供参考。

甘草提取物、石见穿提取物、紫参汤对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用的比较

甘草提取物,石见穿提取物和紫参汤对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用的比较。采用腹腔注射0.2%四氯化碳玉米油溶液10mL/kg造成小鼠急性肝损伤模型,采用赖氏法测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性,可见光法测定过氧化氢酶(CAT)活力,以TBA比色法测定血清和肝组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性,以及丙二醛(MDA)含量。结果显示紫参汤可显著降低四氯化碳致肝损伤小鼠血清ALT和AST水平升高,明显降低肝脏MDA含量,提高肝匀浆和血清SOD活性。由此可知,紫参汤对四氯化碳致小鼠急性肝损伤有一定的保护作用,且药效优于单用甘草或石见穿。其机制可能与抑制脂质过氧化有关。

石见穿多糖诱导肝癌细胞凋亡的实验研究

目的探讨石见穿多糖诱导人肝癌HepG2细胞凋亡作用。方法荧光显微镜观察细胞凋亡的形态学改变;利用流式细胞仪Annexin V-FITC/PI法检测经不同浓度石见穿多糖作用的肝癌HepG2细胞的凋亡率。结果荧光显微镜观察可见HepG细胞不同时期凋亡形态学改变;石见穿多糖各浓度组平均细胞凋亡率分别为25mg/L组(8.27±1.84)%、50mg/L组(13.53±2.67)%、100 mg/L组(22.03±2.48)%,显著高于对照组(0.57±0.23)%(P<0.01)。结论石见穿多糖能够诱导肝癌细胞HepG2凋亡,且凋亡率随着石见穿多糖浓度的增加而增高。

仙草多糖的分离纯化及鉴定

仙草（Mesona Chiliensis Benth）是我国的一种民间草药。用0.5％NaHCO3抽提,乙醇沉淀得到了仙草多糖的粗品。经过H2O2脱色处理,Sephadex G-75柱层析和硫酸—苯酚法收集单一峰部分,得到仙草多糖纯品（简称MCPS）,薄层层析、凝胶电泳和醋纤薄膜电泳证明其为均一性多糖。红外光谱扫描表明,它具有典型的多糖吸收峰。HPLC法测得相对分子量为4.3×104,经薄层层析确定MCPS的单糖组成为葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、木糖、鼠李糖,半乳糖醛酸及一种未知单糖。药理实验表明,它具有免疫促进作用与抑瘤效应。

石见穿多糖增强γδT细胞对骨肉瘤细胞的杀伤作用

目的探讨石见穿多糖(polysaccharides from salvia chinensis,PSSC)作用对γδT细胞增殖以及对骨肉瘤细胞杀伤活性的影响及其分子机制。方法分别采用不同质量浓度的PSSC处理γδT细胞和骨肉瘤细胞24、48、72 d,然后以细胞计数试剂盒(CCK-8)检测PSSC对γδT细胞和骨肉瘤细胞增殖的影响,确定PSSC最佳诱导条件。后续实验均采用最佳条件诱导γδT细胞。酶连免疫吸测定(ELISA)检测PSSC诱导前后γδT细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)和γ干扰素(IFN-γ)的水平;流式细胞术细胞术检测γδT细胞穿孔素、颗粒酶素B、CD107a和NK细胞受体G2D(NKG2D)的表达变化。乳酸脱氢酶释放法检测PSSC对γδT细胞杀伤骨肉瘤细胞活性的影响。流式细胞术检测PSSC对γδT细胞诱导骨肉瘤细胞凋亡作用的影响。结果 5.00、10.00、20.00、40.00 mg/L的PSSC均可促进γδT细胞增殖,以20.00 mg/L的PSSC诱导48 h时作用最为明显(P<0.05)。经PSSC诱导后的γδT细胞TNF-α、IFN-γ、穿孔素、颗粒酶素B、CD107a和NKG2D的表达显著高于对照组(P<0.05),对骨肉瘤细胞的杀伤率和诱导凋亡率显著高于对照组(P<0.05)。结论石见穿多糖能够促进γδT细胞增殖,并增强其对骨肉瘤细胞的杀伤作用和凋亡诱导作用,其机制可能与促进细胞表面穿孔素、颗粒酶素B、CD107a和NKG2D的表达和增加TNF-α和IFN-γ的分泌有关。

石见穿化学成分及药理研究进展

核桃树皮具有抗氧化、抗肿瘤等作用,目前对石见穿化学成分、药理作用的研究已取得一定的进展,尤其在其抗肿瘤方面的作用受到医药领域的广泛关注。对石见穿的化学成分和药理作用作进一步的研究将有利于开发新的药物和充分利用天然药用资源。

流式细胞术检测石见穿多糖诱导的肝癌细胞凋亡率

目的探讨石见穿多糖抑制肝癌细胞SMMC-7721增殖的机制。方法利用流式细胞仪Annexin V-FITC/PI法检测经不同浓度石见穿多糖作用的SMMC-7721肝癌细胞的凋亡率。结果石见穿多糖各浓度组平均细胞凋亡率为(7.87±1.860)%、(13.63±2.87)%、(21.05±2.68)%,显著高于对照组(0.67±0.28)%。结论石见穿多糖能够诱导肝癌细胞SMMC-7721凋亡,且凋亡率随着石见穿多糖浓度的增加而增高。

石见穿多糖注射液对Lewis肺癌小鼠肿瘤抑制率研究

目的:研究石见穿多糖注射液对Lewis肺癌小鼠的抑瘤率。方法:培育Lewis肺癌小鼠,腹腔注射石见穿多糖注射液和顺铂进行治疗,计算肿瘤抑制率。结果:与模型组比较,各给药组肿瘤生长抑制率均明显增高。结论:石见穿多糖注射液对于Lewis肺癌小鼠有明显治疗作用。