Effects of salvia miltiorrhiza bung （SMB） onosteoblast－like cell lin （clonal MC3T3－E1 cells）

Objective:To investigate the role of SMB on the growth , differentiation and metabolism of osteoblastlike cells in vitro, we studied the effects of SMB on DNA synthesis and alkaline phosphatase(ALPase) activity of the cloned osteoblast like cells-MC3T3-E1. Methods: The cells were cultured in α-MEM with 0. 3% of fetal bovine serum and treated with SMB at the concentration of 0. 1 - 10. 0 g/L. Results : There was no significant difference in DNA synthesis between the groups in different concentration of SMB and the group of control. But SMB increased ALPase activity in a concentration-dependent fashion in later stage of cells , and up to maximum at the level of 5. 0 g/L , in which concentration , ALPase activity was about 135 % greater than that of control. However ,ALPase activity was inhibited in early stage of cells by the addition of SMB. Conclusion : SMB has the stimulating effect on the activity of osteoblast-like cells in vitro, and may play an important role in accelerating the remodeling of bone in vivo as well.

丹参对抗磷脂综合征小鼠T细胞亚群和IL-2生物活性的影响

目的 :观察丹参注射液对β2 糖蛋白Ⅰ (β2 glycoproteinⅠ ,β2 GPⅠ )诱导的抗磷脂综合征 (antiphospholipidsyndrome,APS)自身免疫小鼠外周血T细胞亚群和IL 2生物活性的影响 ,以探讨其对APS的治疗作用机制及免疫药理作用 .方法 :6 0只 4wk龄雌性昆明种小鼠被随机分为小、中、大剂量组及中剂量对照、模型、空白对照 6组 ,小、中、大剂量组及中剂量对照组经腹腔注射不同剂量的丹参注射液 ;1 4d后 ,小、中、大剂量组及模型组多部位皮下注射 β2 GPI检测外周血T细胞亚群和IL 2生物活性 .结果 :与模型组相比 ,小、中、大剂量组均可降低TH/TS 比值 (P <0 .0 5或P <0 .0 1 ) ;中剂量对照与空白对照组相比无统计学意义 (P >0 .0 5 ) ;药物剂量与TH/TS 比值存在负相关 (P <0 .0 1 ) .与模型组相比 ,小剂量组对IL 2活性无明显影响 (P >0 .0 5 ) ,而中、大剂量组则使之明显降低 (P <0 .0 1 ) ;中剂量对照与空白对照组无明显差异 (P >0 .0 5 ) ;药物剂量与IL 2活性存在负相关 (P <0 .0 1 ) .TH/TS 比值和IL 2生物活性呈正相关 (P <0 .0 1 ) .结论 :丹参注射液可抑制自身免疫小鼠TH/TS 比值和IL 2 ,且对空白对照组TH/TS 比值和IL

紫花丹参和白花丹参不同部位有效成分的分布特征

【目的】探讨紫花丹参、白花丹参中根、茎、叶、花等部位有效成分的分布特征。【方法】采用紫外分光光度法、NaNO2-AlCl3-NaOH法和Folin-Ciocalteu比色法测定紫花丹参、白花丹参中根、茎、叶、花等部位的总丹参酮、总黄酮、总酚酸含量,采用高效液相色谱法(HPLC)测定丹参酮ⅡA、丹参素钠、原儿茶醛和丹酚酸B的含量。【结果】总丹参酮、总黄酮、总酚酸含量在紫花丹参和白花丹参的根和叶中均较高,而在茎中较低。其中紫花丹参叶部总丹总丹参酮、总黄酮、总酚酸含量分别比茎部高2.5倍、3.8倍和3.5倍。白花丹参叶部这3类成分含量分别比茎部高2.4倍、1.8倍和1.9倍。紫花丹参和白花丹参的地上部均未检测出丹参酮ⅡA;但含有与根部相同的丹参素、原儿茶醛和丹酚酸B等3种水溶性成分,且在叶中含量较高。【结论】除根以外,丹参叶部各活性成分的含量均较高,可作为提取丹酚酸等的原料。此外,白花丹参多数部位有效成分含量高于紫花丹参,是值得进一步开发利用的种质资源。

白花丹参与紫花丹参挥发油成分的比较

用水蒸气蒸馏法提取白花丹参与紫花丹参干燥根挥发油,用气相色谱-质谱(GC/MS)联用法进行了分析测定,分别鉴定出43种和18种成分,占挥发油色谱总峰面积的84.55%和79.69%,其中共有组分为11种。白花丹参相对质量分数较高的组分为蛇麻烷(27.78%)、合铁锈醇(26.13%)和1R-[1.α(R*),4a,8aα]-α-乙烯基十氢-α,5,5,8a-四甲基-2-亚甲基,1-萘丙醇(17.37%),而紫花丹参相对质量分数较高的组分为合铁锈醇(44.39%)和7-异丙基-1,1,4a-三甲基-1,2,3,4,4a,9,10,10a-八氢菲内酯(23.41%)。实验表明,白花丹参与紫花丹参挥发油中化学成分差别很大。

钾素对白花丹参和紫花丹参产量、品质及养分吸收的影响

为研究钾肥对2种丹参的施用效果,设置5个不同施钾处理,对白花丹参和紫花丹参进行人工栽培试验,测定其产量、有效成分、养分吸收及利用情况。结果表明:钾肥与2种丹参产量之间关系密切,适当施用钾肥可促其生长,有利于养分往库的运转。然而,随施钾量和产量的增加,钾素的利用率明显下降,根中有效成分也降低,但干物质产量和有效成分产量均比对照处理提高。白花丹参钾肥生理利用率较高,而紫花丹参钾肥的农学利用率高于白花丹参。同样栽培条件下,种植紫花丹参可获得较高产量,白花丹参可获得较高丹参酮ⅡA和丹酚酸B产出。可见,钾肥对2种丹参影响规律相同,白花丹参最适施钾量为253.6kg/hm2,紫花丹参为280.3kg/hm2。

丹参和白花丹参对黄芩化感效应的比较研究

采用室内生物测定法研究不同浓度(0、0.1、0.5、1.0、5.0 g/L)的1年生、2年生丹参和白花丹参根及根茎水浸液对黄芩种子萌发和幼苗生长的化感效应。结果表明,丹参和白花丹参根及根茎水浸液对黄芩种子萌发率、发芽指数和活力指数表现出相似的影响趋势,即低浓度时促进种子萌发,随浓度增加化感抑制作用增强,浓度为5 g/L时抑制作用强烈。白花丹参根及根茎水浸液对黄芩种子萌发率的化感指数绝对值小于丹参。丹参和白花丹参根及根茎水浸液对黄芩幼苗苗高和根长表现出相似的影响趋势,高浓度时对幼苗鲜重的抑制作用较为强烈。白花丹参根及根茎水浸液对黄芩幼苗苗高和鲜重的化感指数绝对值小于丹参。丹参和白花丹参对黄芩种子萌发和幼苗生长均表现出低促高抑的双重效应,且白花丹参对黄芩的化感潜力小于丹参。该研究比较了丹参和白花丹参对黄芩的化感效应,可为优化复合种植模式提供科学依据。

泰山白花丹参干叶片高质量DNA的提取

目的为了从富含多酚和多糖的泰山白花丹参干叶片中分离出适用于AFLP分析的高质量基因组DNA。方法比较了4种DNA提取方法,获得了一种以CTAB法为基础的分离高质量完整DNA的简便、快速方法。CTAB-freeBuffer清洗,4倍CTAB抽提和固体PVP和VC防止氧化。结果使用该方法从泰山白花丹参干叶片中分离的DNAA260/A280为1.86,由此法所得的DNA可直接用于AFLP分析。结论该技术可有效地从富含多酚和多糖的药用植物组织中分离出高质量DNA。

不同钾肥用量对白花丹参产量及药材品质的影响

为保护和开发白花丹参,完善其栽培理论,本研究设置5个不同施钾处理,对白花丹参进行人工栽培试验,测定其生长发育、产量、品质、养分利用情况。结果表明,钾肥与白花丹参产量关系密切,适当施用钾肥可促其生长。然而,随施钾量和产量的增加,钾素的利用率下降,根中有效成分含量也降低,但干物质和有效成分产量均比对照处理提高,白花丹参最适施钾量为253.6 kg/hm2。

白花丹参根的酚酸类成分研究

目的:研究白花丹参的酚酸类化学成分。方法:采用大孔吸附树脂、硅胶柱层析、Sephadex LH-20和C18反相硅胶柱层析等色谱方法对白花丹参的化学成分进行分离,采用1D-NMR和2D-NMR、MS等波谱学方法,与文献数据分析比较,鉴定其结构。结果:从白花丹参水提取物分离得到10个酚酸类成分,分别为:5-羟甲基糠醛(1)、(E)-3,4'-二羟基茋(2)、丹酚酸B(3)、阿魏酸(4)、咖啡酸(5)、原儿茶酸(6)、原紫草酸单甲酯(7)、紫草酸单甲酯(8)、紫草酸二甲酯(9)、2,3-O-二-异阿魏酰基酒石酸(10)。结论:其中,化合物2、10为首次从鼠尾草属植物中分离得到,化合物1、2、4、7~10均为首次从白花丹参中分离得到。

处理后白花丹参药材中丹酚酸A超声波提取工艺及抗炎活性研究

研究了处理后白花丹参药材中丹酚酸A的超声波提取最佳工艺条件。采用超声波提取方法,以HPLC测定药材中丹酚酸A的提取率为指标,通过单因素实验考察乙醇浓度对丹酚酸A提取率的影响,在此基础上,通过L9(34)正交实验考察料液比、提取时间、提取温度、提取次数对丹酚酸A提取率的影响。结果表明最佳提取工艺条件:以料液比为1∶12的75%乙醇在30℃条件下超声波提取40 min,共提取3次。在此条件下测得处理白花丹参药材中丹酚酸A的平均含量为17.1810 mg/g。该方法稳定性和重复性好,为丹酚酸A的工业化生产提供了参考。采用THP-1巨噬细胞对得到的丹酚酸A提取物进行了抗炎活性评价,结果显示该提取物具有较好的抗炎活性。

白花丹参提取物对脂多糖损伤内皮祖细胞周期与凋亡的影响

目的探讨白花丹参提取物对脂多糖损伤内皮祖细胞周期与凋亡的作用。方法以10μg/mL脂多糖诱导内皮祖细胞损伤,制备内皮祖细胞损伤模型后用不同质量浓度白花丹参提取物干预,用MTT比色法检测各组细胞活性,用AnnexinV/PI双染法检测细胞凋亡变化,碘化丙啶单染流式细胞仪检测各组细胞周期。结果与正常对照组比较,模型组细胞增殖活性明显下降,细胞凋亡率明显增加,S期细胞比率降低,G0/G1期细胞比率增加。与模型组比较,白花丹参组细胞存活率升高,细胞凋亡率下降,且呈剂量依赖性,G0/G1期细胞比率降低,S期及G2/M期细胞比率均增加。结论白花丹参对脂多糖损伤的血管内皮祖细胞有保护作用,其机制可能是通过保护细胞周期正常进行、抑制细胞凋亡实现的。

白花丹参分根繁殖技术研究

目的为完善白花丹参栽培技术体系，研究其分根繁殖技术。方法以一年生白花丹参根段为试验对象，研究不同根段长度、不同栽植时期、不同根段部位、不同生根粉浓度与产量性状的关系。结果各处理结果表明，以根段长6-8cm、3月10日栽种、生根粉浓度150ppm的处理产量较高，根不同部位对白花丹参根性状的影响较复杂。结论根段处理成6-8cm，用根下部根条进行繁殖可获得根直径较大丹参根，用中部根条可收获较长丹参根，用上部根条进行繁殖可获得较高根重，在3月10目前后进行栽种，最迟不能迟于3月下旬，种前以150ppm生根粉浓度浸泡1／3根段30分钟为最佳。

白花丹参最佳采收期研究

以山东道地药材白花丹参为试材,研究了其不同生长时期地上部与地下部干物质积累、主要有效成分(丹参酮ⅡA和丹酚酸B)含量的变化规律,综合考虑地下部干物质重与有效成分含量最大化两因素,明确白花丹参的最佳采收期为11月上旬。

白花丹参总酚酸提取物对大鼠血栓闭塞性脉管炎的影响

目的探讨白花丹参总酚酸提取物对血栓闭塞性脉管炎模型大鼠的影响,为其临床用于治疗血栓闭塞性脉管炎提供科学依据。方法采用LC-UV-MS法对白花丹参总酚酸提取物中的主要成分进行定性分析。Wistar大鼠随机分为假手术组,模型组,白花丹参总酚酸提取物高、中、低剂量(5.63、2.82、1.41 g/kg)组,通塞脉片(0.66 g/kg)阳性对照组。大鼠股动脉注射月桂酸溶液制备血栓闭塞性脉管炎模型后第2天ig给药,每天给药1次,连续给药1周,观察用药前后大鼠的体征、血管平滑肌和纤维组织等病理变化,以及血清中血栓素B2(TXB2)、6-酮前列腺素1α(6-k-PGF1α)、内皮素(ET)水平。结果白花丹参总酚酸提取物明显减轻血栓闭塞性脉管炎大鼠患肢病变程度和范围,减轻炎症反应,减少血管内血栓形成,降低血清中TXB2、ET水平,升高6-k-PGF1α水平。结论白花丹参总酚酸提取物对血栓闭塞性脉管炎大鼠具有较好的治疗作用,其作用机制与其抗氧化、减轻血管壁炎症反应有关。

白花丹参的化学成分研究(Ⅱ)

目的研究白花丹参的化学成分。方法采用色谱法分离,波谱学数据分析鉴定结构。结果从白花丹参根的乙醇提取物中分离得到4个化合物,分别鉴定为8,9-dihydro-1,6-dimethylfuro[3,2-c]naphtha[2,1-e]oxepine-10,12-dione(Ⅰ)、丹参二醇C(Ⅱ)、鼠尾草酚酮(Ⅲ)和1,2,6,7,8,9-hexahydro-1,6,6-trimethyl-3,11-dioxanaphtho[2,1-e]azulene-10,12-dione(Ⅳ)。结论化合物Ⅰ为新化合物,命名为白花丹参酮(salmilalba-none),化合物Ⅱ～Ⅳ为首次从白花丹参中分离获得。

白花丹参与紫花丹参不同部位水溶性成分含量比较

目的:分析比较白花丹参与紫花丹参不同部位的水溶性成分含量。方法:采用毛细管电泳-场强放大样品堆积法对2种丹参的5种水溶成分进行分析比较。结果:2种丹参不同部位的成分含量存在一定差异。结论:2种丹参都具有重要的药用价值。

白花丹参丙酮酸脱羧酶基因的克隆和表达分析

目的获得白花丹参丙酮酸脱羧酶(SmPDC)全长基因,分析该基因在白花丹参不同组织部位,以及缺氧胁迫处理后的该基因表达差异。方法利用cDNA文库筛选获得SmPDC基因全长,利用半定量RT-PCR,分析SmPDC基因在白花丹参不同部位的表达情况,及缺氧处理条件下的表达情况。结果获得的SmPDC基因由2 190个核苷酸组成,编码605个氨基酸,蛋白相对分子质量约6.485×104,等电点pI 5.49;半定量RT-PCR检测,该基因在丹参的根中表达量最高,其次是茎和叶;缺氧胁迫处理会诱导该基因的表达,随胁迫时间延长表达量逐渐增加。结论白花丹参SmPDC基因是PDC家族新成员,其功能与植物耐缺氧代谢途径有关。

白花丹参带药血浆预处理对氧糖剥夺损伤的神经元的保护效应:抑制细胞凋亡

本文旨在观察白花丹参带药血浆预处理对乳鼠海马神经元氧糖剥夺(oxygen-glucose deficiency,OGD)损伤的影响及机制。培养乳鼠(出生12h)海马神经元,分为正常血浆组、低、中、高浓度白花丹参血浆组及空白对照组,前4组细胞经生理盐水或白花丹参灌胃的大鼠血浆(2.5%,5%and10%)预处理后,用含1mmol/L Na2S2O4的无糖Earle's液培养大鼠新生鼠海马神经元1.5h建立OGD模型,空白对照组正常血浆培养,不复制OGD模型。应用免疫荧光、激光共聚焦显微镜等检测神经元生存率、凋亡、Bcl-2/Bax表达水平。MTT及Annexin V/PI检测显示:空白对照组细胞凋亡少见,与正常血浆组、低浓度白花丹参血浆组相比,中、高浓度白花丹参血浆组细胞生存率提高(P<0.05),凋亡减少(P<0.05),其中高浓度白花丹参血浆组细胞生存率提高、凋亡减少更明显。中、高浓度白花丹参血浆组Bcl-2表达显著高于正常血浆组、低浓度白花丹参血浆组和空白对照组,而Bax表达则相反,且中、高浓度白花丹参血浆两组间Bcl-2、Bax表达无显著差别;各组Bcl-2、Bax阳性细胞数量呈一致性变化趋势;高浓度白花丹参血浆组Bcl-2/Bax阳性细胞数比值高于其余各组(P<0.05或0.01)。以上结果提示,白花丹参带药血浆预处理能提高OGD损伤后神经元生存率,该效应与上调Bcl-2表达、下调Bax表达,提高Bcl-2/Bax比值,抑制细胞凋亡有关。