丹酚酸B清除DPPH有机自由基活性及影响因素研究

目的探讨丹酚酸B清除DPPH自由基的活性及其影响因素。方法运用自由基反应模型观察丹酚酸B对DPPH自由基的淬灭效应。结合高效液相色谱技术分别研究温度和pH值对丹酚酸B清除DPPH能力的影响。结果在设定的反应体系下,丹酚酸B能有效清除DPPH自由基。相同浓度下其清除能力高于二丁基羟基甲苯(BHT)和抗坏血酸(AsA)。热处理后,丹酚酸B含量和清除DPPH自由基能力有不同程度下降。pH=3时丹酚酸B含量相对稳定,其清除能力较其它环境显著增加。结论丹酚酸B具有清除DPPH自由基的能力。温度对其含量和抗氧化能力有较大影响。酸性条件有利于丹酚酸B的稳定性和清除能力的增强。

HPLC法测定慢肝解郁胶囊中丹酚酸B的含量

目的建立慢肝解郁胶囊中丹酚酸B的含量测定方法。方法采用HPLC法。色谱柱:DiamonsilC18;流动相:甲醇-乙腈-甲酸-水(30∶10∶1∶59);检测波长:286nm。结果丹酚酸B进样量在0.204～3.063μg范围内线性关系良好。平均加样回收率为98.90%,RSD为0.59%。结论本法简便、灵敏、准确,可用于慢肝解郁胶囊的质量控制。

HPLC法测定心通滴丸中丹酚酸B的含量

目的:建立测定心通滴丸中丹酚酸B含量的HPLC。方法:C18柱(4.6mm×150mm,5μm),甲醇-1.7%甲酸(40∶60),流速为1mL.min-1,检测波长为286nm。结果:丹酚酸B的线性范围为0.323～1.939mg,加样回收率为98.10%。结论:该方法简便可行,结果可靠,可用于心通滴丸中丹酚酸B的含量测定。

丹参中丹参酮ⅡA和丹酚酸B的提取与纯化工艺研究

建立了同时提取丹参中丹参酮ⅡA与丹酚酸B两种主要活性成分的方法及丹酚酸B的纯化工艺。以丹参酮ⅡA与丹酚酸B的含量为评价指标,采用正交实验优化提取工艺,所得最优提取工艺为:用8倍量70%乙醇回流提取3次,每次1 h。丹参酮ⅡA的提取率在90%以上,丹酚酸B的提取率在80%以上。提取物浸膏用热水溶解,过滤,滤液浓缩为1 m L含约0.5 g生药的溶液,取150 m L以2 BV/h的速度上D101大孔树脂柱;然后用6 BV的水洗脱,再以4 BV/h的流速用8 BV的30%乙醇洗脱除杂,以2 BV/h的流速10 BV60%乙醇富集,得到纯度大于75%丹酚酸B,验证实验表明该工艺稳定可行;最后经过洗涤和甲醇重结晶,得到纯度大于99%的丹酚酸B,总得率为2.86%(以干燥根茎计算)。

肝纤维化大鼠药物血清对肝星状细胞增殖及活性型TGFβ_1含量的影响

目的:观察肝纤维化大鼠药物血清对肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)增殖及活性型TGFβ_1,含量的影响。方法:采用二甲基亚硝胺(dimethylnitrosamine,DMN)造成大鼠肝纤维化模型,经丹参酚酸B盐(Salvianolic-acid B,SA-B)与虫草多糖(Cordyceps sinensis polysaccharide,CP)联合治疗后采集大鼠血清,通过体外培养HSC,运用比色法、噻唑蓝(MTT)法及生物学检测法来观察药物血清对HSC增殖及活性型TGFβ_1含量的影响。结果:①细胞培养上清乳酸脱氢酶(LDH)活力测定显示,模型大鼠血清和药物血清无细胞毒性,正常大鼠血清组、模型大鼠血清组、药物血清组细胞培养上清LDH活力分别为(95±7.88)U/L,(72.2±11.42)U/L,(48.13±62.16)U/L,正常大鼠血清组与模型大鼠血清组比,差异有统计学意义(P<0.05)。②在对HSC增殖的影响方面,正常大鼠血清与模型大鼠血清之间的差异无统计学意义。与模型大鼠血清比较,药物血清能抑制HSC增殖(P<0.05)。③与模型大鼠血清比较,正常大鼠血清与药物血清均能减少活性型TGFβ_1含量,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:DMN肝纤维化大鼠血清与正常大鼠血清对HSC的影响不尽相同;SA-B合CP能抑制HSC增殖,并能减少活性型TGFβ_1含量。

钩葛定眩颗粒质量标准研究

目的：建立钩葛定眩颗粒的质量标准。方法：采用薄层色谱法鉴别钩藤、川芎和丹参;采用高效液相色谱法测定葛根素、丹酚酸B的含量。结果：薄层色谱斑点清晰,分离度好;高效液相色谱法测定葛根素、丹酚酸B的含量,葛根素在5.015~80.240μg/mL的浓度范围内线性关系良好（r=0.999 8,n=6）,平均回收率为99.14%,RSD为1.47%（n=9）;丹酚酸B在10.04~160.64μg/mL范围内线性关系良好（r=0.999 7,n=6）,平均回收率为98.86%,RSD为1.58%（n=9）。结论：建立的定性定量方法操作方便、灵敏度高、结果准确、专属性强,可用于钩葛定眩颗粒的质量控制。

河南产丹参水溶性提取物提取工艺研究

目的:探讨丹参水溶性提取物的最佳提取工艺。方法:以酸水为溶剂,加热回流法提取丹参水溶性提取物,采用正交试验设计考察时间、温度、pH值、提取溶剂体积等4因素,对丹参水溶性成分的影响,筛选出最佳的提取工艺;以丹酚酸B为标准品,采用HPLC法测定含量。结果:丹参水溶性提取物以酸水做溶剂,最佳提取工艺为pH值为3的酸水8,倍量,温度100℃,加热回流4 h。结论:本提取工艺所得提取物丹酚酸B含量较高,简单,经济,可行性强,适合工业大批量生产。

HPLC同时测定丹参多酚酸中丹酚酸D、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B的含量

目的:建立用HPLC同时测定丹参多酚酸中丹酚酸D、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B 4个水溶性成分的方法,并对6批丹参多酚酸进行测定。方法:采用Venusil XBP C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相0.02%磷酸水-0.02%磷酸80%乙腈水梯度洗脱;流速1 mL.min-1;检测波长280 nm;柱温30℃。结果:丹酚酸D线性回归方程为A=13 979C-1 739.2,R2=0.999 6,线性范围2.11～21.10 mg.L-1,平均回收率100.12%(RSD 1.52%),迷迭香酸线性回归方程为A=42 007C-448.58R2=0.999 7,线性范围3.94～39.40 mg.L-1,平均回收率100.60%(RSD 1.83%);紫草酸线性回归方程A=23 061C-6 319.2,R2=0.999 6,线性范围4.14～41.40 mg.L-1,平均回收率102.47%(RSD 1.53%);丹酚酸B线性回归方程A=22 186C-21 435,R2=0.999 8,线性范围为53.90～539.00 mg.L-1,平均回收率104.53%(RSD 2.00%)。结论:方法操作简单,且重复性好,可用于丹参多酚酸中丹酚酸D、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B的含量测定。

基于UPLC指纹图谱结合化学模式识别的冠心丹参胶囊质量控制研究

目的采用UPLC法建立冠心丹参胶囊的指纹图谱,并结合化学模式识别技术对其进行系统、全面和科学的质量评价。方法采用Waters UPLC超高效液相色谱仪,Acquity UPLC?HSS T3色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸水为流动相进行梯度洗脱,检测波长为256 nm,建立10批次冠心丹参胶囊的指纹图谱。通过相似度分析并结合聚类分析(CA)、主成分分析(PCA)及正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)等模式识别技术对冠心丹参胶囊的总体质量进行分析评价。结果建立的指纹图谱共标定75个共有峰,经对照品进行化学指认共鉴定了其中的13个色谱峰,分别是甜菜碱、琥珀酸、丹参素、原儿茶醛、咖啡酸、芦丁、木犀草苷、迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸A、二氢丹参酮I、隐丹参酮、丹参酮IIA。10批供试品的相似度均大于0.97,表明该药物总体质量较为稳定;但通过CA及PCA均发现不同批次药物质量之间存在微小差异,且主要分为2类,最后进一步采用OPLS-DA筛选出了导致批次药物质量差异的3种主要成分,分别为甜菜碱、芦丁和丹酚酸B。结论本研究建立的分析方法科学、准确、可靠且简便,指纹图谱结合化学模式识别技术可更加系统、全面地评价冠心丹参胶囊的药物质量,同时为今后中药制剂更进一步的质量控制研究奠定了理论基础。

HPLC-DAD-ESI-TOF/MS鉴别和测定前列欣胶囊中多种成分及其多指标定量指纹图谱研究

目的:高效液相色谱-电喷雾飞行时间质谱(HPLC-ESI-TOF/MS)联用技术用于前列欣胶囊多种化学成分快速鉴定和测定及多指标定量指纹图谱研究。方法:采用Kromasil 100-5C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.8%甲酸流动相体系进行梯度洗脱,流速0.8 mL·min^(-1),柱温25℃,检测波长300 nm;利用ESI-TOF/MS法对前列欣胶囊提取物中多种化合物进行鉴别,对已知的活性成分进行定量测定,并建立前列欣胶囊的HPLC指纹图谱。结果:应用HPLC-DAD-ESI-TOF/MS指认了前列欣胶囊提取物中的8个成分(没食子酸、绿原酸、咖啡酸、王不留行黄酮苷、异槲皮苷、丹酚酸B、丹酚酸A、隐丹参酮),定量测定结果表明各化合物线性关系良好(r=0.999 0~0.999 7);平均回收率分别为95.25%、96.85%、98.10%、96.71%、97.87%、95.80%、97.57%和96.74%。10批样品中上述各化合物的质量分数分别为194.39~209.43、242.65~253.32、82.79~86.46、132.45~146.80、169.08~188.13、402.36~429.87、595.75~637.11、112.78~122.92μg·g^(-1);10批样品的相似度在0.999 6~1.000 0之间。结论:本研究所建立的活性成分快速鉴别和多指标定量指纹图谱测定方法,为提高前列欣胶囊的质量控制水平提供了技术支持。

不同粒径的复方丹参粉末的稳定性考察

目的:考察高温、高湿、光照条件下超微粉碎对复方丹参粉末中各指标成分稳定性的影响。方法:制备不同粒径的复方丹参粉末,以综合变化率为评价指标,运用HPLC测定各粒径粉末分别在高湿、高温、光照条件下放置5,10 d后指标成分的含量变化。结果:高湿条件下,丹参中隐丹参酮和丹酚酸B的含量降低幅度较大,以粗粉的含量降低幅度最大,微粉Ⅱ的变化最小;高温对丹参酮Ⅰ、丹参素和丹酚酸B的影响较明显,其中微粉I的含量变化幅度较大,微粉Ⅱ的变化最小;光照对丹参中各指标成分的影响均较大,粗粉受光照的影响最大,微粉Ⅱ受光照影响影响最小;不同粒径复方丹参粉末中三七的各指标成分对高温、高湿和光照均较稳定。结论:光照对不同粒径的复方丹参粉末中各指标成分的稳定性影响最大,应避光保存;随着粒径的减小,复方丹参粉末的稳定性呈现先变好后变差的趋势,以微粉II的稳定性为最佳。