Biological Characteristics of Root Rot Pathogen on Sambucus chinensis

Effects of different media,pH values,temperatures,carbon and nitrogen sources on mycelial growth and sporulation of root rot pathogen on Sambucus chinensis was determined in the paper.The results showed that root rot pathogen on S.chinensis was identified as Fusariumsp.The mycelial growth and sporulation of Fusariumsp.in PSA medium was the best;the optimal temperature for mycelial growth and sporulation was from 25℃ to 30℃ and the optimal temperature was 28℃;the suitable pH values for mycelial growth and sporulation was from 5 to 7,and the optimum pH value was 6;the absence or presence of carbon sources had significant effect on growth of Fusariumsp.;sucrose was the best carbon source utilized in mycelial growth,while lactose was the worst; KNO3 was the best nitrogen source utilized in mycelial growth,while（NH4） 2 SO4 was the worst one.

陆英颗粒对急性实验性肝损伤的保护作用研究

目的:研究陆英颗粒灌胃给药对急性实验性肝损伤的保护作用。方法:采用急性CCl4肝损伤模型、D-半乳糖胺盐酸盐大鼠急性肝损伤模型、ConA致小鼠急性肝损伤模型研究陆英颗粒灌胃给药对急性实验性肝损伤的保护作用。结果:陆英颗粒对CCl4致小鼠急性肝损伤有明显的保护作用,其保肝作用可能与对抗脂质过氧化以及提高肝细胞膜和微粒体膜钙泵的活性有关;对D-半乳糖胺盐酸盐致大鼠急性肝损伤和ConA所致小鼠急性肝损伤亦有明显的保护作用。结论:陆英颗粒对多种急性实验性肝损伤有较明显的保护作用。

陆英中乌索酸提取工艺的正交优选

目的 筛选乌索酸提取的最佳工艺条件。方法 根据乌索酸的理化特性 ,选取乙醇浓度、乙醇用量、提取时间、除杂剂浓度 4个因素 ,每因素各取 3水平进行正交试验。结果 采用 7倍量 90 %乙醇加热回流 2次 ,每次 1h,3 %除杂剂除杂为最佳提取工艺条件。结论 本工艺先进合理、实用可行 ,有利于工业化生产。

黔产接骨草中总多酚的含量测定及抗氧化活性研究

以黔产接骨草药材为研究对象,建立了福林酚比色法检测接骨草中总多酚含量方法;并采用单因素结合响应面优化设计法优化接骨草中总多酚提取条件;在此基础上,同时测定接骨草不同产地、不同药用部位总多酚的含量,并以清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基和ABTS自由基的能力为评价指标,对接骨草不同药用部位抗氧化活性进行比较研究。结果表明,不同产地、不同药用部位接骨草中总多酚含量差异较大;同批次接骨草中总多酚含量依次为叶>全草>茎>根;接骨草中叶、全草、茎和根清除DPPH的IC50值分别为1.14、1.70、2.25、2.65 mg/m L,清除ABTS的IC50值分别为1.16、1.56、2.17、3.15 mg/m L,且活性大小与总多酚质量浓度呈现明显量效关系。该方法简便、快捷、重复性好,为接骨草基于总多酚含量的质量评价和质量控制提供参考,以IC50作为判定抗氧化活性强弱的指标,4个不同药用部位中以接骨草叶提取物抗氧化能力相对较强。

反相高效液相色谱法测定陆英中齐墩果酸和熊果酸的含量

目的:建立同时测定陆英中齐墩果酸和熊果酸的含量测定方法。方法:采用Hypersil-ODS2柱(4.6 mm×250 mm,5μm),甲醇-水(85:15)为流动相,流速0.8 mL·min-1,检测波长210 nm,柱温30℃。结果:齐墩果酸在2.6-104.0μg·mL-1范围内线性良好,回归方程为Y=1.269×104X-8.296×103(r=0.9999),平均回收率为102.1%;熊果酸在2.3-92.0μg.mL-1范围内线性良好,回归方程为Y=1.226×104X-5.186×103(r=0.9999),平均回收率为97.6%。结论:该法简便、准确、重现性好,适用于陆英中齐墩果酸和熊果酸的定量分析。

以陆英为原料提取乌索酸的工艺研究

目的 :研究从陆英中提取乌索酸的工艺。方法 :采用“醇提凝析法”提取分离乌索酸。结果 :产品提取率达 90 % ,纯度达 98% ,经理化常数测定和光谱鉴定 ,确证产品为乌索酸。结论 :本工艺先进实用、合理可行、有利于工业化生产。

接骨草总黄酮提取工艺及其抑菌作用的研究

以碱溶酸沉法研究接骨草总黄酮的提取条件和抑菌作用。以料液比、温度、时间、提取液p H为影响因素,进行单因素实验和正交实验,研究提取接骨草总黄酮的最优条件,调节提取液p H来沉淀总黄酮,并用比浊法和滤纸圆片法研究总黄酮的抑菌作用。结果表明,提取接骨草总黄酮的最优条件是料液比1∶40(g/m L)、温度为80℃、时间为45 min、提取液p H10,此条件下接骨草总黄酮的得率为3.11%。调节总黄酮提取液p H3.5沉淀接骨草总黄酮的量较多,其得率为2.15%。接骨草总黄酮在酸性p H4~5时对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和大肠杆菌的抑制作用较强,并能够增加三种细菌的电导率,对三种菌最小抑菌浓度分别为0.63、1.25、2.50 mg/m L。用碱溶酸沉法提取接骨草总黄酮的工艺简单,总黄酮具有较高的抑菌活性,为进一步开发接骨草的总黄酮打下了基础。

陆英提取物对急性化学性肝损伤的保护作用

目的研究陆英中保肝降酶活性部位提取物(LY)保肝降酶的功效。方法采用急性CCl4肝损伤模型、D半乳糖胺盐酸盐大鼠急性肝损伤模型、ConA致小鼠急性肝损伤模型研究LY灌胃给药对急性实验性肝损伤的保护作用,同时采用碳粒廓清实验考察了LY灌胃给药对小鼠非特异性免疫功能的的影响。结果LY对CCl4致小鼠急性肝损伤有明显的保护作用,其保肝作用可能与对抗脂质过氧化有关;对D半乳糖胺盐酸盐致大鼠急性肝损伤和ConA所致小鼠急性肝损伤亦有明显的保护作用;能增强小鼠非特异性免疫功能。结论LY对多种急性实验性肝损伤有明显的保护作用并且能增强小鼠非特异性免疫功能的作用。

陆英不同工艺提取物对四氯化碳致小鼠肝损伤的影响实验研究

目的:筛选陆英具有保肝降酶作用的优选提取工艺,并探讨陆英中保肝降酶的活性部位。方法:采用了小鼠急性CCl4肝损伤模型,对陆英不同提取工艺所得的提取物进行保肝降酶药效学筛选,并把筛选出的最佳工艺提取物用不同溶剂萃取法和大孔吸附树脂分离法对活性部位进行了探索。结果:陆英75%乙醇提取物能非常显著地对抗CCl4导致小鼠肝损伤,效果优于其他提取工艺;陆英75%乙醇提取物经乙酸乙酯萃取部分能减少CCl4导致小鼠肝损伤,效果明显弱于陆英75%乙醇总提物,而石油醚、正丁醇和水萃取部分则无明显效果;陆英75%乙醇提取物经大孔吸附树脂纯化后30%、60%和95%乙醇洗脱液的高剂量和低剂量组均能对抗CCl4导致小鼠肝损伤,但30%乙醇洗脱液的作用最显著,并呈现剂量依赖性,且效果与陆英75%乙醇总提物相似。结论:75%乙醇为陆英的优选提取溶剂,陆英75%乙醇提取物若经不同极性溶剂萃取,活性部位为乙酸乙酯萃取部分;若经大孔树脂纯化,则活性有效部分主要集中在30%乙醇洗脱液部分。

陆英的化学成分研究

从陆英Sam bucus chinensisL ind l.分离并鉴定了5个化合物分别为:β-谷甾醇(Ⅰ)、齐墩果酸(Ⅱ)、熊果酸(Ⅲ)、山柰酚-3-O-β-D-(6-O-乙酰基-葡萄吡喃糖)-7-O-β-D-葡萄吡喃糖苷(Ⅳ)和山柰酚-3-O-β-D-葡萄吡喃糖-7-O-β-D-葡萄吡喃糖苷(Ⅴ),化合物Ⅳ和Ⅴ为首次从陆英中分离得到。

中药陆英HPLC指纹图谱研究

建立了中药陆英高效液相色谱指纹图谱,为科学评价及有效控制其质量提供可靠方法。色谱柱为Kromasil C18(250mm×4.6mm,5μm)柱,流动相为乙腈-0.2%磷酸水溶液(80∶20),光电二极管阵列检测器,检测波长215nm,流速0.8mL/min,柱温30℃。建立的陆英指纹图谱中共确定了10个共有峰,各陆英样品指纹图谱与对照指纹图谱相似度均在0.9以上,可用于陆英药材的定性鉴别。HPLC指纹图谱具有良好的精密度、重现性和稳定性,可以作为陆英质量评价的主要依据之一,同时为深入研究中药陆英的质量标准提供了实验基础。

接骨草蔗糖酶同工酶的分离纯化及其部分性质研究

从接骨草幼叶中提取的蔗糖酶粗酶液经硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose离子交换层析、SephacrylS-200 凝胶过滤层析纯化,得到3种同工酶．对3种同工酶进行SDS-PAGE和IEF电泳均显示一条蛋白带,其亚基分子量分别为45．8 KD,44．3 KD,43．2 KD;等电点分别为pH 4．0,pH 3．8,pH 3．75．凝胶过滤测得3种同工酶全酶分子量分别为91．2 KD,89．1 KD,87．4 KD,表明3种同工酶均由2个相同亚基组成,其表观Km分别为30 mmol／L, 57．1 mmol／L,65 mmol／L;Vmax分别为98μg／min,48 μg／min,35μg／min．同工酶Ⅰ和同工酶Ⅲ在pH4．4-5．0 时有最大活性,同工酶Ⅱ则在pH3．9-4．2时有最大活性．3种同工酶均在pH3-6范围内比较稳定．同工酶Ⅰ和同工酶Ⅱ在48-52℃有最大活性,同工酶Ⅲ在50-55℃有最大活性．3种同工酶均在50℃以下有较好的稳定性．

陆英颗粒对CCl_4致小鼠急性肝损伤保护作用研究

目的研究陆英颗粒灌胃给药对CCl4致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法采用急性CCl4肝损伤模型,给予小鼠陆英颗粒灌胃7d,观察其对给予0.1%CCl416h后各组血清ALT、AST、TP、Alb、GLO、A/G、TG及肝组织TP、TG、MDA、T-AOC、GSH、T-SOD及Ca2+-ATPase活力的影响。结果陆英颗粒能显著对抗CCl4致小鼠急性肝损伤导致的血清中ALT、AST升高,减轻TG在肝组织内的蓄积和降低MDA的含量,提高肝组织T-SOD的活力及总抗氧化能力(T-AOC),亦能提高肝细胞膜和微粒体膜的Ca2+-ATPase的活性,减少GSH代偿性增高的程度;病理结果也表明陆英颗粒对肝细胞损伤具有明显的保护作用;并有较明显的量效关系。结论陆英颗粒对CCl4致小鼠急性肝损伤有明显的保护作用。

RP-HPLC法测定陆英叶中绿原酸含量的研究

建立反相高效液相色谱法测定了陆英叶中绿原酸的含量,同时采用光电二极管阵列检测器检测绿原酸色谱峰的纯度。色谱柱为Nova-PakC18(3.9 mm×150mm,4μm),流动相为水-甲醇-乙酸(881∶21∶,V/V),流速1.0ml/min,检测波长326nm,柱温25℃。绿原酸在0.832～4.16μg范围内线性关系良好(r=0.99992),检出限为0.4mg/L(3σ),平均回收率为97.1%。该法简便、准确、重现性好、线性范围宽,适于对含有绿原酸的药材进行质量评价。

RP-HPLC法测定陆英颗粒与陆英糖浆中乌索酸与齐墩果酸含量

目的测定陆英颗粒和陆英糖浆中乌索酸与齐墩果酸的含量。方法用RP-HPLC法。色谱柱为Kromasil C18柱（250mm×4．6mm，5μm），流动相为甲醇-水（体积比为87：13），检测波长为210nm，流速为1．0mL·min^-1，柱温为35℃，进样量为20μL。结果在该色谱条件下，乌索酸质量浓度在5．4-86．4mg·L^-1内，质量浓度与峰面积具有良好的线性关系，回归方程为A=9．58×10^3P-2．769×10^4，r=0．9990；齐墩果酸质量浓度在5．2～83．2mg·L^-1内，质量浓度与峰面积具有良好的线性关系，回归方程为A=7．604×10^3 P-2．253×10^4，r=0．9990。陆英颗粒中乌索酸与齐墩果酸加样回收率分别为101．0％（RSD=1．9％）、99．6％（RSD=1．3％）；陆英糖浆剂中乌索酸与齐墩果酸加样回收率分别为99．9％（RSD=1．4％）、100．3％（RSD=1．1％）。结论该法为陆英颗粒及陆英糖浆的质量控制提供了依据。

人工湿地植物石龙芮和接骨草对畜禽废水的净化能力研究

为了提高人工湿地在冬季对畜禽废水的净化效率,采用模拟人工湿地盆栽试验,测定了石龙芮和接骨草对畜禽废水中CODCr、TP、NH4+-N、TN、浊度的去除率及基质与植物对N、P的吸附效果,以及计算了植物地上地下生物量比(A/U)。结果表明,石龙芮和接骨草系统的出水水质中NH4+-N、浊度、TN和CODCr含量与无植物系统中的含量呈显著性差异(P<0.05),但出水水质中TP含量在3个系统中无显著性差异(P>0.05)。石龙芮和接骨草系统与无植物系统对P的吸附量无显著性差异(P>0.05);基质中土壤对P的吸附量显著高于河沙和砾石(P<0.05);在地上地下生物量比中,石龙芮床为0.82,接骨草达到1.18。可见,石龙芮和接骨草生长速度较快,较适合于需快速启动的人工湿地系统,覆盖度近100%,环境适应性强,可作为处理畜禽废水的人工湿地植物。

响应面法优化陆英中熊果酸的提取工艺

为探讨陆英中熊果酸(UA)的超声波提取工艺,通过单因素试验和Box-Behnken中心组合响应面法研究不同功率、甲醇体积分数、液料比、提取时间、温度对陆英中熊果酸提取的影响,利用Design-Expert软件得到回归方程的预测模型并进行响应面分析。结果表明,超声波辅助提取陆英中熊果酸的最优工艺条件为4.0g陆英粉于80mLφ=90%甲醇中超声提取30min,提取温度为50℃。影响熊果酸得率的4个主要因素的大小排序为甲醇体积分数>液料比>提取温度>提取时间。用优化后的工艺提取熊果酸,得率可达1.518mg/g。优化后的超声波提取工艺提取速度快、效率高、稳定可行、操作简单。

陆英颗粒质量标准研究

目的:建立陆英颗粒的质量标准。方法:采用薄层色谱法鉴别熊果酸,并应用UV测定以芦丁计总黄酮的含量。结果:TLC法专属性强,含量测定以芦丁计总黄酮在0.008～0.065mg.mL-1呈良好的线性关系,平均回收率为98.58%,RSD=0.34%。结论:本质量标准可有效地控制陆英颗粒的质量,且方法稳定、简便可行。

反相高效液相色谱法测定陆英中乌索酸和齐墩果酸含量

目的建立陆英药材中乌索酸和齐墩果酸含量的测定方法.方法选用Symmetry C18(3.9mm×150 mm,5 μm)色谱柱,流动相甲醇-水(88:12),检测波长220nm,流速0.6 mL/min,柱温25℃.结果乌索酸的线性范围0.098～2.35 μg,r=0.9999;齐墩果酸的线性范围0.099～2.38 μg,r=0.9997.乌索酸和齐墩果酸平均回收率分别为97.9 %(RSD为2.11 %)和98.6 %(RSD为1.84 %).结论本法可同时测定乌索酸和齐墩果酸含量,具有准确、灵敏、数据可靠的优点,可用于陆英药材的质量控制.

陆英提取物乌索酸的紫外和红外光谱研究

采用高效液相色谱二极管矩阵检测器测定了乌索酸的紫外光谱,建立了分析色谱峰纯度的方法.采用傅立叶红外变换光谱仪测定了乌索酸的红外光谱,得到乌索酸的特征 IR光谱结构,解析了乌索酸的 IR光谱与其结构特征的关系,确定了乌索酸 IR光谱的结构特征和官能团归属.IR光谱的谱峰形态清晰可辨,使乌索酸的主要结构和官能团均能得到准确的分析和指认,与质谱联用,推定了乌索酸的分子骨架、官能团位置和结构.