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Gene expression analysis in the larval silk gland of the eri silkworm Samia ricini 被引量:2
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作者 Takuya Tsubota Kimiko Yamamoto +1 位作者 Kazuei Mita Hideki Sezutsu 《Insect Science》 SCIE CAS CSCD 2016年第6期791-804,共14页
Insects produce silk for a range of purposes. In the Lepidoptera, silk is utilized as a material for cocoon production and serves to protect larvae from adverse environmental conditions or predators. Species in the Sa... Insects produce silk for a range of purposes. In the Lepidoptera, silk is utilized as a material for cocoon production and serves to protect larvae from adverse environmental conditions or predators. Species in the Saturniidae family produce an especially wide variety of cocoons, for example, large, golden colored cocoons and those with many small holes. Although gene expression in the silk gland of the domestic silkworm (Bombyx mori L.) has been extensively studied, considerably fewer investigations have focused on members of the saturniid family. Here, we established expression sequence tags from the silk gland of the eri silkworm (Samia ricini), a saturniid species, and used these to analyze gene expression. Although we identified thefibroin heavy chain gene in the established library, genes for other major silk proteins, such asfibroin light chain andfibrohexamerin, were absent. This finding is consistent with previous reports that these latter proteins are lacking in saturniid silk. Recently, a series offibrohexamerin-like genes were identified in the Bombyx genome. We used this information to conduct a detailed analysis of the library established here. This analysis identified putative homologues of these genes. We also found several genes encoding small silk protein molecules that are also present in the silk of other Lepidoptera. Gene expression patterns were compared between eri and domestic silkworm, and both conserved and nonconserved expression patterns were identified for the tested genes. Such differential gene expression might be one of the major causes of the differences in silk properties between these species. We believe that our study can be of value as a basic catalogue for silk gland gene expression, which will yield to the further understanding of silk evolution. 展开更多
关键词 domestic silkworm eri silkworm EST analysis samia ricini silk gland
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蓖麻蚕线粒体基因组细胞色素氧化酶亚基Ⅲ的序列及其分子进化分析 被引量:29
2
作者 魏兆军 赵巧玲 +3 位作者 张志芳 肖庆利 王章娥 何家禄 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期193-197,共5页
测定了蓖麻蚕Samiacynthiaricini线粒体基因组 (mtDNA)含完整的细胞色素氧化酶亚基Ⅲ (COX3)、tRNA Gly和部分的NADH亚基Ⅲ (ND3)基因的DNA片段序列。COX3基因编码框包含 789个核苷酸 ,编码 2 6 2个氨基酸的蛋白质。通过同源性比较 ,发... 测定了蓖麻蚕Samiacynthiaricini线粒体基因组 (mtDNA)含完整的细胞色素氧化酶亚基Ⅲ (COX3)、tRNA Gly和部分的NADH亚基Ⅲ (ND3)基因的DNA片段序列。COX3基因编码框包含 789个核苷酸 ,编码 2 6 2个氨基酸的蛋白质。通过同源性比较 ,发现COX3基因的 3′端比 5′端要保守 ,其编码的蛋白在C端有两个保守序列存在。COX3的下游为 6 6bp的tRNA Gly基因。蓖麻蚕的COX3与家蚕COX3同源性最高 ,核苷酸和氨基酸序列同源性分别是 80 2 %和 85 6 %。根据COX3氨基酸序列进行了 12种无脊椎动物的分子进化树分析 ,认为在采用线粒体基因序列进行分子进化分析时 ,应该综合考虑物种的繁殖模式及生态特点。 展开更多
关键词 蓖麻蚕 线粒体基因组 细胞色素氧化酶亚基Ⅲ 序列 COX3基因 分子进化
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蓖麻蚕线粒体基因组中nd1及其侧翼tRNA基因的克隆与结构分析 被引量:11
3
作者 沈兴家 赵巧玲 +3 位作者 张志芳 李奕仁 何家禄 韦波 《蚕业科学》 CAS CSCD 2002年第4期289-293,共5页
按KoichiroTamura等 (1988)的方法制备出蓖麻蚕线粒体DNA ,用EcoRⅠ和XbaⅠ双酶解后 ,以pSK(+)(Ampr)为载体进行克隆 ,获得 1个 3 3kb的克隆片段。测序结果表明 ,所测序列包括部分 16SrRNA、完整的tRNA Leu ,nd1和tRNA Ser基因。其中 16... 按KoichiroTamura等 (1988)的方法制备出蓖麻蚕线粒体DNA ,用EcoRⅠ和XbaⅠ双酶解后 ,以pSK(+)(Ampr)为载体进行克隆 ,获得 1个 3 3kb的克隆片段。测序结果表明 ,所测序列包括部分 16SrRNA、完整的tRNA Leu ,nd1和tRNA Ser基因。其中 16SrRNA(3’端部分 )、nd1基因与家蚕具有很高的同源性。同时以nd1基因为依据构建了 17种动物的分子进化树 ,显示出蓖麻蚕与家蚕、野蚕有最近的演化关系。根据tRNA Leu和tRNA Ser基因的一级结构 ,推定了可能的二级结构 ,并与家蚕进行了比较。 展开更多
关键词 基因组 蓖麻蚕 线粒体DNA nd1基因 侧翼tRNA基因 基因克隆 基因结构
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胰凝乳蛋白酶抑制剂在蓖麻蚕主要组织中的分布及血液中的含量和活性 被引量:1
4
作者 赵萍 张艳 +5 位作者 钟晓武 王凌燕 谭祥 董照明 莫现会 夏庆友 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期138-147,共10页
【目的】蓖麻蚕Samia cynthia ricini属于鳞翅目昆虫,其体内存在的胰凝乳蛋白酶抑制剂(chymotrypsin inhibitor,CI)对蓖麻蚕的正常生长发育和自身防御能力有重要的作用。获得蓖麻蚕的CI种类分布信息,以及研究各种CI的功能,可以为鳞翅目... 【目的】蓖麻蚕Samia cynthia ricini属于鳞翅目昆虫,其体内存在的胰凝乳蛋白酶抑制剂(chymotrypsin inhibitor,CI)对蓖麻蚕的正常生长发育和自身防御能力有重要的作用。获得蓖麻蚕的CI种类分布信息,以及研究各种CI的功能,可以为鳞翅目害虫的生物防治提供理论依据。【方法】本实验通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(native-PAGE)和CI活性染色技术,对18个蓖麻蚕品系的主要组织器官中胰凝乳蛋白酶抑制剂的多态性分布进行了调查,并对各品系血液中的蛋白含量和CI活性进行了测定。【结果】在p H 8.6电泳下,各品系血液中共检测到7条CI活性带,在p H4.0电泳下,各品系血液中可检测到3条CI活性带;血液中的CI含量从5龄第3天幼虫期到化蛹当天一直维持着很高的含量;头、体壁和脂肪体中的CI都不如血液中的CI含量高,而丝腺中未检测到任何CI。【结论】与家蚕Bombyx mori血液中的含量相比,蓖麻蚕血液中的CI含量更高,CI种类多态性分布不仅体现在不同品系的同一组织,还体现在同一品系的不同组织。 展开更多
关键词 蓖麻蚕 家蚕 组织器官 胰凝乳蛋白酶抑制剂 比活性
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蓖麻蚕雌激素样作用醇提活性部位的研究
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作者 万德光 甘明哲 高平 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期1272-1275,共4页
通过对实验雌鼠子宫、免疫器官脏器指数、阴道角化细胞发生率的检测,发现蓖麻蚕(PhilosamiacynthiaDonovan)各种醇提物(EEFM)在0.8g/kg的剂量下对实验鼠雌激素活性均达到极显著;各种醇提物对实验鼠免疫器官无显著影响(DES组显著降低实... 通过对实验雌鼠子宫、免疫器官脏器指数、阴道角化细胞发生率的检测,发现蓖麻蚕(PhilosamiacynthiaDonovan)各种醇提物(EEFM)在0.8g/kg的剂量下对实验鼠雌激素活性均达到极显著;各种醇提物对实验鼠免疫器官无显著影响(DES组显著降低实验鼠胸腺重量).各种醇提物雌激素活性相互比较结果表明:蓖麻蚕80%的醇提物(EEFM3)为蓖麻蚕醇提物雌激素样活性最佳部位.利用蓖麻蚕醇提最佳活性部位EEFM3与临床上常用的几种雌激素:E2(雌二醇)、DES(乙稀雌酚)、CEE(孕马结合雌激素)进行比较雌激素活性研究,结果表明:EEFM3在0.8g/kg的剂量下,其雌激素活性接近于雌E2与CEE(0.085×10-3g/kg),并显著增大了实验幼鼠胸腺指数.实验结果表明EEFM3对实验鼠具有显著的雌激素效应,有可能成为雌激素替代疗法(ERT)潜在药源物质. 展开更多
关键词 活性部位 雌激素活性 醇提物 雌激素样作用 实验鼠 剂量 雌激素替代疗法 蓖麻蚕 免疫器官 乙稀雌酚
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蓖麻蚕对鼠生殖系统雌激素样效应的研究(英文)
6
作者 高平 甘明哲 万德光 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2004年第6期525-528,共4页
目的 :研究蓖麻蚕雌蛾乙醇提取物 (EEFM)的雌激素效应 ,以寻找理想的ERT药源并提高蓖麻蚕的综合利用价值。方法 :根据每日药物及剂量处理 ,将雌性小鼠随机分为模型对照组 ,正常对照组 ,乙烯雌酚组 ,EEFM低剂量 (EEFM L ,0 .2g/kg·d... 目的 :研究蓖麻蚕雌蛾乙醇提取物 (EEFM)的雌激素效应 ,以寻找理想的ERT药源并提高蓖麻蚕的综合利用价值。方法 :根据每日药物及剂量处理 ,将雌性小鼠随机分为模型对照组 ,正常对照组 ,乙烯雌酚组 ,EEFM低剂量 (EEFM L ,0 .2g/kg·d-1)组 ,EEFM高剂量 (EEFM H ,0 .4g/kg·d-1)组。测定实验鼠的子宫、免疫器官脏器指数、阴道角化细胞发生率及POD活性。结果 :EEFM两个剂量对未成年雌性小鼠、成年去势雌性小鼠子宫作用效应均达到显著或极显著。EEFM对去势成年雌性小鼠角化细胞发生率的影响约为乙烯雌酚 (DES)组的 2 / 3(EEFM H :77.2 0 % ,DES :95 .7% ) ,效果极显著。结论 :EEFM对实验鼠具有显著的雌激素效应 ,对免疫器官无不良影响 (DES组显著降低实验鼠胸腺重量 ) ,有可能成为雌激素替代疗法 (ERT)的理想药源物质。 展开更多
关键词 雌性小鼠 雌激素 角化细胞 对照组 乙烯雌酚 发生率 药源 蓖麻蚕 去势 免疫器官
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再生蓖麻蚕丝素蛋白静电纺丝的结构研究 被引量:7
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作者 徐梅 左保齐 《丝绸》 CAS 北大核心 2008年第3期16-18,39,共4页
采用碳酸钠溶液对蓖麻蚕丝纤维脱胶,将脱胶后的蓖麻蚕丝素溶解于一定浓度的硫氰酸锂溶液中,透析成膜。然后将丝素膜溶解于六氟异丙醇,利用静电纺丝法制得再生蓖麻蚕丝素蛋白非织造网。通过扫描电镜观察非织造网的形态结构,红外光谱、X-... 采用碳酸钠溶液对蓖麻蚕丝纤维脱胶,将脱胶后的蓖麻蚕丝素溶解于一定浓度的硫氰酸锂溶液中,透析成膜。然后将丝素膜溶解于六氟异丙醇,利用静电纺丝法制得再生蓖麻蚕丝素蛋白非织造网。通过扫描电镜观察非织造网的形态结构,红外光谱、X-射线衍射、热分析(DTA/TG)分析纤维的聚集态结构变化。研究结果表明,再生蓖麻蚕丝素蛋白非织造网纤维直径大约在几微米,与天然丝素相比其聚集态结构有较大变化。 展开更多
关键词 静电纺丝 蓖麻蚕丝素纤维 非织造网 结构
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细胞实验检测蓖麻蚕蛹生物反应器表达的重组人表皮生长因子的生物学活性 被引量:2
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作者 伍玉婷 黄元姣 +2 位作者 雷丹青 吴勇浒 李牡艳 《广西医学》 CAS 2012年第6期673-676,共4页
目的探讨蓖麻蚕蛹生物反应器中分离纯化获得的重组人表皮生长因子(rhEGF)蛋白质的生物学活性。方法采用Tricine-SDS-PAGE和免疫印迹法(Western blot)鉴定rhEGF,通过MTT和台盼蓝法检测rhEGF的细胞活性。结果 Tricine-SDS-PAGE、Western b... 目的探讨蓖麻蚕蛹生物反应器中分离纯化获得的重组人表皮生长因子(rhEGF)蛋白质的生物学活性。方法采用Tricine-SDS-PAGE和免疫印迹法(Western blot)鉴定rhEGF,通过MTT和台盼蓝法检测rhEGF的细胞活性。结果 Tricine-SDS-PAGE、Western blot结果显示,蓖麻蚕蛹中分离纯化获得的rhEGF具有正确的分子量和免疫原性;MTT法显示,纯化的rhEGF具有酶促活性,且酶促活性优于rhEGF标准蛋白(P<0.05),其最高活性浓度为1.0μg/L,在0.0625~1.0μg/L浓度范围内具有剂量依赖性;rhEGF能够促进Balb/c3T3细胞的分裂增殖,效果优于rhEGF标准蛋白(P<0.05)。结论 AnpehEGF感染的蓖麻蚕蛹中分离纯化获得的rhEGF,具有类似天然hEGF的生物学活性,且效果优于rhEGF标准蛋白;rhEGF的细胞实验为进一步的动物实验提供了基础。 展开更多
关键词 蓖麻蚕蛹生物反应器 重组人表皮生长因子 生物学活性 细胞实验
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利用纳米孔测序鉴定蓖麻蚕病害 被引量:2
9
作者 陈大嵩 黄鸿 +2 位作者 吴华 李健雄 戴建青 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2021年第1期260-264,共5页
蓖麻蚕Samia ricini为大蚕蛾科樗蚕属的绢丝与食用的非滞育型经济昆虫,且是少数可以室内大量圈养的绢丝昆虫,全年可累代饲养。在蓖麻蚕室内大批量圈养的生产过程可能遭受毁灭性病害的侵害,包括蓖麻蚕微粒子病、脓病、软化病等,且随着累... 蓖麻蚕Samia ricini为大蚕蛾科樗蚕属的绢丝与食用的非滞育型经济昆虫,且是少数可以室内大量圈养的绢丝昆虫,全年可累代饲养。在蓖麻蚕室内大批量圈养的生产过程可能遭受毁灭性病害的侵害,包括蓖麻蚕微粒子病、脓病、软化病等,且随着累代对病原物的不停积累蚕病会呈现愈发严重的趋势,病原愈发难以清除。因此,对蚕病的监测是防控蚕病爆发的重要手段之一。掌上纳米孔测序仪MinION是一款便携式高通量测序平台,便于实地进行DNA测序并对病原物进行检测。本文通过MinION测序仪对蓖麻蚕病蚕DNA进行测序,并对未知病原物DNA序列进行分析,探讨了利用MinION测序仪鉴定蓖麻蚕病原的可行性,对蚕病的监测提供了保障。 展开更多
关键词 蓖麻蚕 MinION 病原 鉴定
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Developmental changes in hemolymph ecdysteroid level and prothoracicotropic hormone activity during the fifth larval instar of the Eri silkworm, Samia cynthia ricini
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作者 RONG-JING JIANG HONG TENG +2 位作者 JAN KOOLMAN SHENG LI MEI-XUN CAO 《Insect Science》 SCIE CAS CSCD 2005年第4期241-247,共7页
Developmental changes in hemolymph ecdysteroid level, ecdysteroid synthesis by prothoracic glands (PGs) in vitro, prothoracicotropic hormone (PTTH) activity in brain extracts, and PTTH activity in the hemolymph we... Developmental changes in hemolymph ecdysteroid level, ecdysteroid synthesis by prothoracic glands (PGs) in vitro, prothoracicotropic hormone (PTTH) activity in brain extracts, and PTTH activity in the hemolymph were measured during the fifth larval instar of the Eri silkworm, Samia cynthia ricini. The changing patterns of hemolymph ecdysteroid level and ecdysteroid synthesis by laGs in vitro are similar to each other, with maximums on day 9. However, on this day, hemolymph ecdysteroid level was substantially higher than ecdysteroid synthesis by PGs in vitro suggesting a high PTTH activity in the hemolymph on day 9. Moreover, the changing pattern of PTTH activity in brain extracts is also similar to that of PTTH activity in the hemolymph, both peaking on day 9. However, on this day, activity in brain extracts was much smaller than PTTH activity in the hemolymph implying that most PTTH synthesized by the brain is secreted to the hemolymph and the brain stores a very little amount of PTTH. This study provides unique insights onto the hormonal regulation of ecdysteroid synthesis in the Eri silkworm and is useful for our future studies on signal transduction of insect neurolaelatides. 展开更多
关键词 samia cynthia ricini ECDYSTEROIDS prothoracic gland prothoracicotropic hormone RADIOIMMUNOASSAY
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蓖麻蚕蛹生物反应器生产重组人表皮生长因子的研究 被引量:2
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作者 伍玉婷 黄元姣 +4 位作者 雷丹青 吴勇浒 李牡艳 小林淳 王先裕 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第1期136-140,共5页
重组人表皮生长因子(rhEGF)已经广泛应用于医疗和化妆品。以杆状病毒AnpeNPV为基因表达载体,昆虫为生物反应器而建立的蛋白表达系统已获得成功。本文以人表皮生长因子(hEGF)基因替代柞蚕AnpeNPV中的核多角体基因而获得的AnpehEGF病毒为... 重组人表皮生长因子(rhEGF)已经广泛应用于医疗和化妆品。以杆状病毒AnpeNPV为基因表达载体,昆虫为生物反应器而建立的蛋白表达系统已获得成功。本文以人表皮生长因子(hEGF)基因替代柞蚕AnpeNPV中的核多角体基因而获得的AnpehEGF病毒为载体、蓖麻蚕蛹为生物反应器表达的rhEGF蛋白质,采用PCR、West-ern blot和ELISA等实验方法对其进行检测,硫酸铵沉淀和Ni-NTA Agrose亲和层析法对其进行分离纯化。实验结果显示,无论是在基因或是蛋白水平上都可检测到rhEGF的表达。AnpehEGF感染蚕蛹后第6d开始检测到rhEGF的表达量快速上升,第12d达到高峰,第3、6、9、12d的表达量分别为19.77、24.90、618.59、1 952.46ng/g,而到了病毒感染后期(第15d)出现了蛋白降解现象。表达的rhEGF通过分离纯化获得了较纯的产品。结果表明蓖麻蚕蛹作为生物反应器生产外源蛋白rhEGF是可行的,说明利用AnpeNPV和蓖麻蚕蛹可开发更加低成本而又高效的rhEGF生产新途径。 展开更多
关键词 蓖麻蚕蛹 生物反应器 重组人表皮生长因子
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