三勒浆安全性评价及功能作用研究

目的:评价保健食品三勒浆安全性及其抗疲劳、免疫调节和耐缺氧的功能。方法:通过急性毒性实验、30 d喂养实验、微生物回复突变埃姆斯(Ames)实验、小鼠微核实验和小鼠精子畸形实验对三勒浆进行安全性毒理学评价。通过负重游泳实验、血清尿素氮含量、肝糖原含量、血乳酸含量测定,研究三勒浆的抗疲劳作用;通过迟发性变态反应(足趾增厚法)、血清溶血素测定(血凝法)、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验(半体内法)、自然杀伤细胞活性测定,研究三勒浆的免疫调节作用;通过常压耐缺氧实验、急性脑缺血性缺氧实验及亚硝酸钠中毒存活实验,研究三勒浆的耐缺氧作用。结果:三勒浆对小鼠和大鼠的经口半数致死剂量都大于21.5 mL/kg,急性毒性属实际无毒(级);大鼠30 d喂养实验的无作用剂量大于10.0 mL/kg;3项遗传毒性实验均为阴性结果。三勒浆灌胃30 d,可显著延长各剂量组小鼠的负重游泳时间,降低血清尿素氮与乳酸水平,提高肝糖原含量,具有明显的抗疲劳作用。三勒浆灌胃25 d,各剂量能提高小鼠溶血素抗体积数,中剂量、高剂量能提高小鼠迟发性变态反应能力、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数,表明三勒浆具有免疫调节作用。耐缺氧实验结果表明三勒浆可显著提高小鼠的急性脑缺血性缺氧时间,亚硝酸钠中毒小鼠的存活时间显著长于对照组,表明三勒浆具有耐缺氧作用。结论:三勒浆具有很好的安全性和确切的抗疲劳、免疫调节和耐缺氧作用。

基于缔合胶体稳态重构思路的中药多酚口服液稳定性改善研究:以三勒浆口服液为例

目的 基于三勒浆口服液(Sanajon Oral Liquid,SOL)多元沉淀形成原理,通过优化稳定剂的选择,改善中药口服液SOL的稳定性,并评估复配稳定剂的优化效果。方法 以离心沉淀量为关键评价指标,以乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na2)、黄原胶、亚硫酸氢钠添加量为调控配方,通过单因素实验和正交试验进行调控配方的优化;测定调控前、后SOL在长期贮藏条件下的离心沉淀量、黏度、色度、光学参数以及化学成分(诃子次酸、没食子酸、儿茶素、柯里拉京、诃黎勒酸、鞣花酸)含量,以评估复配稳定剂优化的效果。结果 添加0.020 g/kg EDTA-Na2、0.10%黄原胶、0.050 g/kg亚硫酸氢钠的复配稳定剂后,SOL稳定性得到显著改善;调控后的SOL在90 d内沉淀生成量减少41.38%(P<0.01),黏度、色度及溶液稳定性均有所提高,有效成分较未调控组稳定,沉淀生成得到有效抑制。结论 调控后的SOL在长达90 d的贮藏期间内具有良好的稳定性;研究结果为其制剂开发的工艺研究及质量控制提供了实验基础。

基于UPLC-Q-TOF-MS^E技术的三勒浆口服液上清液及沉淀部分化学成分分析

目的:分析三勒浆口服液上清液和沉淀部分的主要化学成分,为建立其质量标准与沉淀控制技术提供依据。方法:使用UPLC-Q-TOF-MSE技术分别对分离后的上清液及沉淀部分化学成分进行定性分析,采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相选择0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0~1 min,2%B;1~2 min,2%~5%B;2~4 min,5%~7%B;4~6 min,7%~24%B;6~10 min,24%~42%B;10~12 min,42%~54%B;12~15 min,54%~76%B;15~18 min,76%~100%B),流速0.3 mL·min^-1,柱温30℃,进样量2μL。质谱分析采用电喷雾离子源(ESI),负离子模式下使用时间依赖型MSE方式采集样品质谱数据,采集范围m/z 50~1200(上清液)和m/z 50~3000(沉淀),通过对采集数据的保留时间、精确相对分子质量和二级质谱裂解碎片进行比对后鉴定化学成分。结果:在三勒浆口服液上清液中共鉴定了61个化合物,包括鞣质类、酚酸类、黄酮类、氨基酸类、有机酸类、脂肪酸类等;沉淀中共鉴定了15个化合物,包括鞣质类、酚酸类、黄酮类、脂肪酸类等。结论:三勒浆口服液的水解鞣质可能是该制剂潜在的沉淀物质基础,其沉淀物很可能是以鞣花酸和鞣红为主构成的复杂沉淀。建立的UPLC-Q-TOF-MSE可快速、全面地分析三勒浆口服液的化学成分,可为其物质基础、沉淀机制及质量控制等研究提供科学依据。