微板核酸杂交-ELISA方法对肝炎病人血清中HBV DNA的定量检测与分析

目的采用微板核酸杂交-ELISA技术测定肝炎病人血清中HBVDNA含量。方法用PCR法将病人血清标本扩增后，与两条特异性探针夹心杂交，然后通过酶联显色对69例不同临床表现的肝炎患者血清中HBVDNA进行定量检测。结果20例急性重型肝炎血清中的DNA含量超过2μg/L，88.24％的急性轻型肝炎患者和54.55％轻度慢性肝炎患者血清中的HBVDNA含量少于2μg/L,66.67％中度慢性肝炎患者血清HBVDNA含量在2-1000μg/L的范围，75％重度慢性肝炎和45％急性重型肝炎血清中的HBVDNA含量超过1000μg／L。结论做饭核酸杂交-ELISA检测方法能准确、快速进行核酸定量测定，特异性强，灵敏度高，稳定可靠，易自动化，对于研究病毒感染量与临床病程的关系具有较大的现实意义。

TTV与其它肝炎病混合感染及其基因型的研究

研究TTV与其它肝炎病混合感染对肝脏病变的影响及本地区TTVDNA的基因型。选TTVORF1的保守序列作内外引物 ,采用微板核酸杂交 -ELISA方法检测患者血清TTVDNA并对检测结果和临床资料进行统计学分析。选取异源性大于 5 0 %的序列作显色探针Ⅰ和显色探针Ⅱ ,进行分型研究。学生、非甲 -非戊型肝炎、慢性乙型肝炎和肝硬化患者血清TTV阳性率分别为 3 3 %、14 3%、12 %、16 %。TTV阳性和TTV阴性的慢性乙型肝炎及肝硬化患者 ,在年龄、性别、ALT和TBil之间无显著差异 (P >0 0 5 )。本地区流行的TTV可分为两个主要的基因型 ,即Ⅰ型 (6 6 7% )、Ⅱ型 (2 5 % ) ,部分存在混合感染 (8 3% )。TTV可能与HBV、HCV有类似的传播途径 ,故常重叠感染。TTV与乙型肝炎及肝硬化混合感染后不影响两者的肝脏病变。TTV不是本地区非甲

慢性乙肝患者e抗原血清转换与HBV基因变异的关系

目的 :了解慢性乙肝患者e抗原血清转换中HBV -DNA前C基因及C基因启动子变异的关系。方法 :HBV -DNA阳性且e抗原 /或e抗体阳性的慢性乙型肝炎患者各 30例 ,以PCR结合微板核酸杂交 -ELISA方法检测乙肝病毒前C基因 (nt 1896、nt 1899)及其基本核心启动子 (BCP ,nt 176 2、nt 176 4)变异。结果 :不论前C基因还是BCP变异 ,均与e抗原血清转换相关 (P <0 .0 5 ) ;不论e抗体阳性组还是e抗原阳性组 ,BCP变异均高于前C基因变异 (P <0 .0 5 ) ,但二者均不相关 (P >0 .0 5 )。结论 :乙肝病毒C基因启动子与前C基因的变异是随机的 ,都可下调HBeAg的表达 ,前者更易于发生变异。

皖北地区血透患者中TTV感染的研究

目的 :研究皖北地区经输血传播病毒 (TTV)在血透患者中的感染。方法 :选TTVORF1的保守序列作内外引物 ,采用微板核酸杂交 -ELISA方法检测血透患者 6 0例及对照组血清标本中的TTV DNA。结果 :对照组和血透患者间TTV的阳性率差异显著 (P <0 0 5 ) ;TTV阳性和阴性的血透患者 ,在透析次数和透析时间方面有统计学意义 (P<0 0 5 )。结论 :皖北地区一般人群和血透患者中存在TTV感染 ,后者是TTV感染的高危人群。TTV可能与HBV ,HCV ,或HGV有类似的传播途径 ,主要经血液途径传播。