三焦祛湿方对膜性肾病小鼠肾组织ZO-1和synaptopodin蛋白表达的影响

[目的]探讨三焦祛湿方对膜性肾病小鼠肾组织的保护作用以及对紧密连接蛋白ZO-1和骨架蛋白synaptopodin表达的影响。[方法]将60只雌性Balb/c小鼠随机分为对照组10只和造模组50只。造模组预免疫2周后,开始正式免疫。给予尾静脉注射阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)(6.5 mg/kg),隔日1次,持续6周,复制膜性肾病小鼠模型。6周后,测造模组所有小鼠24 h尿蛋白定量(24 h-UTP)显示均为阳性,提示造模成功;并随机选取4只作肾脏病理,观察到基底膜增厚并伴有免疫复合物的沉积,证实膜性肾病小鼠模型建模成功。将造模组随机分为模型组10只、中药低剂量组10只、中药高剂量组10只和盐酸贝那普利组10只,开始灌胃。空白组和模型组给予0.2 mL生理盐水灌胃,三焦祛湿方高低剂量组以及盐酸贝那普利组分别给予相应药物治疗(中药低剂量组3.71 g/kg、中药高剂量组7.42 g/kg、盐酸贝那普利组1.3 mg/kg),每日1次,持续4周。实验结束后,麻醉小鼠,腹主动脉取血,收集血液标本检测总胆固醇(TC)、血清白蛋白(Alb)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN);光镜下观察肾组织病理形态;免疫荧光检测肾组织免疫球蛋白G(IgG)沉积情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肾组织中ZO-1和synaptopodin的表达水平。[结果]与空白组相比,模型组小鼠24 h-UTP、TC显著升高(P<0.05),Alb显著降低(P<0.05);与模型组相比,各治疗组小鼠24 h-UTP、TC显著降低(P<0.05),Alb显著升高(P<0.05);各治疗组组间比较,24 h-UTP、TC、Alb无显著性差异(P>0.05)。各组小鼠Scr、BUN相比无显著性差异(P>0.05)。与空白组相比,模型组小鼠肾组织ZO-1、synaptopodin的表达显著减少(P<0.05);与模型组相比,各治疗组小鼠肾组织ZO-1、synaptopodin的表达显著升高(P<0.05),各治疗组间ZO-1、synaptopodin的表达无显著性差异(P>0.05)。[结论]三焦祛湿方对膜性肾病小鼠的肾脏具有保护作用,其机制可能与上调ZO-1和synaptopodin蛋白的表达量有关。