三棱-莪术药对在结直肠癌中应用及作用机制研究

结直肠癌是胃肠道常见的恶性肿瘤,是导致癌症相关死亡的第二大原因。结直肠癌发病隐秘,多数患者在出现症状时已发生转移,常规治疗手段对于延长结直肠癌转移患者生存率没有显著效果。探究治疗结直肠癌治疗的新靶点以及研究新的靶点药物有望成为突破治疗进展、延长患者生存率和改善患者预后的关键。中药是我国的宝贵资源,80%以上新药物的发现都来源于中药天然产物。中医药治疗是癌症治疗的重要方式之一,能够减少肿瘤的转移和复发,改善术后不良症状。大量研究表明,三棱-莪术在结直肠癌的治疗中具有一定的潜力。该文从中医药学对结直肠癌的认识、三棱-莪术药对抗结直肠癌的作用机制及药理作用的研究进行归纳总结,为三棱-莪术药对在结直肠癌治疗中的应用提供参考依据。

基于网络药理学及分子对接技术探究三棱-莪术配伍在卵巢癌辅助治疗中的作用机制

目的:基于网络药理学及分子对接技术,探究三棱-莪术药对在辅助治疗卵巢癌中的作用机制。方法:活性成分及其作用靶点收集自中药系统药理学分析平台,卵巢癌相关靶点收集自Genecard数据库。上述靶点取交集后,结合STRING数据库及Cytoscape软件构建PPI网络。应用R及Cytoscape软件整合构建中药-活性成分-疾病-靶点网络。同时,应用R软件进行基因本体论(gene ontology,GO)功能富集、京都基因与基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集,并通过Cytoscape/CluGO进行KEGG通路聚类分析。综合分析各网络,获取关键靶点及其对应活性成分后应用Autodock vina及Pymol等软件进行分子对接及可视化研究。结果:本研究在三棱-莪术药对中,共获得8个活性成分,164个作用靶点,Genecards数据库获得1540个符合条件的卵巢癌相关靶点。取交集获得27个三棱-莪术药对治疗卵巢癌的潜在靶点。分析PPI网络并获取关键靶点为CASP3、ESR1、JUN、PTGS2、AR、MAPK14、PGR、CASP8、CASP9、CAS及PPARG。GO及KEGG分析表明相关作用机制可能涉及凋亡、白细胞介素17(interleukin-17,IL-17)信号通路、乙肝信号通路、雌激素信号通路、甲状腺激素信号通路,卵巢类固醇等多条信号通路。分子对接表明核心成分芒柄花黄素、β-谷甾醇、常春藤皂苷元与关键靶点结合性良好,其中各活性成分与PTGS2结合最佳,结合能均小于-9.0 kcal/mol。结论:该研究初步揭示了三棱-莪术药对治疗卵巢癌的药理机制,这为后期探究该药对及其所在复方治疗卵巢癌提供了较为系统的依据。

基于网络药理学和分子对接探究莪术-三棱药对治疗前列腺癌的作用机制

目的探究莪术-三棱药对治疗前列腺癌(prostate cancer,PCa)的药物活性成分、核心靶点及分子机制。方法基于HERB和PubChem数据库获取莪术-三棱的药物活性成分和作用靶点,利用Genecards、OMIM、PhamGkb、TTD、DrugBank数据库获取PCa疾病靶点,药物靶点和疾病靶点取交集得到共同靶点。采用Cytoscape 3.9.0软件构建莪术-三棱活性成分与PCa靶点网络,将交集靶点导入String数据库构建蛋白-蛋白相互作用网络(protein-protein interaction network,PPI),对潜在靶点进行基因本体(gene gontology,GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析,最后利用AutoDockTools 1.5.7等软件对核心靶点和药物关键活性成分进行分子对接验证。结果共筛选得到72种药物活性成分和760个有效活性成分靶点,PCa疾病相关靶点13001个,交集靶点为659个。药物关键核心成分为莪术双环烯酮、无患子皂苷B、花椒麻素、(2s)-3',4'-亚甲二氧基-5,7-二甲氧基黄酮、芹菜素、天人菊内酯、山奈酚、三棱酸、脱甲氧姜黄素以及5,7,2',3'-四羟基黄酮。PPI网络分析得到SRC、TP53、MAPK3、MAPK1、STAT3、HSP90AA1、AKT1、PIK3R1、RHOA、GRB2核心靶点。GO和KEGG富集分析显示,莪术-三棱治疗PCa主要涉及细胞增殖、凋亡、迁移和信号转导等信号通路。分子对接结果显示核心靶点与活性成分之间存在较强的结合力。结论本研究揭示了莪术-三棱抗PCa的关键活性成分及其与潜在靶点的相互作用,凸显了其多成分、多靶点相互作用的特性,为深入研究莪术-三棱治疗PCa提供了有价值的参考。

三棱消瘤合剂联合化疗治疗痰瘀互结型进展期胃癌的临床观察

目的观察三棱消瘤合剂联合化疗治疗痰瘀互结型进展期胃癌的临床疗效及安全性。方法将92例痰瘀互结型进展期胃癌患者根据意愿分为治疗组(n=44)和对照组(n=48),对照组给予化疗(以氟尿嘧啶为基础方案),治疗组在对照组治疗措施基础上加用三棱消瘤合剂。21 d为1个化疗周期,两组基本疗程均为4个周期,可视情况继续随访治疗至6~8个周期。基本疗程结束后,观察两组中医证候疗效、实体瘤疗效,比较卡氏功能状态(KPS)评分的变化情况;记录化疗周期,比较两组治疗前及治疗第22天、85天时中医证候积分的变化情况,以及基本疗程中的毒性反应发生情况。结果(1)治疗组、对照组中医证候总有效率分别为77.3%、50.0%;治疗组中医证候疗效优于对照组(P<0.05)。(2)两组实体瘤疗效比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(3)治疗组治疗第22天时,胃脘痛、恶心呕吐、纳差、肢体困重积分及中医证候总积分减少(P<0.05),对照组仅中医证候总积分减少(P<0.05)。治疗第85天时组间比较,胃脘痛、恶心呕吐、纳差、肢体困重积分及中医证候总积分差异有统计学意义(P<0.05)。(4)治疗前后组内比较,治疗组KPS评分升高(P<0.05);组间治疗后比较,治疗组KPS评分高于对照组(P<0.05)。(5)两组完成化疗周期情况比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(6)治疗组周围神经毒性反应发生率低于对照组(P<0.05),但两组血液毒性、胃肠道毒性反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论三棱消瘤合剂联合化疗治疗痰瘀互结型进展期胃癌疗效满意,能有效改善患者的中医证候及生活质量,减轻化疗毒性反应。

莪术-三棱药对醋制前后指纹图谱的建立及多指标成分含量变化

目的:建立莪术-三棱药对醋制前后HPLC指纹图谱,对5种指标性成分进行定量分析,探索莪术-三棱药对醋制前后的质量差异。方法:采用HPLC法建立莪术-三棱药对醋制前后指纹图谱,通过化学计量学方法对莪术-三棱药对醋制前后指纹图谱进行分析;并采用HPLC法测定莪术-三棱药对醋制前后对羟基苯甲酸、对羟基苯甲醛、香兰素、姜黄素、莪术醇的含量。结果:结果表明20批样品可以明显的分为2类,莪术-三棱生品与醋品在整体化学成分上具有一定的差异。含量测定结果表明,莪术-三棱药对经过醋制后,指标成分含量均有不同程度的增加,其中对羟基苯甲酸、对羟基苯甲醛、香兰素、姜黄素、莪术醇的平均含量增加了11.11%、36.31%、30.18%、11.68%、53.43%。结论:所建立的指纹图谱及多指标含量测定方法稳定可靠,从定性与定量评价了莪术-三棱药对醋制前后的质量差异,为莪术-三棱药对炮制研究提供一定的科学依据。

三棱丸抑制大鼠子宫内膜异位症血管生成及VEGF，TNF-α表达的研究

目的:考察三棱丸(SLW)抑制子宫内膜异位症(EMS)血管生成作用及机制。方法:以SLW作用于子宫内膜异位症大鼠模型,免疫组化方法检测异位内膜组织中微血管密度(MVD)、血管生成因子VEGF及TNF-α蛋白的表达,RT-PCR方法检测异位组织中VEGF mRNA和TNF-α mRNA的表达。结果:SLW能有效降低MVD,抑制异位内膜组织中VEGF,TNF-α蛋白和mRNA的水平。结论:SLW具有良好的抗EMS血管生成作用,其作用机制与抑制血管生成因子VEGF,TNF-α的水平有关。

三棱的化学成分

为研究中药三棱(Sparganium stoleniferumBuch.-Ham)的化学成分,利用柱色谱技术进行分离纯化,得到5个化合物,根据理化性质、光谱数据鉴定其结构为:β-谷甾醇棕榈酸酯(I)、三棱双苯内酯(II)、三棱二苯乙炔(III)、6,7,10-三羟基-8-十八烯酸(IV)和胡萝卜苷棕榈酸酯(V)。化合物II、III为两个新化合物。

三棱、莪术含药血清对培养的人脐静脉血管内皮细胞生长和VEGF表达的影响

目的探讨三棱、莪术含药血清对血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)诱导的血管内皮细胞增殖和VEGF表达影响。方法以三棱、莪术含药血清作用于VEGF诱导的人脐静脉血管内皮细胞(humanumbili-calveinendothelialcell-1,HUVEC-1),倒置相差显微镜观察细胞形态学改变,MTT法观察细胞增殖情况,Westernblot和RT-PCR方法分别检测内皮细胞VEGF蛋白和mRNA的表达。结果三棱、莪术5.0g·kg-1·d-1、2·5g·kg-1·d-1大鼠含药血清可使正常人脐静脉血管内皮细胞排列紊乱,明显梭形化。5.0g·kg-1·d-1大鼠10%、5%、2.5%含药血清组和2.5g·kg-1·d-1大鼠10%含药血清组HUVEC-1细胞的增殖显著低于空白血清相同浓度组(P<0·05)。5.0g·kg-1·d-1、2.5g·kg-1·d-1大鼠5%的含药血清使HUVEC-1细胞VEGF蛋白、VEGFmRNA表达均显著降低。结论三棱、莪术含药血清可抑制VEGF诱导的血管内皮细胞增殖,其机制与抑制血管内皮生长因子表达密切相关。

三棱-莪术关联子宫肌瘤的研究进展

文章从子宫肌瘤的病因病机、与WNT信号转导通路的关系、三棱-莪术的化学、药理及临床研究进展等方面进行了综述,表明三棱、莪术的研究和开发具有广阔的前景。

三棱散对人胃癌SGC-7901细胞增殖作用的影响

目的:探讨三棱散水提物对人胃癌SGC-7901细胞增殖及凋亡影响及其可能机制。方法:制备三棱散水提物,培养人胃癌SGC-7901细胞,MTT法观察不同时间(24 h,72 h)不同浓度三棱散水提物对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响。用流式细胞仪检测三棱散水提物对细胞周期阻滞及其凋亡的影响。RT-PCR法检测不同浓度三棱散水提物作用人胃癌SGC-7901细胞72 h后细胞NF-κBp65 mRNA、cyclin D1 mRNA及p16 mRNA表达情况。结果:随着三棱散水提物浓度增高和作用时间的延长,人胃癌SGC-7901细胞增殖抑制率逐渐增高(P<0.05),同一浓度不同时间的细胞增殖抑制率相比,有显著性差异(P<0.05)。人胃癌SGC-7901细胞在G0/G1期表现出明显的增加,S期细胞明显的减少,各浓度组均明显诱导细胞凋亡(P<0.05),其凋亡率随三棱散浓度增加而提高。RT-PCR法检测显示,随着三棱散水提物浓度的增加,NF-κBp65 mRNA、cyclin D1 mRNA表达逐渐减少,p16 mRNA表达逐渐增加。三棱散水提物浓度5.0 mg/m L,10.0 mg/m L时,NF-κBp65 mRNA、cyclin D1 mRNA及p16 mRNA表达存在显著性差异(P<0.05或P<0.01)。结论:三棱散水提物对人胃癌SGC-7901细胞有抑制增殖和促凋亡作用,呈时间和浓度依赖性,且G0/G1期细胞数量增多,S期细胞数量减少。RT-PCR法检测显示,NF-κBp65 mRNA、cyclin D1 mRNA呈现低表达,p16 mRNA呈现高表达,由此推测,NF-κBp65表达下调会直接影响Cyclin D1表达,发挥细胞周期的正反馈调节,p16表达上调可启动细胞周期的负反馈调节,共同作用产生细胞增殖抑制及促进凋亡的作用。

加味三棱丸含药血清对子宫内膜异位症内膜细胞芳香化酶及环氧合酶-2的影响

目的:观察子宫肌瘤与子宫内膜异位症(内异症)患者在位内膜芳香化酶(aromatase)和环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)表达上的差异,探讨加味三棱丸(SLW)含药血清对内异症在位内膜芳香化酶、COX-2表达的影响。方法:Western blot和RT-PCR方法分别检测子宫肌瘤组、给予SLW含药血清前后内异症组芳香化酶、COX-2蛋白和mRNA的表达,发光免疫分析法及放射免疫分析法分别检测上述各组细胞上清中雌二醇及前列腺素E2的含量。结果:以未给药的内异症内膜组为对照,子宫肌瘤组芳香化酶、COX-2 mRNA蛋白的表达,分泌雌二醇及前列腺素E2水平均明显低于对照组,差异有显著性(P<0.05)。SLW5.0,2.5g·kg-1·d-1组芳香化酶、COX-2蛋白和mRNA的表达低于对照组,差异有显著性或极显著性(P<0.05或P<0.01)。SLW1.25g·kg-1·d-1组芳香化酶mRNA和蛋白、COX-2蛋白的表达也明显低于对照组(P<0.01),但COX-2 mRNA的表达与对照组比较差异无显著性(P>0.05)。SLW5.0,2.5,1.25g·kg-1·d-1组分泌的雌二醇和前列腺素E2水平明显低于对照组(P<0.05)。结论:SLW可抑制子宫内膜异位症在位内膜细胞芳香化酶和COX-2的表达,从而降低局部雌激素及前列腺素E2的水平。

加味三棱丸抗子宫内膜异位症雌激素生成作用及对内膜细胞凋亡的影响

目的:研究加味三棱丸(SLW)对子宫内膜异位症(内异症)雌二醇(E2)生成的抑制作用,并探讨其诱导内异症内膜细胞凋亡的机制。方法:培养子宫肌瘤和内异症患者在位子宫内膜细胞,以子宫肌瘤内膜细胞为对照,内异症在位内膜细胞经含SLW大鼠血清高、中、低剂量处理后,分别在不同的时间点采用电化学发光免疫法检测E2的分泌水平;流式细胞术和TUNEL法检测细胞的早期和晚期凋亡率;通过时效关系考察,明确SLW诱导内异症在位内膜细胞早、晚期凋亡的最佳时间后,重新将培养的内膜细胞分为6组:子宫肌瘤组、内异症组、内异症+SLW血清中剂量组、内异症+阿那曲唑血清组、内异症+SLW血清中剂量+雌二醇组和内异症+雌二醇组,在最佳时间点检测各组细胞的早期和晚期凋亡率。结果:SLW可显著降低内异症在位内膜细胞分泌E2的水平,并呈浓度和时间依赖性。子宫肌瘤组内膜细胞的早、晚期凋亡百分率随时间延长而增加,并显著高于同时间点的内异症组(P<0.05或P<0.01);经SLW血清中剂量处理72、96 h后,内异症在位内膜细胞的早、晚期凋亡百分率分别为(35.67±1.73)%和(57.56±1.09)%,较其他处理时间的诱导作用显著;当SLW血清中剂量与雌二醇5.30 ng/L联合处理72 h或与雌二醇6.36 ng/L联合处理96 h后,细胞的早、晚期凋亡百分率分别降低至(11.25±2.00)%和(7.72±0.71)%,与SLW血清中剂量比较,差异显著(P<0.01),添加的雌二醇浓度未能完全抑制SLW诱导内异症内膜细胞的凋亡;单独给予雌二醇5.30、6.36 ng/L进行处理,内异症内膜细胞的早、晚期凋亡百分率有进一步降低的趋势,但无统计学意义(P>0.05),芳香化酶抑制剂阿那曲唑与雌二醇的作用恰好相反。结论:SLW可能通过降低内异症在位内膜细胞分泌雌二醇的水平,发挥其诱导内膜细胞凋亡的作用。

三棱、莪术对血瘀证模型大鼠血液流变性影响的比较研究

目的:比较破血药三棱、莪术对血液流变性影响的异同。方法:随机将动物分成空白对照组、模型组、三棱组(S组)、莪术组(R组)。前两组灌胃白开水,S组、R组分别灌胃100 g/m l三棱、莪术水煎剂,连续10 d。模型组、S组、R组于第10天复制模型。于第11天处死取血测定。结果:与模型组比较,S组不同切变率下全血黏度ηa1、ηa5、ηa30、ηa200均降低,R组只有ηa5、ηa30、ηa200降低,ηa1无变化。S组、R组红细胞变形指数均明显提高,S组平均血小板容积(MPV)明显降低,差异有显著性。S组与R组比较,ηα1、ηa5、ηa30明显降低,MPV显著改变(P<0.05)。结论:三棱、莪术均可影响血液流变学指标,三棱作用优于莪术。

三棱丸方对克罗恩病肠纤维化中血小板活化治疗作用的研究

目的:观察三棱丸加减方治疗克罗恩病肠纤维化的临床疗效与血小板活化的关系。方法:将克罗恩病例36例随机分成两组,对照组18例采用单纯西医常规治疗,治疗组18例在对照组的基础上予以三棱丸加减方水煎剂口服,将临床疗效指标和血小板活化指标进行比较。结果:治疗组克罗恩病活动指数(CDAI)、血小板计数(PLT)及D-二聚体(D-D),治疗前后变化与对照组比较,有统计学差异;治疗组内镜下纤维化改善率与对照组比较差异无统计学意义。结论:三棱加减方口服可改善克罗恩病肠道肠纤维化狭窄病例的疗效与血小板活化,其疗效与治疗血小板活化相关。

“醋三棱-醋莪术”组分配伍对大鼠卵巢囊肿组织中IL-1β、TNF-α、C_3的影响

目的研究"醋三棱-醋莪术"组分配伍对大鼠卵巢囊肿的药理作用机制。方法采用芥子油单侧卵巢注射法复制大鼠卵巢囊肿模型,运用酶联免疫吸附法(Elisa)测定空白组、模型对照组、阳性对照组、醋三棱-醋莪术高、中、低剂量组大鼠卵巢组织中白细胞介素IL-1β、肿瘤坏死因子TNF-α和补体C_3的浓度。结果醋三棱-醋莪术高、中剂量组能明显降低卵巢中IL-1β、TNF-α的浓度,C_3浓度虽有降低,但无统计学意义。结论"醋三棱-醋莪术"组分配伍对卵巢囊肿大鼠具有治疗作用,该病发病机制可能与卵巢中IL-1β、TNF-α的浓度有关。

三棱莪术汤治疗冠心病稳定型心绞痛临床观察

[目的]观察三棱莪术汤治疗冠心病稳定型心绞痛的疗效。[方法]在常规治疗基础上,治疗组30例加用三棱莪术汤(黄芪、太子参、三棱、莪术等),对照组30例治疗包括常规扩冠、抗凝治疗。[结果]临床总有效率、心电图总有效率、中医症状总有效率、硝酸甘油停减率治疗组结果均优于对照组。[结论]三棱莪术汤治疗冠心病稳定型心绞痛临床疗效显著。

中药三棱的化学模式识别研究

以商品三棱中20种宏量及微量元素的含量为分类持征,用非线性映照法对32个样品进行了鉴别分类,准确地区分了药典规定的正品三棱和非正品三棱,所得结果与生药学鉴定完全一致,为中药鉴定提供了一种全新的方法。

三棱颗粒的质量标准研究

目的:建立控制三棱颗粒(黄芪,三棱,莪术等)的质量标准。方法:采用薄层色谱法对三棱颗粒中黄芪、三棱、莪术、芫花进行定性鉴别;采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器法对三棱颗粒中黄芪甲苷进行定量分析。色谱柱为C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(79∶21),流速0.8 mL/m in,ELSD参数中漂移管温度为90℃,气体流速为2.2 L/m in。结果:薄层斑点清晰,阴性对照无干扰;黄芪甲苷对照品在1.018μg^10.18μg范围内,进样量与峰面积呈良好线性关系,平均加样回收率为98.26%,RSD=1.33%(n=6)。结论:方法简便可行,结果准确可靠,可作为本产品的质量控制方法。

三棱莪术颗粒联合西药治疗肝硬化腹水血瘀水停证的疗效观察

目的探讨三棱莪术颗粒联合西药治疗肝硬化腹水血瘀水停证患者疗效。方法将肝硬化腹水血瘀水停证患者61例,采用随机数字表法分为观察组和对照组,观察组30例,对照组31例。对照组采用常规西药利尿、护肝、抗病毒等治疗,观察组在对照组的基础上加用三棱莪术颗粒治疗,两组疗程3个月。比较两组患者治疗前后临床症状、腹水消退、肝功能、门静脉内径、脾脏厚度、胆囊壁厚度及有效率。结果观察组总有效率为90.00%,对照组为58.06%,观察组总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组腹膨隆、腹胀、口干、面暗、舌瘀斑、脉涩等血瘀症状改善程度均优于对照组(P<0.05);观察组降低肝功能(谷丙转氨酶、谷草转氨酶、γ-谷氨酰转肽酶、总胆红素)、升高血清白蛋白作用优于对照组(P<0.01);观察组的腹水消退情况明显优于对照组(P<0.05);观察组降低胆囊壁厚度优于对照组(P<0.05)。结论三棱莪术颗粒联合西药治疗肝硬化腹水血瘀水停证患者,能有效改善临床症状,促进腹水消退,减轻肝损伤,减轻胆囊炎症,疗效良好,值得临床推广应用。

“生三棱-生莪术”配伍对卵巢囊肿大鼠C_3、IGG、FSH、TNF-α的影响

目的研究"生三棱-生莪术"组分配伍对实验性卵巢囊肿大鼠的药理作用机制。方法采用芥子油单侧卵巢注射法制备大鼠卵巢囊肿模型,阳性对照组(0.9 g生药/kg)、高剂量组(3.33+3.33 g生药/kg)、低剂量组(0.83+0.83 g生药/kg)、生三棱组(3.33 g生药/kg)、生莪术组(3.33 g生药/kg)分别给药,以酶联免疫吸附法(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)法测试补体蛋白3(Protein C,C3)、免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IGG)、促卵泡激素(Follicule-stimulating Hormone,FSH)、肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factorα,TNF-α)在子宫、卵巢含量,用HE染色和透射电镜观察子宫、卵巢组织病理生态改变。结果配伍高剂量组、配伍低剂量组、生三棱组、生莪术组能降低大鼠卵巢组织中TNF-α含量,生莪术能降低血清中TNF-α、IGG的含量,并具有统计学意义;配伍高剂量组、配伍低剂量组、生三棱组、生莪术组能降低血清及卵巢组织中C3、FSH含量,但无统计学意义;子宫、卵巢的病理学未见特殊改变。结论 "三棱-莪术"组分配伍对实验性大鼠卵巢囊肿有一定的防治作用,其机理可能是通过下调血清、卵巢组织内的IGG、TNF-α含量。