芪玉三龙方通过Wnt5a/β-catenin信号通路逆转上皮—间充质转化抑制肺癌细胞侵袭和转移

目的从细胞水平探讨芪玉三龙方是否通过Wnt5a/β-catenin信号通路抑制上皮—间充质细胞转化,抑制肺癌转移。方法将重组慢病毒转染小鼠肺癌细胞建立稳定过表达Wnt5a的细胞系,同时构建Wnt5a干扰和空载细胞株。qRT-PCR法检测Wnt5a、β-catenin mRNA的表达水平。CCK8、EdU实验检测肺癌细胞的增殖活性,Transwell实验检测肺癌细胞的迁移和侵袭能力。Western blot法检测Wnt5a、β-catenin、c-Myc、Cyclin D1、Vimentin、N-cadherin、E-cadherin、Snail蛋白表达水平。结果与对照组比较,芪玉三龙方组Wnt5a、β-catenin、c-Myc、Cyclin D1蛋白表达水平下降(P<0.05),细胞增殖活性、侵袭和迁移能力显著降低(P<0.05)。Wnt5a过表达组中Vimentin、N-cadherin、Snail表达水平增加(P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平下降(P<0.05),细胞增殖活性、侵袭和迁移能力显著增强(P<0.05);Wnt5a干扰组Vimentin、N-cadherin、Snail表达水平下降(P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平升高(P<0.05),细胞增殖活性、侵袭和迁移能力显著下降(P<0.05),明显抑制EMT的发生。芪玉三龙方处理后,Wnt5a过表达组Wnt5a、β-catenin、c-Myc、Cyclin D1、Vimentin、N-cadherin、Snail表达水平下降(P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平升高(P<0.05),细胞增殖活性、侵袭和迁移能力得到抑制。结论芪玉三龙方可能通过Wnt5a/β-catenin信号通路逆转上皮—间充质转化,抑制肺癌细胞增殖和转移。

基于网络药理和细胞实验探索芪玉三龙方治疗非小细胞肺癌的机制

目的采用网络药理学和细胞实验探究芪玉三龙方治疗非小细胞肺癌的潜在作用机制。方法利用中药系统药理学数据库与分析平台和中医药整合数据库检索芪玉三龙方成分筛选靶点,通过美国肿瘤基因组图谱数据库获得肺癌靶点基因。构建蛋白相互作用网络,并采用基因本体数据库和京都基因和基因组百科全书数据库进行富集分析。对核心靶蛋白与化合物进行分子对接分析,并以A549细胞进行实验验证。结果芪玉三龙方对于非小细胞肺癌的潜在有效靶点162个,蛋白相互作用网络分析得到核心靶点基因20个,主要的生物学过程为对缺氧的反应、MAPK级联、炎症反应,主要的功能通路为钙信号通路、TNF信号通路、IL-17信号通路、细胞周期。分子对接结果表明,MMP9-槲皮素、PPARG-异鼠李素、PTGS2-刺芒柄花素、JUN-刺芒柄花素之间存在有效的结合亲和力。在A549细胞实验中,PCR和Western blot分析结果表明,芪玉三龙方含药血清能够促进PPAR-γmRNA和蛋白表达(P<0.05),抑制c-JUN、COX-2、MMP-9 mRNA和蛋白表达(P<0.05)。结论芪玉三龙方通过影响A549肺癌细胞的凋亡、侵袭和肿瘤血管生成及炎症进程达到干预肺癌的作用。

芪玉三龙汤调节小鼠腹腔巨噬细胞M2/M1型极化及其对CD4^(+)、CD8^(+)T细胞的影响

目的探讨芪玉三龙汤在体外条件下对小鼠腹腔巨噬细胞M2/M1型极化的调控作用及其对CD4^(+)T、CD8^(+)T细胞的影响。方法分离培养小鼠腹腔巨噬细胞,并通过流式细胞术(PE-CD11b/和FITC-F4/80染色)鉴定其纯度。采用白细胞介素(interleukin,IL)-4刺激小鼠腹腔来源的巨噬细胞构建M2型巨噬细胞模型,芪玉三龙汤处理M2型巨噬细胞,分别于不同时间点应用流式细胞术检测细胞表面膜分子CD16/32、CD206、CD155、PD-L1、Galectin-9的表达水平;qRT-PCR检测诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、IL-12p40、IL-1β、精氨酸酶1(arginase1,Arg1)、FIZZ1、IL-10 mRNA的表达水平。采用芪玉三龙汤处理后的M2型巨噬细胞分别与CD4^(+)、CD8^(+)T细胞体外共培养,流式细胞术检测TIGIT的表达水平。结果成功分离出小鼠腹腔巨噬细胞,并鉴定其纯度高达89.8%。芪玉三龙汤处理M2型巨噬细胞后,细胞表面膜分子CD16/32的表达水平升高,而CD206表达水平降低;处理24 h后细胞iNOS、IL-12p40及IL-1βmRNA表达水平上升,Arg-1、FIZZ-1、IL-10 mRNA表达水平降低;处理24 h后细胞表面CD155、PD-L1、Galectin-9表达水平降低。经芪玉三龙汤处理的M2型巨噬细胞分别与CD4^(+)、CD8^(+)T淋巴细胞共培养后,CD4^(+)、CD8^(+)T细胞表面TIGIT的表达受到明显抑制。结论芪玉三龙汤能够诱导小鼠腹腔M2型巨噬细胞向M1型极化,并且极化后的细胞能够抑制T细胞负性调节分子的表达。

无砂混凝土护坡在城市护岸工程中的应用

随着生态水利建设的发展,“人水和谐,生态治水”的建设新理念不断深入人心,如何将城市防洪与生态景观建设相结合成为新的需求。传统的护坡型式单一简陋,较大程度影响了城市景观生态性。本文以梧州市三龙防洪堤无砂混凝土护坡建设为实例,分析了其设计理念、施工工艺控制要点及建成效果,为同类城市防洪排涝工程生态护坡的应用提供参考。

探地雷达在沙漠研究中的应用

目前国内外开展的沙丘形成机理、发育过程的研究多依靠短期的风沙观测分析,或者对浅层内部构造的取样分析。对于这些研究手段,难以从三维空间角度对其内部整体构造加以研究,从而也难以对形成机理、发展变化过程有一个全面的认识。我们利用现代技术在国内率先应用探地雷达开展有关沙丘内部构造和下部古地形的研究工作。研究结果揭示了三垄沙南段的成因主要由风成作用形成,而与下伏地形无关,由其内部构造可见三垄沙的形成为典型的在地势平缓地区,单风向为主作用下形成的新月形沙丘。沙丘的整个内部结构可分为三个区域,反映了其不同部位的结构特征。同时该研究成果显示应用探地雷达开展有关沙漠内部结构研究是一条非常有效的新途径。

芪玉三龙汤对肺肿瘤的抑制效应及对肺脏的影响

目的:研究芪玉三龙汤对荷肺癌小鼠的抑瘤效应及对小鼠肺脏的影响。方法:采用Lewis肺癌细胞株培养移植法建立肺癌荷瘤小鼠模型,随机分为模型组、化疗组、芪玉三龙汤高、中、低剂量组、联合组,每组8只;实验第11天开始芪玉三龙汤低、中、高剂量组小鼠分别按(20.12、40.24、80.48)g/(kg·d)灌胃给药,化疗组按照0.4 m L顺铂腹腔注射给药,联合组以高剂量中药灌胃和顺铂腹腔注射联合给药,模型组按照等量生理盐水给药,1次/d,连续给药10 d;称取瘤质量,计算抑瘤率;实时荧光定量PCR法(RT-q PCR)检测肿瘤组织PI3K mRNA的转录水平;蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测肿瘤组织PI3K p85α、PI3K p110α蛋白水平;免疫组化检测肿瘤组织VEGF蛋白表达,HE染色法观察小鼠肺脏的病理形态变化。结果:与模型组比较,中药高剂量组能够抑制肺癌移植瘤生长,抑瘤率为23.86%,联合组与化疗组抑瘤率相当;芪玉三龙汤能够明显降低肿瘤组织PI3K mRNA的转录水平和PI3K p85α、PI3K p110α蛋白水平,与顺铂联用有一定协同增效作用;并且能够降低VEGF阳性细胞率;光镜下观察肺脏示芪玉三龙汤高、中剂量组以及联合组小鼠肺组织内未见肿瘤转移灶。结论:芪玉三龙汤可温和抑制肺癌移植瘤生长,可能与降低PI3K mRNA转录水平、PI3K p85α、PI3K p110α蛋白表达有关,并可能通过降低VEGF表达减少肺脏的肿瘤转移。

芪玉三龙汤对肺癌移植瘤小鼠PI3K/Akt/mTOR通路PI3K、Akt、mTOR表达的影响

目的研究芪玉三龙汤对小鼠皮下移植瘤生长及对PI3K/Akt/mTOR信号通路调节的影响。方法采用Lewis肺癌细胞培养移植法复制肺癌荷瘤小鼠模型,荷瘤成功后随机分为模型组,化学治疗组,芪玉三龙汤高、中、低剂量组,联合组;观察小鼠的生存状态,绘制肿瘤生长曲线,计算抑瘤率;Western blot法检测荷瘤小鼠肿瘤组织PI3K、Akt、mTOR蛋白表达。结果芪玉三龙汤高剂量组、联合组生存状态优于化学治疗组;芪玉三龙汤对肺肿瘤具有温和的抑制作用,其高剂量抑制肿瘤生长作用较优,但量效关系不明显,其与顺铂联用无明显增效作用;芪玉三龙汤可以下调PI3K、Akt和mTOR表达水平,和顺铂联用对下调关键分子Akt的表达具有明显的协同作用。结论芪玉三龙汤对肺癌移植瘤的抑制作用可能与调控PI3K/Akt/mTOR信号通路关键分子有关,与化学治疗药联用可协同下调关键蛋白Akt的表达。

芪玉三龙汤治疗中晚期非小细胞肺癌临床观察

目的:观察芪玉三龙汤治疗中晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者的临床疗效与中医证型的关系。方法:选择NSCLC患者31例,在常规治疗的基础上予以芪玉三龙汤口服及对症治疗,观察治疗后患者的临床疗效、生存质量评分、临床症状改善情况、中位生存期、无疾病进展期及1年生存率,以生存质量评价表(FACT-L)对患者生存质量信息进行采集、整理并录入数据库。结果:中晚期非小细胞肺癌患者中医辨证分型中以阴虚热毒型、气虚痰湿型较多,且随着患者患病时间的延长,气阴两虚型所占比重不断增加,芪玉三龙汤对该证型的治疗有效率和生存质量较高,存在优势。卡氏评分越高者临床疗效越好。治疗后,患者临床症状改善明显,生存时间延长,且与芪玉三龙汤干预时间呈正相关。结论:芪玉三龙汤对中晚期NSCLC瘤体稳定有一定作用,对患者的生存质量具有一定的改善作用。

芪玉三龙汤对肺癌p70S6激酶和真核翻译起始因子4E的影响

目的：研究芪玉三龙汤对肺癌生长的关键合成蛋白p70S6激酶（p70S6K）和真核翻译起始因子4E（eIF4E）表达的影响。方法：基于前期研究基础,采用LLC细胞培养移植法构建移植肺癌模型,荷瘤成功后随机分为模型组（M）,化疗组（C）,中药组（低、中、高剂量组,分别命名为QL、QM、QH）,联合组（CQH）,低、中、高剂量组小鼠分别按（20.12、40.24、80.48）g/（kg·d）灌胃给药,化疗组以0.4 mL顺铂腹腔注射给药,联合组以中药高剂量灌胃和顺铂腹腔注射联合给药,模型组以等量生理盐水给药,1次/d,连续给药10 d;称取瘤质量,计算抑瘤率;透射电镜观察肿瘤细胞超微结构的变化;RT-qPCR法检测Ras mRNA表达水平;Western Blot法检测肿瘤组织eIF4E、p-eIF4E、p70S6K、p-p70S6K蛋白表达。结果：芪玉三龙汤可抑制肺癌移植瘤生长,电镜下可见凋亡小体,用药各组均可下调Ras转录水平,但中药各组之间无明显差异（P〉0.05）,联合组与化疗组之间相比无统计学意义（P〉0.05）。同时,该复方均可降低肿瘤组织eIF4E、p-eIF4E、p70S6K、p-p70S6K蛋白表达。结论：芪玉三龙汤可抑制肺癌生长,诱导其镜下凋亡,与下调肺癌生长的关键合成蛋白p70S6K和eIF4E表达相关。

芪玉三龙汤对荷肺癌小鼠免疫功能的影响

目的研究芪玉三龙汤对荷肺癌小鼠皮下移植瘤生长,以及对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法采用LLC细胞株培养移植法构建荷肺癌小鼠模型,随机分成模型组、化疗组、中药高、中、低剂量组、联合组,每组8只,另设8只正常小鼠为空白组;观察各组小鼠的生存状态,称取瘤质量,计算抑瘤率;透射电镜观察肿瘤组织内癌细胞超微结构的变化;流式细胞术检测小鼠外周血T细胞亚群(CD4^+、CD8^+、CD4^+/CD8^+)的变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测小鼠脾脏IL-2、IL-10浓度。结果芪玉三龙汤高剂量组、联合组的生存状态优于化疗组;芪玉三龙汤具有温和的抑制肺癌移植瘤的作用,但与顺铂联用无明显增效作用;电镜下观察肿瘤细胞超微结构可见中药组肿瘤细胞有凋亡发生,以高剂量组凋亡坏死最明显,化疗组可见多个凋亡小体,联合组肿瘤细胞严重坏死;芪玉三龙汤能明显增加CD4^+水平,升高IL-2浓度,降低CD8^+的水平和IL-10含量,提高CD4^+/CD8^+比值,联合组与化疗组比较有显著差异(P<0.01)。结论芪玉三龙汤能改善行化疗的荷瘤小鼠生存状态,可温和抑制肺癌移植瘤生长,诱导肺癌细胞凋亡,并具有改善荷瘤小鼠以及化疗药导致免疫功能低下的作用。

白浆土上大豆“三垄”栽培法的效应分析

本试验于１９８９—１９９１年在黑龙江省８５４农场进行，土壤类型为白浆土。本文探讨了低湿地白浆土上“三垄”栽培法和平作栽培法两种不同耕作方式对大豆生长及产量的影响，结果表明，大豆“三垄”栽培法与平作相比，三年平均增产１６．３１％。产量差异达ｔ０．０１显著水平。在“三垄”栽培条件下，大豆叶面积指数，光合势，叶／粒比和经济系数显著提高。与平作相比，“三垄”栽培法在大豆的生育前期使０—２０ｃｍ土层的温度和土壤有效水含量显著提高，是“三垄”栽培法增产的主要原因之一。

三垅栽培法对大豆地土壤生物环境影响的研究

本研究证明三垅栽培法以其独特的耕作栽培系统,改变了大豆田耕层土壤生物学体质,使土壤生物活性、大豆根系活力、共生固氮水平等得到改善与提高,为大豆生育奠定了高产基础.

三龙丹药效学研究

探讨中药三龙丹抗肿瘤的作用机制,为临床用药提供理论依据。①体内抑瘤实验:阳性对照组给予环磷酰胺;中药组分别给予不同剂量的三龙丹药物。②体外抑瘤实验:将受试药物三龙丹稀释成1:10、1:20、1:1280等浓度,然后接种于多孔培养板内的HEL和NKM上,观察细胞病变, 计算抑瘤指数。③三龙丹对SOD和MDA的影响:用微量快速检测法测定SOD和MDA的含量。结果显示,中药三龙丹对W256肿瘤具有显著抑制作用;该药在1:80药物浓度时(最大抑瘤浓度) 抑制肿瘤靶细胞的效应最大;同时,还能明显提高小鼠血中SOD的活性和降低MDA代谢产物。提示,中药三龙丹对体内肿瘤W256、体外靶细胞NKM和小鼠血中SOD、MDA具有显著影响。

芪玉三龙汤通过PD-1信号通路增强Th1免疫反应抑制肺癌转移

目的探讨芪玉三龙汤(QYSLD)通过PD-1信号通路调节肿瘤免疫微环境抑制肺癌及对肺癌荷瘤小鼠Th1免疫反应的影响。方法应用Lewis肺癌细胞株(LLC)细胞培养移植法建立小鼠皮下移植瘤模型,将72只模型小鼠随机分为对照组、顺铂组、QYSLD组和联合组,每组18只。观察小鼠一般生存情况;应用ELISA法检测小鼠肿瘤抗原特异性Th1细胞反应情况;流式细胞术检测小鼠脾脏T细胞中PD-1阳性细胞比例及记忆性CD4^(+)T细胞凋亡情况;药物处理小鼠21 d后,在解剖显微镜下计数肺表面转移瘤结节的数目与体积。结果QYSLD可改善肺癌荷瘤小鼠一般生存情况,上调小鼠CD4^(+)T细胞免疫反应及CD8^(+)T细胞特异性杀肿瘤细胞效应,下调小鼠脾脏T细胞中PD-1阳性细胞及CD4^(+)记忆性T细胞中凋亡细胞的比例;抑制小鼠肿瘤细胞的肺转移。结论QYSLD可改善肺癌荷瘤小鼠的生存状态并通过介导PD-1信号通路,增强Th1免疫反应,调节肿瘤免疫微环境,抑制肿瘤细胞免疫逃逸,从而达到抑制肺癌转移的作用。

芪玉三龙汤药物血清对肺癌A549细胞增殖及凋亡的影响

目的观察芪玉三龙汤药物血清对人肺癌A549细胞增殖及凋亡的影响。方法制备芪玉三龙汤药物血清,体外培养A549细胞。将A549细胞分为正常血清组、5%药物血清组、10%药物血清组和20%药物血清组。CCK-8法和集落形成实验检测A549细胞增殖,TUNEL法检测细胞凋亡,Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、cleaved Caspase-3、Bcl-2表达。结果与正常血清组比较,不同浓度芪玉三龙汤药物血清组A549细胞活力明显降低(P<0.001),细胞凋亡率明显升高(P<0.001),10%药物血清组和20%药物血清组A549细胞Bax、cleaved Caspase-3蛋白表达明显升高,Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.001)。结论芪玉三龙汤可能通过上调A549细胞Bax和cleaved Caspase-3蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达,进而诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤细胞增殖。

中国四大英雄史诗之一——《华抱山》

《华抱山》又名《三龙歌》、《公道歌》 ,是 2 0世纪吴歌搜集整理压卷之作 ,具有浓郁的吴地汉民族龙文化色彩特征 ,是中国四大英雄史诗之一。着重赞扬了《华抱山》史诗创作 ,传承。

Research on the Joint Development of Cities of Guangdong-Hong Kong-Macao Greater Bay Area: A Case Study of Foshan City

Promoting the construction of Guangdong-Hong Kong-Macao Greater Bay Area is a major policy decision and national strategy made by the central government of China,which significantly supports the Belt and Road Initiative and maintains the long-term prosperity for the whole country.As an important part of the Guangdong-Hong Kong-Macao Greater Bay Area,Foshan needs to find its own position and direction in order to accelerate the joint development with other cities through five measures.

三龙通栓汤治疗血管性痴呆疗效观察

目的探讨三龙通栓汤治疗血管性痴呆的临床疗效,为血管性痴呆的治疗提供依据。方法 75例血管性痴呆患者,按照入院号分为对照组(36例)及观察组(39例)。对照组采用脑复康片进行治疗,观察组采用三龙通栓汤进行治疗。应用简易精神状态量表、Blessed-Roth行为量表、血管性痴呆中医证候积分表评价两组患者治疗前后的认知能力、行为能力、中医证候。对比两组患者治疗前后的总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、血小板计数、尿酸水平。结果治疗后,观察组患者的认知能力评分(22.1±2.7)分、行为能力评分(7.3±2.2)分、中医证候评分(12.9±1.4)分均优于对照组(18.6±3.1)、(9.6±2.1)、(17.1±2.1)分,差异均具有统计学意义(P<0.05)。观察组患者的总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、血小板计数、尿酸水平优于本组治疗前及对照组治疗后,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论三龙通栓汤治疗血管性痴呆安全有效,明显改善了血管性痴呆的认知功能,提高了患者的行为能力,其可能的作用机制为降低患者体内血脂、血小板、尿酸的水平。

清末民初三陇书院改制考

清末民初,三陇书院也被纳入中国教育近代化的潮流当中,其改制史是这一地区教育史上重要的一个环节。笔者通过较翔实的地方文献资料,梳理出三陇书院改制时的概况及其相关历史以供有志于这方面的研究者参考。

三龙通栓片联合阿托伐他汀钙胶囊对脑梗死患者血脂、颈动脉内膜的疗效观察

目的:观察三龙通栓片联合阿托伐他汀钙胶囊对脑梗死患者的血脂、颈部血管粥样硬化等的疗效。方法:从河源市中医院2016年8月-2017年8月期间的脑梗死患者中筛选符合标准的患者80例。对入组患者行常规生化检查(血脂),完善颈动脉内膜中层厚度(Intima-media Thickness,IMT)的检测等。所有入组患者均予常规阿托伐他汀钙胶囊治疗后,其中治疗组患者联合应用三龙通栓片,治疗3个月后复查相关指标情况。结果:治疗3个月后,治疗组总胆固醇(Total Cholesterol,TC)、低密度脂蛋白(Low-density Lipoprotein,LDL)水平显著低于治疗前及他汀组(均P<0.01),高密度脂蛋白(High-density Lipoprotein,HDL)水平显著高于治疗前及他汀组(均P<0.05);颈动脉IMT显著低于治疗前及他汀组(P<0.05~0.01)。结论:三龙通栓片能协助阿托伐他汀钙胶囊显著降低脑梗死患者的血TC、LDL水平,坚持服用可改善颈动脉IMT。