大鼠90天重复灌胃三乌胶丸毒性研究

目的探讨SD大鼠90d重复灌胃三乌胶丸的毒性情况。方法选择检疫和体重合格的SFP级SD大鼠80只,雌雄各半,体重176.8~223.5g,按性别体重随机分为4组,即空白对照组、低剂量组(三乌胶丸6.251g生药/kg)、中剂量组(三乌胶丸12.458g生药/kg)、高剂量组(三乌胶丸24.915g生药/kg),各20只,雌雄各半。按15mL/kg体积灌胃给药,1次/d,连续给药90d,停药后恢复观察4周。按计划于给药末期及恢复末期分别解剖40只SD大鼠进行体重、摄食量测定,动物步态检测;尿常规、血液学、血液生化、凝血及电解质检查、眼科检查、骨髓检查;脏器系数测定,组织病理学检查。结果所有大鼠均按计划实施安乐死,无大鼠意外死亡。①试验期间,大鼠一般状况、体重、血液学和凝血、血液生化和电解质、眼科检查和组织病理学检查均未见与三乌胶丸相关的异常改变;②三乌胶丸能引起大鼠尿常规异常、脏器系数增大,并存在一定剂量相关性,但均无毒理学意义;③三乌胶丸能引起大鼠步态变化。结论本试验条件下,SD大鼠经口灌胃给予三乌胶丸90d对大鼠一般状况、体重、血液学和凝血、血液生化和电解质、脏器等均无明显影响,但高剂量能引起大鼠部分步态指标的改变,提示长期临床应用时需重点关注感觉神经反应的变化。三乌胶丸的无毒副反应水平(NOAEL)的剂量为12.458g生药/kg,约相当于成人临床使用剂量的25倍(按成人公斤体重计算)和46倍(按体表面积计算)。

三乌胶丸联合塞来昔布治疗膝骨关节炎的临床疗效分析

目的探讨三乌胶丸对膝骨关节炎患者关节功能、炎性与氧化应激指标的影响。方法本研究共方便选取2020年2月—2023年5月长沙市中心医院收治的92例膝骨关节炎患者为研究对象,按随机数表法分为两组,各46例。对照组以塞来昔布治疗;观察组以对照组治疗方案联合三乌胶丸治疗。比较两组治疗后临床疗效,治疗前及治疗28 d后膝关节功能,炎性与氧化应激指标。结果经过28 d的治疗后,观察组临床总有效率(95.65%)高于对照组(82.61%),差异有统计学意义(χ^(2)=4.039,P<0.05);与治疗前比,治疗28 d后两组视觉疼痛模拟量表、西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数量表评分及血清白细胞介素-1β、前列腺素、丙二醛水平降低,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。针对膝关节活动度、血清超氧化物歧化酶进行分析,两组均升高,且观察组高于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论膝骨关节炎患者加用三乌胶丸可提高疗效,降低疼痛程度,改善膝关节功能,提高膝关节活动度,降低炎性与氧化应激反应。

三乌胶对大鼠急性“血瘀”证血液流变学影响的实验研究

探讨三乌胶对“血瘀”模型大鼠异常血液流变学的影响。高、低剂量组的三乌胶都能使RBC电泳明显加速 ,全血比粘度、血浆和纤维蛋白原比粘度 ,RBC降低 ,,显著改善“血瘀”模型大鼠血液的“浓、粘、凝、聚”

HPLC测定三乌胶中的2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷

目的建立测定三乌胶中2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(THXG)含量的方法。方法采用HPLC法,用Hypersil C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相为乙腈-水(20:80);柱温为室温;检测波长为320nm。结果方法精密度和准确度良好;THXG进样量0.55～2.75μg与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为98.45%(RSD=1.1%)。结论所建方法专属性、重复性均好,可用于三乌胶中THXG的含量测定。

三乌胶及三乌胶丸的微生物检查方法验证

目的建立三乌胶及三乌胶丸微生物限度检查方法。方法通过接种代表性的阳性菌株,采用常规法及稀释法进行方法学验证。结果三乌胶丸常规法接种5株阳性试验菌株回收率均高于70%,三乌胶常规法对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌、黑曲霉菌回收率高于70%,三乌胶及三乌胶丸由于剂型不同,所采用的检查方法也不同。结论三乌胶丸细菌数、霉菌数及控制菌均可采用常规法进行检验,三乌胶细菌数需采用稀释法进行检验,霉菌数及控制菌可采用常规法进行检验。

HPLC测定三乌胶丸中2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷含量

目的:建立三乌胶丸中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法。用Hypersil ODS2 C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水(20∶80);柱温:室温;检测波长:320 nm。结果:2.3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷浓度在0.5～2.5 mg·ml^(-1)范围内与峰面积呈良好线性关系,r=1.000 0.平均回收率为98.56%(RSD为1.5%)。结论:本方法专属、重复性好,可用于三乌胶丸中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量测定。

HPLC法测定三乌胶中毒性成分——乌头碱限量检查

目的:建立HPLC法测定三乌胶中乌头碱限量的检查方法。方法:采用ODS色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以0.04mol·L-1三乙胺(磷酸调节pH=3)-甲醇(60:40)为流动相;流速:1.0ml·min-1;检测波长:235nm。结果:乌头碱的检测限为7.6ng,样品中的乌头碱能与其他物质分离开。结论:本方法灵敏度高,可用于三乌胶中乌头碱限量的测定。

三乌胶提取物水凝胶的制备及其对类风湿性关节炎治疗作用研究

目的制备三乌胶提取物水凝胶并进行表征及考察其对类风湿性关节炎的治疗作用。方法采用Franz池法考察三乌胶提取物中二苯乙烯苷、苯甲酰新乌头碱、8-去乙酰滇乌碱、去乙酰粗茎乌头碱甲、草乌甲素和大黄素的体外渗透效果,制备出三乌胶提取物水凝胶并对其理化性质进行表征;同时,建立胶原诱导的类风湿性关节炎(collagen-induced rheumatoid arthritis,CIA)大鼠模型,研究经皮递送模式下三乌胶提取物对类风湿性关节炎的治疗作用。结果制备的三乌胶提取物水凝胶在常规情况下始终保持凝胶状态;并且其三维交联网状结构可使药物更好的持续性地释放,从而达到缓释效果。体内药理实验表明,三乌胶提取物水凝胶显著降低CIA大鼠的足厚度、足体积、关节炎指数水平和血清中类风湿因子(rheumatoid factor,RF)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)和B细胞淋巴瘤因子-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)的水平及升高Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)水平;与口服相比,水凝胶能降低谷氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、肌酐和尿素氮水平和脏器病变程度。结论采用经皮递送的局部给药模式,三乌胶提取物在保留治疗作用的同时降低了由于口服给药引起的脏器毒性,为今后三乌胶提取物外用制剂的研究提供了可能性。