三子黄石方对骨髓增生异常综合征小鼠细胞自噬作用及其表观遗传学调控机制

目的:探讨三子黄石方对骨髓增生异常综合征(MDS)的可能作用机制。方法:15只MDS模型小鼠分为模型组、雄黄组、三子黄石方组,每组5只;另取5只C57BL/6J小鼠作为空白组。经口灌胃给药,2周后采集小鼠骨髓单个核细胞(BMMNCs)标本,使用WesternBlot、ELISA检测自噬蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、组蛋白H4K16ac、H4K16ac转移酶hMOF水平;流式细胞术、共聚焦显微镜检测自噬水平。结果:与空白组比较,模型组hMOF、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达及H4K16ac蛋白(量)表达显著降低(P<0.01,P<0.05),自噬水平及囊泡数目显著降低(P<0.01)。与模型组比较,雄黄组、三子黄石方组hMOF、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达及H4K16ac蛋白(量)表达显著升高(P<0.05,P<0.01),自噬水平及囊泡数目显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论:表观遗传H4K16ac、hMOF表达及自噬降低参与MDS发病。雄黄及三子黄石方可能具有类hMOF/H4K16ac干预作用诱导MDS小鼠BMMNCs自噬发挥抗肿瘤作用,但雄黄组、三子黄石方组尚未发现明显差异。

复方砷剂对骨髓增生异常综合征小鼠的疗效与安全性评价及对肠道菌群的影响

目的:观察复方砷剂对骨髓增生异常综合征(MDS)小鼠的疗效、安全性及对肠道菌群的影响,为MDS“虚毒并治”临床策略的生物学诠释提供科学依据。方法:选取15只雄性NUP98-HOXD13转基因小鼠分为模型组、雄黄组和复方砷剂组,5只其同源的雄性野生型C57BL/6J小鼠为阴性对照组,阴性对照组和模型组给予0.5%的羧甲基纤维素钠溶液灌胃,其余2组分别给予水飞雄黄、复方砷剂(三子黄石方)灌胃。治疗前后采集外周血进行血细胞分析,治疗后采血进行生化指标、电解质检测;治疗结束后采集小鼠粪便,提取肠道菌群DNA,于Illumina MiSeq测序平台进行V3—V4区进行双端测序及生物信息学分析。结果:与模型组比较,雄黄组与复方砷剂组小鼠外周血象显著提升(P<0.05,P<0.01),治疗组均无明显肝肾功能损害和电解质紊乱;肠道菌群测序结果显示,各组小鼠肠道菌群主要由拟杆菌门(Bacteroidetes)和厚壁菌门(Firmicutes)占主导地位,雄黄组拟杆菌门的相对丰度较模型组显著升高,厚壁菌门的相对丰度较模型组降低(P<0.05);复方砷剂组与阴性对照组接近。结论:雄黄和复方砷剂均能改善小鼠外周血象,复方砷剂还可保护菌群降低雄黄的杀伤作用,恢复肠道菌群的多样性,更大限度发挥治疗MDS的作用。