肥皂草素Saporin-S6二级结构的圆二色光谱及激光喇曼光谱法表征

Saporin S6 is purified from the seeds of Saponaria officinalis and its CD and FT Raman spectra are determined. From the CD spectra of fresh protein aqueous and the same aqueous that was laid aside for 90 days, it is proved that saporin S6 has unusual stability. Throughout the FT Raman spectra of saporin S6, we work out that the α helix of saporin S6 is 26%, while β fold is 37%, and random coil is 37%.

A Conformational Study on the Interaction of Saporin-S6 with Phospholipid Vesicles

ＡＣｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌＳｔｕｄｙｏｎｔｈｅＩｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｏｆＳａｐｏｒｉｎ－Ｓ６ｗｉｔｈＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄＶｅｓｉｃｌｅｓＨＡＯＱｉａｎｇ，ＧＵＡＮＺｈｏｎｇ－ｈｕｉ，ＹＡＮＬｉ，ＺＨＡＮＧＹａｎ，ＹＡＮＧａｎｇ－ｌｉｎ，ＬＩＵ...

三七总皂苷注射液治疗脑梗死的多中心研究

目的 :探讨三七总皂苷治疗脑梗死的疗效。方法 :脑梗死病人 582例 ,随机分为 2组 ,三七总皂苷组 2 91例 (男性 199例 ,女性 92例 ,年龄 6 0a±s5a)。用三七总皂苷 4 0 0mg加入 5%葡萄糖或氯化钠注射液 50 0mL中静脉滴注 ,qd ;川芎嗪组 2 91例(男性 198例 ,女性 93例 ,年龄 59a± 7a)。用川芎嗪注射液 16 0mg加入 5%葡萄糖或氯化钠注射液50 0mL中静脉滴注 ,qd ,2组疗程均为 30d。结果 :三七总皂苷组总有效率 95 2 % ,不良反应少。川芎嗪组总有效率 82 1%。组间经Ridit分析 ,差别有显著意义 (P <0 .0 5)。结论 :三七总皂苷是一种安全有效治疗脑梗死的药物 。

丁咯地尔治疗42例恢复期脑卒中病人

目的 :观察丁咯地尔治疗恢复期脑卒中的临床疗效及安全性。方法 :82例住院的恢复期脑卒中病人在接受常规康复训练的基础上 ,随机分为丁咯地尔组 4 2例 ,给丁咯地尔 15 0～ 2 0 0mg ,对照组4 0例 ,给三七总皂苷 5 2 5～ 70 0mg ,均iv ,gtt ,qd×15d ,治疗结束后评价临床神经功能缺损 (NFD)程度、Fugl Meyer运动功能 (FMA)、日常生活活动能力Barthel指数 (BI)得分的变化及不良反应。结果 :丁咯地尔组、对照组的总有效率分别为 83% ,6 2 %(P <0 .0 5 )。治疗后NFD ,FMA ,BI评分分别为 (17±s 6 ) ,(6 6± 8) ,(79± 10 )分和 (2 0± 7) ,(46± 9) ,(5 8± 9)分 ,2组间比较 ,P <0 .0 1或P <0 .0 5 ;2组治疗前后NFD ,FMA ,BI评分比较 ,P <0 .0 1。 2组均未发现严重不良反应。结论 :丁咯地尔治疗恢复期脑卒中疗效肯定 ,不良反应少。

三七总皂苷治疗急性脑梗死及对血清血管内皮生长因子的影响

目的 :观察三七总皂苷对急性脑梗死(ACI)的疗效及治疗前后血清血管内皮生长因子(VEGF)水平的变化。方法 :4 0例ACI病人 ,随机分为 2组。三七总皂苷组 2 0例 ,以曲克芦丁、胞磷胆碱和三七总皂苷 (5 0 0mg ,iv ,gtt ,qd)治疗 2wk ;对照组 2 0例 ,仅用曲克芦丁、胞磷胆碱治疗。采用双抗体ELISA法分别检测治疗前后病人血清VEGF水平的变化。结果 :三七总皂苷组总有效率95 % ,对照组 6 5 %。 2组疗效比较经Ridit分析 ,P <0 .0 1。 2组病人治疗后VEGF浓度均较治疗前显著升高 (P <0 .0 1) ;三七总皂苷组较对照组升高明显 (P <0 .0 5 )。结论 :三七总皂苷可使ACI病人的VEGF浓度升高 。

藻酸双酯钠治疗急性脑梗死的疗效和4种血浆生物分子治疗前后比较

目的 :研究藻酸双酯钠 (PSS)治疗急性脑梗死 (ACI)的临床疗效和血浆生物分子的变化。方法 :随机选择临床确诊的ACI 98例 ,分成 3组 ,分别给予PSS ,胰岛素和三七总皂苷治疗。观察临床疗效和检测治疗前后病人的血脂、血糖 (Glu)、内皮素(ET 1)、P 选择素 (P selec)、血管内皮生长因子(VEGF)和血小板活化因子 (PAF)的变化。结果 :3组总有效率分别为 94 % ,96 % ,96 % ,经Ridit分析 ,疗效比较差异无显著意义 (P >0 .0 5 )。治疗后PSS组TG ,TC ,Glu ,ET 1,P selec和PAF值分别为(1.1± 0 .4 )mmol·L- 1,(4.2± 0 .7)mmol·L- 1,(7.2± 2 .3)mmol·L- 1,(33± 4 )ng·L- 1,(2 9± 4 )μg·L- 1和 (6 0± 14 ) μg·L- 1较治疗前明显降低 ,差异有显著和非常显著意义 (P <0 .0 5和 0 .0 1) ;PSS组与RI组或三七总皂苷组血糖组间比较 ,差异有非常显著意义 (P <0 .0 1)。结论 :PSS治疗ACI的临床疗效与胰岛素 ,三七总皂苷相似 ,但对血浆生物分子学的改变则有显著差别。

三七总皂苷注射液对高脂饮食兔主动脉粥样硬化形成的干预作用

目的:从调节血脂代谢、保护血管内皮细胞分泌功能和改善血管粥样硬化斑块结构等方面探讨三七总皂苷(PNS)注射液防治高脂膳食兔主动脉粥样硬化(AS)的药用效果。方法:将41只新西兰兔随机分为空白对照组(喂食普通颗粒饲料)、AS模型组(喂食高脂颗粒饲料)、PNS灌胃组(高脂颗粒饲料+灌胃PNS粉200 mg·kg-1·d-1)、PNS中、高剂量注射组(高脂颗粒饲料+静脉注射PNS 50、100 mg·kg-1·d-1),最后两组兔在试验过程中的第3~4周,第7~8周及第11~12周期内每天经兔耳静脉注射PNS共计3个疗程。第12周结束时由兔耳缘静脉采血,送检测定内皮素-1(ET-1)、血栓素(TXB2)、6-酮-前列环素(6-Keto-PGF1α)、脂质、一氧化氮(NO)及一氧化氮合酶(NOS)活性,观察兔主动脉壁及其粥样硬化斑块病理结构变化。结果:静脉注射PNS高、中剂量组及灌胃组与AS组比较,血脂各项指标显著改善,ET-1、TXB2显著减少;NO、6-keto-PGF1a及NOS活性显著升高。病理学:各PNS干预组与AS组相比较,兔主动脉内膜粥样斑块面积减少、粥样斑块厚度变薄;泡沫细胞数量明显减少,平滑肌细胞的增生、迁移受到抑制,血管内皮细胞胞浆内小脂质空泡减少,以及各种细胞器完整,偶见到中层平滑肌细胞质脂类小空泡,内弹力板基本连续完整。结论:静脉注射PNS治疗与其口服治疗效果一样,调节AS异常的血脂和血管内皮细胞分泌的血管活性因子,改善AS异常的血管壁微结构及其超微结构,抑制AS斑块形成。

抗皂角毒、表皮生长因子受体双功能抗体的制备与体外效应的研究

目的：研究制备抗皂角毒和表皮生长因子受体双功能抗体，用以导向皂角毒杀伤肿瘤细胞。方法：在制备ＥＱ７５、ＣＹ１２．１４单克隆抗体细胞株的基础上，通过杂交杂交瘤技术制备双功能抗体细胞株。结果：双功能抗体（ＥＱ７５×ＣＹ１２．１４）与单用皂角毒杀伤肿瘤细胞（Ａ４３１）的ＩＣ５０分别为１０－９．６、１０－８．４ｍｏｌ／Ｌ。结论：双功能抗体（ＥＱ７５×ＣＹ１２．１４）杀伤肿瘤细胞（Ａ４３１），以ＩＣ５０值计算，有效率为单用皂角毒的１５倍左右。

神经干细胞移植对192-IgG-saporin老年性痴呆模型鼠的学习记忆及海马胆碱能纤维的影响

目的探讨神经干细胞(NSCs)移植对192-IgG-saporin致老年性痴呆模型鼠学习记忆和海马胆碱能纤维再生的影响。方法采用192-IgG-saporin(2.5μg/5μL)侧脑室注射SD大鼠建立痴呆模型后,行基底前脑神经干细胞移植,4周后行Y迷宫检测,并观察大鼠海马胆碱能纤维数的变化。结果Y迷宫检测显示大鼠的学习、记忆能力,模型组(107.38±9.34、3.75±0.71)与正常组比较明显下降(P<0.01),而移植组(75.26±5.33、5.45±0.51)有所改善(P<0.05);免疫组化显示模型组大鼠海马CA1区辐射层和齿状回分子层胆碱能阳性纤维,模型组与正常组比较,CA1辐射层和齿状回分子层纤维密度分别减少到11.07%和12.96%(P<0.01),与正常组比较均而干细胞移植组则分别恢复到正常组的81.39%和75.30%(P>0.05)。结论神经干细胞能促进192-IgG-saporinAD动物模型鼠学习记忆能力的恢复及海马胆碱能纤维的再生。

刺人参中配糖体的化学研究

从人参叶中分离得到两种黄酮苷和一种三匝皂甙。经理化常数、光谱数据测定了结构。黄酮甙分别是：山奈黄素３－Ｏ－β－Ｄ－吡喃半乳糖基－（１－２）－β－Ｄ－吡喃葡萄糖甙；槲皮素－３－Ｏ－β－Ｄ－吡喃半乳糖基－β－Ｄ吡喃葡萄糖甙。另一种三匝皂甙是３ａ羟基羽扇豆－２０（２９）－烯－２３，２８－二羧基２８－Ｏ－ａ－Ｌ－吡喃鼠李糖基－（１－４）－β－Ｄ－吡喃葡萄糖基－（１－６）－β－Ｄ－吡喃葡萄糖甙。

茶皂素含量的分析

本文选用高效液相色谱法对茶皂素进行定量分析。本法的变异系数为 0 .6 5% ,回收率为 98.37～ 10 1.6 7% ,线性相关系数为 0 .

免疫毒素192-IgG-saporin致痴呆动物基底前脑一氧化氮合酶阳性神经元的变化

目的:建立侧脑室注射免疫毒素192-IgG-saporin致痴呆动物模型,观察其学习记忆能力和基底前脑一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元的变化。方法:侧脑室注射免疫毒素192-IgG-saporin,行Y迷宫检测,采用NADPH-d组织化学法染色,结合图像分析技术观察大鼠基底前脑NOS阳性神经元数目和形态学参数的变化。结果:模型组大鼠的学习、记忆能力较正常组明显下降。模型组基底前脑内侧隔核(MS)和斜角带垂直支(VDB)NOS阳性神经元数分别减少到正常组的21.62%和17.70%;细胞周长和面积降低,灰度值升高,均有显著性差异。结论:应用192-IgG-saporin免疫毒素可使基底前脑NOS阳性神经元明显减少。

转化生长因子α联结saporin对平滑肌细胞和内皮细胞具有选择性的细胞毒作用

目的 为证实生物导向药物TGFα SAP对增殖平滑肌细胞特异性的细胞毒性作用。方法 我们用SPDP化学联结法合成了TGFα SAP ,并用3 H TdR参入法和3 H Leucine参入法探讨了TGFα SAP对平滑肌细胞及内皮细胞的DNA合成及蛋白质合成的影响。结果 联结后的TGFα SAP对增殖平滑肌细胞的3 H TdR参入量有明显抑制作用 ,与空白对照组比较3 H TdR参入量降低了 4 4 0 % ,同时TGFα SAP亦可明显抑制平滑肌细胞的蛋白质合成 ,而saporin本身显示出的细胞毒性作用则很弱。相反 ,TGFα SAP对增殖的内皮细胞的DNA和蛋白质合成却未显示出明显的抑制作用。结论 TGFα SAP具有较saporin明显增强的细胞毒性作用 ,而与内皮细胞相比 ,TGFα

导向药物转化生长因子α-Sporin对增殖平滑肌细胞生长的抑制作用

为证实生物导向药物对平滑肌细胞增殖的作用 ,用SPDP化学联结法合成了转化生长因子α -Saporin ,通过MTS比色法观察了转化生长因子α-Saporin对培养中的增殖平滑肌细胞的细胞毒性作用 ,并用氚标胸腺脱氧嘧啶核苷掺入法进一步探讨了转化生长因子α -Saporin对平滑肌细胞的DNA合成的影响以及过量转化生长因子α对转化生长因子α -Saporin的受体竞争抑制作用。结果发现 ,联结后的转化生长因子α -Saporin可明显抑制平滑肌细胞的增殖 ,而Saporin的抑制作用却很弱。转化生长因子α -Saporin对培养的平滑肌细胞氚标胸腺脱氧嘧啶核苷掺入量有明显抑制作用 ,与对照组比较氚标胸腺脱氧嘧啶核苷掺入量降低了 39.1% (P =0 .0 0 17) ,而在加入表皮生长因子受体的配体转化生长因子α后可明显竞争抑制转化生长因子α -Saporin对平滑肌细胞增殖的细胞毒性作用。实验结果提示 :转化生长因子α saporin通过表皮生长因子受体介导已具有较Saporin明显增强的细胞毒性作用 ,本实验为转化生长因子α saporin在经皮腔内冠状动脉成形术术后再狭窄的临床防治中的应用的研究提供初步的实验依据。

单链核糖体失活蛋白的Raman和红外光谱

我们测定了两种单链核糖体失活蛋白(肥皂草素和天花粉蛋白)的FTIR和FTRaman光谱。利用FTIR光谱酰胺Ⅲ区域对蛋白质的二级结构进行定量分析,计算了各种二级结构的含量。从肥皂草素和天花粉蛋白的二级结构分析可见,二者在结构上具有某种相似性,为二者功能上的相似性提供了依据。

高效液相色谱法测定茶皂苷的含量及其血药浓度

目的:建立了高效液相色谱法对茶皂苷含量及其血药浓度的测定。方法:色谱柱为Hypersil ODS(25mm,4.6*250mm),流动相为甲醇-水(90:10),流速为0.5ml/min,检测波长为215nm。结果:茶皂苷在0.16～1.28mg/mL的浓度范围内,茶皂苷的浓度与主峰面积具有良好的线性关系,回归方程:y=1E+07x-19561,R2=0.999,血样回收率为98.56%,RSD为2.06%(n=9)。结论:该法简便、快速、准确,既能有效测定茶皂苷提取物中茶皂苷的含量,又能测定茶皂苷血药浓度,可进一步用于其体内药代动学参数研究。

肥皂草素类核糖核蛋白体失活蛋白的纯化及其性质研究

利用强阳离子交换柱从Saponaria officinalis L种子中分离出一种肥皂草素(Saporin)成分。它在无细胞体系中显示了较强的抑制蛋白合成的活性,与抗体连接后能特异性杀伤靶细胞。

海马CA1区缺血再灌注损伤的形态学改变及三七总皂苷的影响

目的 :探讨大鼠海马CA1区神经元缺血再灌注损伤的病理学改变及三七总皂苷 (PNS)的影响。方法 :线栓法制备大鼠左侧大脑中动脉阻断局灶性脑缺血模型。以临床神经症状缺损程度、海马CA1区组织学分级、海马CA1区神经元密度等为评价指标。结果 :三七总皂苷组神经症状明显减轻 ,海马CA1区组织学分级降低、神经元密度增加 ,与模型组间差异有显著性意义。结论 :三七总皂苷能明显减轻脑缺血再灌注引起的神经损伤症状及海马CA1区神经元损伤的程度。

生物导向药物转化生长因子α-皂草毒素蛋白Saporin对增殖血管平滑肌细胞具有特异性的生长抑制作用

目的 :证实导向药物转化生长因子α 皂草毒素蛋白Saporin (TGFα SAP)对增殖血管平滑肌细胞特异性的生长抑制作用。 方法 :用SPDP化学联结的方法合成了导向药物TGFα SAP ,并以四唑盐 (MTS)比色法和3 H 胸腺嘧啶掺入法进一步探讨了TGFα SAP对血管平滑肌细胞增殖的作用 ,及对血管平滑肌细胞和内皮细胞DNA合成的影响。 结果 :实验显示TGFα SAP对血管平滑肌细胞的增殖有明显抑制作用 ,并可使其3 H 胸腺嘧啶掺入量降低 ,而皂草毒素蛋白Saporin显示的细胞毒性作用则很弱 ;同时TGFα SAP对增殖的内皮细胞的DNA合成几乎未显示明显的细胞毒性作用。 结论 :TGFα SAP通过表皮生长因子 (EGF)受体介导较皂草毒素蛋白Saporin具有了明显增强的细胞毒性作用 ,可选择性抑制血管平滑肌细胞的增殖而对内皮细胞未显示出明显的毒性作用。

TGFα与bFGF联结皂草毒素蛋白对增殖平滑肌细胞和内皮细胞的特异性细胞毒作用

目的:为比较生物导向药物转化生长因子-皂草毒素蛋白(TGFα-SAP)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)-SAP对增殖平滑肌细胞特异性细胞毒性作用。方法:用SPDP化学联结的方法合成了导向药物TGFα-SAP和bFGF-SAP,以3H-亮氨酸渗入法观察了TGFα-SAP及bFGF-SAP对平滑肌细胞(SMCs)和内皮细胞(ECs)蛋白质合成的影响,并以MTS法和3H-胸腺嘧啶核苷(TdR)渗入法比较TGFα-SAP及bFGF-SAP对SMCs和ECs的增殖和DNA合成的抑制作用。结果:10-9mol/L的TGFα-SAP可明显抑制SMCs增殖,SMCs细胞增殖抑制率达到77.5%,而相同浓度bFGF-SAP的抑制率仅46.1%;并且TGFα-SAP也比bFGF-SAP更明显抑制了培养SMCs的蛋白质合成。与空白对照组比较,3H-亮氨酸掺入量降低了47.3%;该浓度的TGFα-SAP和bF-GF-SAP对ECs却未显示出明显的细胞毒性作用。10-9mol/L的TGFα-SAP明显抑制了SMCs的DNA合成,使3H-TdR掺入量较对照组降低了29.5%,但同样浓度的bFGF-SAP仅使3H-TdR掺入量较空白对照组降低了9.86%。在10-7mol/L浓度下的TGFα-SAP未显示出明显对ECs的细胞毒性作用,而bFGF-SAP具有明显降低ECs的3H-TdR掺入量。结论:TGFα-SAP通过表皮生长因子受体介导具有明显增强的细胞毒性作用,其对增殖SMCs的细胞毒性作用较bFGF-SAP更为敏感,而在10-7mol/L浓度下,bFGF-SAP比TGFα-SAP对ECs显示出更明显的细胞毒性作用。本实验为TGFα-SAP在经皮冠脉成形术后再狭窄临床防治中的应用前景提供进一步实验依据。