盐酸沙丙蝶呤及关键原料生物蝶呤的合成进展

苯丙酮尿症是一种罕见的苯丙氨酸代谢障碍引起的常染色体隐性疾病。苯丙酮尿症是由苯丙氨酸羟化酶基因突变导致体内苯丙氨酸羟化酶缺乏引起的。盐酸沙丙蝶呤于2007年12月被美国FDA批准上市,是唯一用于治疗四氢生物蝶呤反应性苯丙酮尿症的药物,由于其结构复杂及手性难控制等特点导致合成困难。在此,我们对盐酸沙丙蝶呤及其关键原料生物蝶呤的合成进行了综述。

LC-MS/MS法测定人血浆中沙丙蝶呤的浓度

目的:建立LC-MS/MS法测定人血浆中沙丙蝶呤的浓度。方法:经抗氧化剂(抗坏血酸,VC)预处理过的血浆样品,通过甲醇蛋白沉淀等一系列操作后进行LC-MS/MS分析。以沙丙蝶呤-^(13)C ^(15)N3为内标,使用的色谱柱为Kinetex■EVO C_(18)100A(4.6 mm×100 mm,5μm),流动相为含0.1%1 mol·L_(-1)乙酸铵的水溶液-乙腈(93∶7,v/v),等度洗脱分离,柱温为30℃,流速为0.6 mL·min_(-1),进样量为15μL。质谱检测采用电喷雾离子源(ESI),正离子多反应监测(MRM)模式扫描分析。沙丙蝶呤和沙丙蝶呤-^(13)C^(15)N_(3)的目标离子对分别为m/z 242.3→166.1和m/z 246.1→170.2。结果:沙丙蝶呤血药浓度在1~300 ng·mL^(-1)范围内线性关系良好;质控样本批内精密度(RSD)在1.2%~4.7%,批间精密度(RSD)在1.5%~4.3%;沙丙蝶呤的平均提取回收率为98.0%~101.2%;无明显空白血浆基质效应,不影响待测物的定量分析;血浆样本稳定性符合接受标准;制备后样本稳定性符合接受标准;方法重现性良好;浓度超出定量上限的血浆样本经空白血浆稀释5倍后可以准确测定。结论:本方法能够快速、简便、准确地测定人血浆中沙丙蝶呤的浓度。该方法经验证后,成功用于沙丙蝶呤临床样本的血药浓度的检测。

治疗苯丙酮尿症特异性药物二盐酸沙丙蝶呤

二盐酸沙丙蝶呤是天然四氢生物蝶呤(BH4)经人工合成得到的二盐酸盐,能激活苯丙氨酸羟化酶(PAH),改善正常的苯丙氨酸(Phe)氧化代谢,降低患者的Phe水平,是首个治疗苯丙酮尿症的特异性药物。现综述其作用机制、药动学、临床研究及不良反应。

二盐酸沙丙蝶呤的合成

以L-鼠李糖一水合物为起始原料,与十二烷基硫醇缩合后氧化,并经Mac Donald-Fischer降解,得关键中间体5-脱氧-L-阿拉伯糖(5),5与苯肼缩合、乙酐乙酰化后与2,4,5-三氨基-6-羟基嘧啶硫酸盐环合,脱除乙酰基得2-氨基-6-[(1R,2S)-1,2-二羟基丙基]-4(1H)-蝶啶酮,最后经二氧化铂催化氢化、盐酸成盐得二盐酸沙丙蝶呤,总收率约26.8%。

重视母源性苯丙酮尿症的防治

我国自1981年起，逐步开展了高苯丙氨酸血症（HPA）的新生儿筛查，许多苯丙酮尿症（PKU）患儿生长发育良好，一些患儿已步入婚育阶段。女性患者孕期血苯丙氨酸（Phe）浓度持续增高，可导致胎儿脑发育障碍及各种畸形发生，即母源性PKU综合征。现从母源性PKU的发生机制、预防、四氢生物蝶呤的支持治疗及成年女性PKU患者的综合管理等各个方面，综述国际上的最新进展，以期对于女性PKU患者顺利度过孕产期，保证胎儿的健康成长，防止母源性PKU的发生提供一些借鉴。

二盐酸沙丙蝶呤速释片的制备及体内外评价

在对原研制剂Kuvan处方分析的基础上,以片剂崩解时间和溶出度为评价指标,采用Box-Behnken法优化筛选出二盐酸沙丙蝶呤速释片中主要辅料甘露醇、维生素C和交联聚维酮的最佳配比;并通过单因素试验法确定压片前干颗粒粒径。最终得到的优化处方中甘露醇用量45.70%,维生素C用量9.06%,交联聚维酮用量4%;采用干法制粒得到粒径主要分布在150μm的干颗粒后压片制备了3批自制速释片。试验表明,3批制品的平均崩解时间为(35.7±5.0)s,10 min溶出率为(96.0±1.5)%。进一步考察了该自制速释片与Kuvan在Beagle犬体内的药动学特征。建立了LC-MS法测定血浆中二盐酸沙丙蝶呤的浓度。体内试验表明,自制片和Kuvan的cmax为(96.20±13.10)和(102.28±7.42)ng/ml,tmax为(2.21±1.60)和(2.17±0.41)h;自制片AUC0→t、AUC0→∞、cmax的90%置信区间均在原研制剂相应参数的80%~125%范围内。自制片的口服相对生物利用度为(92.0±8.5)%。

盐酸沙丙蝶呤片有关物质的HPLC法测定

建立了高效液相色谱法测定盐酸沙丙蝶呤片中的有关物质。采用键合磺酸基阳离子惰性硅胶为填充剂的色谱柱,流动相为50 mmol/L磷酸二氢钾溶液-乙腈(80∶20),检测波长220 nm。结果显示,主峰与其他杂质峰均分离完全,盐酸沙丙蝶呤(1)、L-生物蝶呤(2)、7,8-二氢生物蝶呤(3)、蝶呤(4)、(6S)-四氢生物蝶呤(5)和5,6,7,8-四氢蝶呤(6)均在相应浓度范围内线性关系良好,5个杂质的平均回收率分别为102.55%、100.03%、99.74%、98.30%和99.88%。