高效液相色谱法测定甘草海藻配伍后甘草酸含量变化

目的建立高效液相色谱法测定甘草海藻药对中甘草酸的含量,探讨在不同配伍比例下甘草酸的总体变化,以揭示甘草海藻配伍禁忌的机制。方法采用高效液相色谱法,Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温:30℃,流动相:甲醇-乙腈-0.2 mol.L-1醋酸铵溶液-冰醋酸(45∶15∶40∶1),流速:1.0 mL.min-1,检测波长:250 nm。结果甘草酸线性范围为39.18～195.90μg.mL-1,r=0.999 9。平均回收率为100.2%,相对标准偏差(RSD)=1.5%(n=9)。甘草海藻配伍比例为1∶1时甘草酸含量最低。结论该方法快速、准确、重复性好,为研究甘草海藻配伍禁忌提供数据依据。

甘草与海藻配伍对甘草高效液相指纹图谱的影响

目的:建立甘草的HPLC指纹图谱,研究甘草海藻不同比例配伍对甘草指纹图谱的影响。方法:采用反相高效液相色谱法,选用Kromasil C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.08%磷酸水溶液(梯度洗脱),分析时间70min,检测波长为235nm。结果:该方法稳定、可靠、重复性好,可用于甘草药材指纹图谱的测定。标定了甘草指纹图谱21个共有指纹峰,考察了这21个共有峰峰面积在不同比例配伍中的变化。结论:甘草海藻不同比例配伍对甘草指纹图谱的影响显著。

海藻、甘草单用及配伍不同比例对小鼠急性毒性的影响

目的通过海藻-甘草不同配伍比例对小鼠急性毒性的影响,评价反药组合前后的毒性表征及其特点。方法以小鼠急性死亡率为指标,通过海藻水煎剂经口给药考察其急性毒性,计算海藻小鼠半数致死量(LD50)及95%置信限。根据海藻LD50值,固定海藻用量,结合中国药典海藻和甘草用量范围,设定海藻-甘草的5个比例:1∶3、1∶2、1∶1、1∶0.33、1∶0.17。同时,设甘草最大用量组90g/kg和海藻30g/kg单药对照组,观察动物的毒性反应症状和死亡情况,连续观察14天,进行解剖和观察结果分析。结果海藻-甘草比例为1∶3和1∶1时,小鼠死亡率为100%;比例为1∶2时,死亡率为80%;海藻单药组和比例为1∶0.33时,死亡率为60%;比例为1∶0.17时,死亡率为50%;甘草单药组的死亡率为0。结论药组中甘草大于等于海藻时,表现出增毒效应。

海藻-甘草反药配伍致大鼠肾毒性的机制探讨

目的探索海藻-甘草反药配伍致大鼠肾毒性的内在机制。方法大鼠随机分为对照组、海藻组、甘草组、海藻-甘草配伍组,经过连续ig给药4周的多次给药毒性实验,检测血清中尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、醛固酮、皮质醇及电解质水平,并进行肾脏组织病理学检查;用UPLC-TQ/MS法同时检测甘草中的6种主要成分在肾组织的分布情况;Western blotting法检测11β-类固醇脱氢酶(HSD11B2)在肾组织中的蛋白表达水平。结果与对照组相比,海藻组大鼠的血清生化指标无明显变化,甘草组的血清中醛固酮水平显著降低(P<0.05),BUN、Scr显著升高(P<0.01);海藻-甘草组的血清中醛固酮、K+、Cl-水平显著降低(P<0.05、0.01),而BUN、Scr、皮质醇水平显著升高(P<0.05、0.01)。病理组织学检查表明,甘草组大鼠的肾脏组织有轻微的炎细胞浸润,海藻-甘草组有明显的炎细胞浸润并伴有蛋白管型。海藻-甘草组大鼠的肾脏组织中的甘草次酸分布明显高于甘草组(P<0.05)。与对照组相比,甘草组、海藻-甘草组大鼠的肾组织HSD11B2蛋白表达水平均显著降低(P<0.05、0.01),而海藻-甘草组更为显著。结论通过增加甘草次酸在大鼠肾脏组织的积蓄,抑制肾脏组织中的HSD11B2的表达,造成醛固酮-皮质醇系统紊乱,可能是海藻-甘草反药组合产生肾毒性的主要机制。