药用植物中咖啡酰奎宁酸类化合物的研究进展

咖啡酰奎宁酸是一类常见的由奎宁酸与数目不等的咖啡酸通过酯键连接而成的酚酸类化合物,广泛存在于金银花、苍耳、雪莲细胞培养物等大多药用植物及其培养物中,其具有抗氧化、抗菌、抗炎、抗病毒、抗肿瘤、神经保护、调节血糖血脂等药理活性。文章对咖啡酰奎宁酸类化合物在药用植物中的分布情况、常用检测方法、药理活性研究等多个方面进行整理,为咖啡酰奎宁酸类化合物的发展方向提供理论依据及思路,为传统中药的应用及新药的开发提供参考。

天山雪莲水提取物对小鼠辐射损伤的保护作用

目的 观察天山雪莲水提取物 (ES)对电离辐射损伤小鼠的保护作用。方法 小鼠igES 0 .75 ,1.5 ,3.0g/kg ,14d后接受 8和 2 .5Gy的照射 ,观察 8Gy照射小鼠的平均生存时间和生存率及 2 5Gy照射小鼠的脾T淋巴细胞转化能力和骨髓DNA含量。结果 ES能显著延长 8Gy照射小鼠的平均生存时间 (P <0 0 5 ) ,并提高生存率 ;显著提高 2 5Gy照射小鼠的脾T淋巴细胞转化能力和骨髓DNA含量 (P <0 0 5 ,0 0 1) ,改善免疫功能。结论 ES具有抗辐射损伤作用。

新疆雪莲组织培养体系的优化

以新疆雪莲无菌苗的根、茎、叶为外植体,对各种不同激素配比条件下新疆雪莲的再生体系进行了探讨,结果表明:培养基MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 2.0 mg/L对愈伤组织诱导效果较好;而再生芽的诱导培养基为MS+6-BA0.4mg/L+NAA0.05mg/L+水解乳蛋白500mg/L;生根培养基为1/4MS+NAA 0.3 mg/L。

天山雪莲HPLC指纹图谱研究

目的建立天山雪莲药材的HPLC指纹图谱，为雪莲药材的快速质量控制提供依据。方法以绿原酸、紫丁香苷、芦丁、木犀草素、芹菜素5种对照品为对照，采用HPLC法，测定了10批次不同产地天山雪莲的色谱图，确立参照指纹图谱。色谱条件：色谱柱Diamonsil^TM C18（250mm×4．6mm，5μm），甲醇-水（0．8％醋酸，0．2％三乙胺，pH3．5-4．0）线性梯度洗脱，柱温30℃，检测波长270nm，记录时间30min，体积流量1．0mL／min。结果标示出天山雪莲的13个特征指纹峰。结论该方法准确、重现性好，为天山雪莲的指纹图谱质量控制提供了参考。

雪莲的研究进展

雪莲是我国珍稀名贵的中药材 ,具有很高的药用价值 ,应用前景广阔。雪莲生长环境恶劣 ,自然资源十分有限。由于近年来野生雪莲乱采滥挖现象严重 ,加之人工栽培困难 ,雪莲已被列为国家三级濒危物种而受到保护。综述雪莲的有效成分、药理作用、开发利用现状及解决雪莲资源短缺的途径 ,并对雪莲今后研究发展的方向进行了展望 ,以期更加有效地保护和合理开发利用雪莲资源、满足医药市场需求、保护西部生态环境和促进西部经济发展。

新疆雪莲胚芽的组织培养和植株再生

目的:以新疆雪莲胚芽为外植体,建立一套新疆雪莲快速繁殖技术。方法:以MS培养基为基本培养基,通过研究植物生长物质BA和NAA对丛生芽的分化、丛生芽的增殖和生根的影响找出相应的最佳生长物质组合。结果:在附加NAA0.02-0.1mg·L-1和BA2mg·L-1的MS培养基上,所有的胚芽都可在45d内诱导出丛生芽;丛生芽切成小块后接入含NAA0.1-0.2mg·L-1和BA2-3mg·L-1的培养基中,都可在30d快速增殖;在含0.4mg·L-1NAA的大量元素减半的MS培养基中,92%的不定芽可在25d内生根;再生植株移栽后,生长较好,成活率达70%。结论:新疆雪莲的胚芽可通过不定芽途径高频率的形成植株。

新疆雪莲多倍体的诱导初探

用秋水仙素和2%二甲基亚砜共同处理新疆雪莲种子、胚根和茎段,以诱导多倍体雪莲。结果表明,茎段经过100 mg.L-1秋水仙素处理3 d诱导效果最佳,同时,离体培养其嵌合体苗茎段及叶片,诱导不定芽生成,获得了四倍体细胞比例达到90%以上的植株。

新疆雪莲的香豆素类化学成分的研究

目的研究新疆雪莲(SaussureainvolucrateKar·etKir)的化学成分。方法应用各种柱色谱的方法进行分离;应用化学和各种光谱分析的方法鉴定化合物。结果从新疆雪莲的乙醇提取物的乙酸乙酯萃取物中分离得到8个香豆素类成分,它们分别为蛇床子内酯(osthol),佛手内酯(bergapten),异茴芹内酯(isopimpinellin),爱得尔庭(edultin),叶鞘二醇二乙酸酯(vaginidioldi-acetate),别异因波拉托内酯(alloisoimperatorin),噢洛内酯(oroselol),花椒香豆素(xanthotoxol)。结论这8个香豆素均为首次从新疆雪莲中分离得到。

新疆雪莲全长cDNA文库构建及表达序列标签(ESTs)特性分析

以野生新疆雪莲(Saussurea involucrata Kar.et Kit)为研究材料,利用Creator SMARTTMcDNA Library Construction技术构建了雪莲全长cDNA文库,从野生雪莲中提取总RNA和mRNA,用分离到的微量mRNA合成cDNA第1链。通过长距离PCR扩增得到足够量的双链cDNA。将SfiⅠ酶切后并纯化的cDNA片段连接到经SfiⅠ酶切的噬菌体λTripIEX2上,并对噬菌体进行包装,建成cDNA的全长库。经大肠杆菌XL1-Blue平板检测,原始文库滴度达4.03×107(pfu/mL)。随机挑选500个克隆进行序列测定,PCR鉴定结果显示多数插入片段均在500 bp以上。将所测序列经GenBank检索和生物信息学比较,共有56个序列为非冗余数据。其中有14个cDNA片段序列在GenBank上无明显的同源性,42个片段与已报道的基因有较高的同源性。这些EST数据为进一步筛选和克隆雪莲特异性表达基因提供了材料平台,为雪莲基因组数据增补了大量信息。

转天山雪莲冷调节蛋白基因烟草的获得及其抗寒性鉴定

从已建立的天山雪莲cDNA文库中随机挑取单克隆,采用通用引物M13扩增出基因序列并测序,然后将该序列在GenBank中进行比对,根据该序列设计特异引物进行PCR,最终获得了冷调节蛋白基因siCOR的完整开放读码框(ORF);构建植物表达载体,通过农杆菌介导法获得转基因烟草,用RT-PCR对转化烟草进行鉴定,收取种子后筛选出纯合的T3株系,并通过冷冻胁迫进行抗寒性分析。结果表明:(1)siCOR大小661bp,与禾本科植物粳稻的冷调节蛋白基因一致性最高(65.04%)。(2)与野生型植株相比,转siCOR基因烟草均叶片浓绿、无分支侧芽,生长快;在冷冻胁迫条件下,转siCOR基因的烟草叶片相对含水量、PSⅡ相对量子产率降低幅度、相对电导率和丙二醛含量的升高幅度均低于野生型烟草植株,而且转siCOR基因烟草植株叶片出现萎蔫症状的时间较迟、程度较轻,受到的伤害也较轻。研究发现,在冷冻胁迫条件下,转siCOR基因烟草植株表现出良好的生理和生长优势,显示出了较强的抗寒特征。

雪莲细胞培养物调血脂及抗氧化作用研究

目的:观察雪莲细胞培养物对高血脂模型大鼠的降血脂及抗氧化作用。方法:大鼠连续喂服高脂饲料12 d,造成高血脂模型,给予雪莲细胞培养物16.7、33.3、100 mg·kg-1·d-1连续45 d,测定大鼠血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、SOD、GSH、MDA、蛋白羰基等含量。结果:雪莲细胞培养物高、中、低剂量组均能明显降低高血脂模型大鼠血清中总胆固醇、甘油三酯及低密度脂蛋白胆固醇的含量,升高高密度脂蛋白胆固醇的含量,与模型组比较差异有统计学意义;雪莲细胞培养物高、中剂量和低剂量组可明显升高SOD含量,中、低剂量组可明显升高GSH含量,同时降低MDA含量,对蛋白羰基含量无明显影响。结论:雪莲细胞培养物具有明显的降血脂作用和一定的抗氧化作用。

天山雪莲水提取物抗辐射损伤作用的机理研究

目的 探讨天山雪莲水提取物 (XL)的抗辐射损伤机制。方法 比色法测定XL对水辐解产生的羟自由基的清除作用 ,计算清除率 ;Giemsa染色分析电离辐射引起的人外周血淋巴细胞(PBL)染色体畸变。结果 XL对电离辐射产生的羟自由基有显著的清除作用 ,清除率达到 60 % (与对照组相比P <0 0 0 1) ;它还能明显抑制电离辐射所引起的人外周血淋巴细胞染色体畸变的发生率(与对照组相比P <0 0 1;P <0 0 0 1)。结论 清除羟自由基。

新疆雪莲化学成分的分离与鉴定

目的对新疆雪莲的化学成分进行研究。方法采用硅胶、凝胶柱色谱和重结晶等分离方法对体积分数为75%的新疆雪莲乙醇溶液提取物进行成分分离,通过谱学分析方法结合理化性质进行结构鉴定。结果共分离得到8个化合物,分别鉴定为大苞雪莲内酯(involucratolactone,1)、11α,13-dihydrozaluzanin-C(2)、dihydrozaluzanin-C(3)、7β-羟基谷甾醇(7β-hydroxysitosterol,4)、7β-羟基豆甾醇(stigmast-5,22-dien-3β,7β-diol,5)、山奈酚(kaempferol,6)、高车前素(hispidulin,7)、粗毛豚草素(jaceosidin,8)。结论化合物3、5为首次从风毛菊属植物中分离得到,化合物2、4为首次从新疆雪莲植物中分离得到。

天山雪莲遗传转化体系建立

采用根癌农杆菌介导法进行GFP基因的遗传转化,建立了农杆菌介导天山雪莲遗传转化体系。以天山雪莲胚性愈伤组织为受体;40 mg/L的卡那霉素为胚性愈伤组织筛选质量浓度;胚性愈伤组织预培养2 d后用含100μmol/L AS和500 mg/L脯氨酸的感染工程菌液侵染25 min,能够取得比较理想的转化效果。对8株卡那霉素抗性植株进行PCR及GFP荧光蛋白检测,共获得6株阳性植株。结果表明GFP基因已整合到天山雪莲的基因组中并得到表达。

高速逆流色谱用于天然产物分离和指纹图谱构建

利用国产高速逆流色谱分离纯化雪莲黄酮类成分和丹参醌类成分。雪莲分离选用氯仿 甲醇 水 (10∶7∶3)体系 ,固定相保留率 72 % ,仪器参数 80 0r min 2mL min ,采用一步洗脱法 ,7h内得到 14个组分 ;丹参分离选用正己烷 乙醇 水 (10∶5 5∶4 5 )体系 ,固定相保留率达到 78 8% ,采用分步洗脱 ,3个产地丹参在 13h内各分离得到 12个洗脱组分。HSCCC洗脱图谱可以表现出不同产地丹参的差别 ,并且各对应洗脱峰保留时间的相对标准偏差 <3% ,因此提出将HSCCC作为构建中药指纹图谱的方法之一 ,其可行性需要通过与常规的指纹图谱构建方法比较之后做出评价。

新疆雪莲的化学成分、药理作用及其临床应用

综述新疆雪莲在化学成分、药理学及临床方面的研究。通过对其多糖、黄酮、生物碱以及黄铜苷,愈创内酯、挥发油、微量元素、氨基酸等主要成分对应的药理作用的综述,介绍其在临床上作为民族药在抗炎镇痛、抗旱孕、抗衰老及抑制癌细胞增生等方面的应用前景。

植物激素对新疆雪莲愈伤组织诱导和分化的影响

研究了不同植物激素对新疆雪莲叶片愈伤组织诱导和分化的影响.结果表明:植物激素对新疆雪莲愈伤组织的诱导和分化影响显著,以MS为基本培养基附加浓度1.00mg·L^(-1)的6-BA和2.00 mg·L^(-1)的NAA组合为最佳诱导培养基,诱导率达100%;以MS为基本培养基附加浓度1.00 mg·L^(-1)的6-BA和0.20 mg·L^(-1)的NAA组合为最佳出芽培养基,出芽率达78%;以1/2MS为基本培养基附加浓度0.30 mg·L^(-1)的NAA和浓度0.03 mg·L^(-1)的KT为最佳生根培养基,生根率达54%.

天山雪莲叶片全长cDNA文库的构建

以天山雪莲(Saussurea involucrataKar.et Kir)幼嫩叶片为研究材料,利用CreatorTMSMARTTMcD-NA Library Construction技术构建了天山雪莲叶片全长cDNA文库,原始文库滴度达3.93×105cfu/mL,文库插入片段多在1 000 bp左右。随机挑取10个克隆进行测序,通过生物信息学初步分析表明,100%为全长cDNA,大部分可以在GenBank中找到同源序列。天山雪莲叶片全长cDNA文库的构建为雪莲基因资源保存和植物抗寒机理的研究奠定了基础。

HPLC法建立新疆雪莲指纹图谱研究

目的 :对 7种不同产地的新疆雪莲药材进行指纹谱比较研究。方法 :以乌鲁木齐南山产新疆雪莲药材为分析对象 ,选择适宜的色谱条件 ,建立了 7个不同产地的新疆雪莲药材样品的指纹图谱。结果 :方法学考察表明 ,本研究建立的分析方法有比较好的重现性 ;不同产地的新疆雪莲药材共有峰相对保留时间基本一致 ,但其相对面积存在一定的差异。结论 :指纹谱分析方法可简便、快速的鉴别和区分不同产地的新疆雪莲药材。

HPLC法同时测定天山雪莲中紫丁香苷、绿原酸和芦丁的含量

目的:采用液相色谱法同时测定天山雪莲中紫丁香苷、绿原酸和芦丁的含量。方法:Kromasil ODS-1色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温为35℃;以乙腈(A)-0.4%磷酸(B)为流动相,梯度洗脱(0 min,13%A;15 min,13%A;16 min,15%A;40 min11,15%A),流速1 mL·min^(-1);双波长检测:257 nm(检测紫丁香苷、芦丁),327 nm(检测绿原酸)。结果:紫丁香苷存5.104～51.04 μg·mL^(-1)(r=0.9998)、绿原酸在38.82～258.8μg·mL^(-1)(r=0.9991)、芦丁在39.42～262.8μg·mL^(-1)(r=0.9997)范围内都呈良好线性关系;紫丁香苷、绿原酸和芦丁的回收率分别为99.7%(RSD=1.0%),102.9%(RSD=1.5%),101.7%(RSD=1.2%);供试品溶液在12 h 内稳定。结论:该方法快速简单,线性关系良好。