Research Progress on Saussurea Tibetan Medicine-Taking Saussurea stella Maxim. for Example

Saussurea plants have a long history of being used for disease prevention and control in Tibetan medicine, and the species have gradually changed along with the development of history. Saussurea is mainly effective in wind-expelling, blood circulation, spasmolysis, pain relief, heat-clearing and detoxification. Characteristics, major chemical constituents and pharmacological studies of Saussurea stella Maxim. were summarized in this review based on the utilization of Saussurea medicinal plants in Tibetan areas, with the aim to provide adequate theoretical bases and references for exploring the further medicinal value and development and utilization of S. stella .

柳叶菜风毛菊盛花期营养和繁殖特征对海拔变化的响应

研究植物功能性状特征和资源投入模式对海拔高度变化的响应对于理解高山植物的生长策略以及适合度具有重要的生态学意义.文中以生长于青藏高原的常见种柳叶菜风毛菊为研究对象,通过采样调查和烘干称量等方法研究了柳叶菜风毛菊盛花期营养和繁殖特征对海拔高度的响应,并利用异速生长模型分析了营养和繁殖特征对个体大小的依赖关系.结果表明,柳叶菜风毛菊个体大小、营养和繁殖器官生物量、比叶面积以及管状小花数量均随海拔高度的增加而显著降低,而叶片和管状小花生物量、叶干物质含量、花丝长、花药长、花柱长以及花柱分支长均随海拔高度的增加而显著增加;海拔高度和个体大小共同对柳叶菜风毛菊营养和繁殖器官生物量、单叶生物量、比叶面积、管状小花生物量、花丝长、花药长和花柱长产生影响,而对叶干物质含量、管状小花数量和花柱分支长无显著影响.综上所述,海拔高度并不是影响柳叶菜风毛菊适应性策略的唯一因素,植株个体大小和居群生境状况都是影响适应性策略的重要因素.

水母雪莲乙醇提取物对Lewis肺癌荷瘤小鼠抗肿瘤免疫的影响

目的:初步探讨藏药水母雪莲(SMM)的体内外抗肿瘤免疫功能。方法:C57BL/6野生小鼠接种3LL细胞建立Lewis肺癌荷瘤小鼠模型,随机分为生理盐水组、SMM1低剂量组、SMM2中剂量组、SMM3高剂量组和环磷酰胺(CTX)组,体内连续治疗21 d。检测Lewis肺癌荷瘤小鼠实体瘤体积、质量和体质量;计算胸腺、脾脏指数;流式细胞仪检测肿瘤浸润组织淋巴细胞(TIL)的CD4^(+)T、CD8^(+)T百分比和CD4^(+)T/CD8^(+)T比例。体内MTT法检测80、100μg/ml SMM乙醇提取物对Lewis肺癌荷瘤小鼠脾CTL杀伤活性的影响;El ISA法检测CTL分泌IFN-γ的水平。结果:与生理盐水组比较,SMM乙醇提取物可显著抑制肿瘤生长并维持荷瘤小鼠体质量增长;胸腺和脾脏指数均显著升高(P<0.05);TIL中CD4^(+)T和CD4^(+)T/CD8^(+)T水平显著升高(P<0.05),SMM1和SMM3组CD8^(+)T显著降低(P<0.05),SMM2组差异无统计学意义。体外显著增强了荷瘤小鼠脾脏CTL的杀伤活性以及分泌IFN-γ的水平(P<0.01)。结论:SMM乙醇提取物可以通过增强免疫细胞功能发挥抗肿瘤免疫效应。

星状风毛菊药材分析及质量标准研究

依据《中华人民共和国药典》2020年版的相关要求,对星状风毛菊(Saussurea stella Maxim.)进行系统研究,建立药材质量标准.对药材性状、显微特征进行详细描述,建立薄层色谱鉴别方法.按照药典四部通则对星状风毛菊药材的水分、总灰分、醇溶性浸出物进行测定.采用高效液相色谱法建立星状风毛菊中绿原酸含量测定方法,利用所建方法对不同产地批次的11批样品进行测定.经综合评价,拟定星状风毛菊药材的水分含量不得大于10.0%,总灰分含量不得大于11.0%,醇溶性浸出物含量不得小于16.0%,以干燥品计,绿原酸的含量不低于0.50%.本研究建立的星状风毛菊药材质量标准,具有较好的专属性、准确性和重现性,可为有效控制星状风毛菊药材质量提供科学参考.

水母雪莲通气组织形成的相关基因SmLSD1克隆及表达

该研究以水母雪莲为实验材料,通过RT-PCR结合RACE技术克隆了通气组织形成相关基因SmLSD1(GenBank登录号为OL690334),并对该基因在不同胁迫下的表达量及编码蛋白结构进行测定分析。结果表明:(1)水母雪莲SmLSD1基因全长965 bp,包含537 bp的开放阅读框,编码178个氨基酸。(2)同源序列比对发现,水母雪莲SmLSD1蛋白与菊科植物牛蒡LSD1的氨基酸序列相似性最高,达到98.31%。(3)亚细胞定位显示SmLSD1基因主要在细胞核和细胞膜上表达;原核表达显示,SmLSD1基因编码氨基酸的分子量约为18 kD。(4)荧光定量分析显示,SmLSD1基因在根、茎、叶中均有表达,且在叶片中表达量最高;在低温、低氧及紫外胁迫下,SmLSD1基因的表达量下调。研究推测,SmLSD1基因在水母雪莲通气组织的形成以及对逆境胁迫的响应中发挥着重要作用。

不同理化因子对雪莲毛状根生长和总黄酮生物合成的影响

在 1 2MS液体培养基上研究了不同理化因子对水母雪莲毛状根生长和总黄酮生物合成的影响。实验结果表明 :氮源总浓度 (包括NH+4和NO-3)为 30mmol L ;NH+4 NO-3比例为 5∶2 5 ;2 %蔗糖和 3%葡萄糖组合 ;0 . 5mg LGA3和 0 . 5mg LIBA ;pH5 8;18h d的光照 (光强为 35 .0 0lx) ;2 4℃ ;摇床转速为 10 0r min有利于毛状根生长及总黄酮的生物合成。在此培养条件下 ,经过2 1d的培养毛状根生长量达到 12. 8g L(DW) ,总黄酮合成量为 192 .2mg L ,即总黄酮含量占毛状根干重的 15 % ,约为干重野生水母雪莲植株总黄酮含量的 2 5倍。

不同理化因子对雪莲培养细胞中黄酮类形成的影响

研究了不同理化因子对水母雪莲（ＳａｕｓｕｒｅａｍｅｄｕｓａＭａｘｉｍ）愈伤组织生长及黄酮类化合物生物合成的影响。结果表明，有利于细胞生长及黄酮形成的合适温度为２５℃。白光对愈伤组织生长无促进作用，但有利于黄酮的形成。培养基中添加１ｍｇ／ＬＮＡＡ和０２ｍｇ／Ｌ的ＫＴ组合对细胞的生长较有促进作用。５％蔗糖和１％葡萄糖的组合有利于细胞的生长和黄酮的形成。用６０Ｃｏγ射线辐照愈伤组织，在剂量为４０００Ｇｙ的条件下，获得一个合成黄酮能力高于原愈伤组织７０％的细胞系。用高效液相和紫外分光光度法，测定离体培养光照条件下干细胞总黄酮的含量为３２％，是暗培养的４４倍。培养温度２５℃时干细胞黄酮的含量为２０２％，分别为２０℃，３５℃时的５倍和３２倍。

野生雪莲和培养雪莲总黄酮主要药效作用比较研究

目的观察野生、培养雪莲总黄酮的镇痛、抗炎以及免疫调节作用。方法采用小鼠热刺激甩尾实验、小鼠耳肿胀法、大鼠角叉菜胶性足跖肿胀实验以及小鼠脾脏T、B淋巴细胞转化实验观察野生、培养雪莲总黄酮的镇痛、抗炎以及免疫调节作用。结果野生、培养雪莲总黄酮对热刺激所致疼痛具有明显的镇痛效果;对小鼠耳肿胀和大鼠足肿胀有明显的抑制作用;对小鼠T、B淋巴细胞转化功能都有明显抑制作用;野生与培养雪莲总黄酮的主要药效作用无显著性差异。结论野生、培养雪莲总黄酮都具有镇痛、抗炎以及免疫抑制作用,二者作用无显著性差异。

光照对水母雪莲愈伤组织合成生物碱的影响

以水母雪莲 (Saussurea medusa Maxin.)无菌幼苗的根作外植体 ,诱导获得的愈伤组织为材料 ,研究光照对生物碱合成的影响。结果表明 :尽管在水母雪莲的愈伤组织培养物中 ,总生物碱的含量比原植株中的含量低 ,但其组成成分比原植物丰富 ,并且秋水仙碱的含量也比原植物高 。

藏药雪莲原植物水母雪莲及其混淆种类的ITS序列比较和分子鉴定

目的 比较藏药“雪莲”原植物水母雪莲及其混淆种类的 ITS序列 ,为分子序列鉴定提供参照系统。方法 利用 PCR扩增和 ABI377自动测序。结果 水母雪莲不同居群间的序列相同 ,与其混淆种类之间存在一定的分子序列差异。结论 ITS序列可正确鉴定水母雪莲与其混淆种类。

水母雪莲总黄酮和水母雪莲细胞培养物总黄酮对致炎大鼠血清中炎性因子的影响

目的:通过观察水母雪莲总黄酮、水母雪莲细胞培养物总黄酮对致炎大鼠血清中炎性因子的影响,探讨其抗炎机理。方法:采用角叉菜胶致足肿胀法造成大鼠炎症模型,观察水母雪莲细胞培养物总黄酮(C)和水母雪莲总黄酮(W)对致炎大鼠血清中炎症介质和细胞因子的影响。其中IL-1β用125I标记RIA试剂盒,PGE2含量用3H标记RIA试剂盒测定;NO含量用Griess法测定。结果:水母雪莲总黄酮、水母雪莲细胞培养物总黄酮各剂量组与模型组相比均可明显抑制IL-1β、NO、PGE2的分泌作用,P<0.01或P<0.05,二者组间无显著差异。结论:水母雪莲总黄酮、水母雪莲细胞培养物总黄酮对IL-1β、NO、PGE2的分泌均有抑制作用,二者无显著性差异,其抗炎作用的机理可能与此有关。

喂饲前体提高悬浮培养水母雪莲细胞的黄酮产量

为提高水母雪莲细胞悬浮培养的生物量及次级代谢产物黄酮的含量,在培养基中喂饲肉桂酸、乙酸钠和苯丙氨酸等三种黄酮生物合成前体,考察了它们对水母雪莲细胞TUIP-8悬浮培养的影响。在（17±1）℃环境中悬浮培养TUIP-8水母雪莲细胞,喂饲这三种前体均能显著促进雪莲黄酮的生物合成,并且对细胞的生长抑制效应较小。在接种时喂饲前体,低浓度添加肉桂酸（7.14mg/L）、乙酸钠（3.57mg/L）和苯丙氨酸（3.57mg/L）更有利于提高黄酮产量。培养后期喂饲前体的效果要好于接种时喂饲,其中17.85mg/L的乙酸钠对黄酮合成的促进作用最强,可使黄酮含量从7.8%提高至12.4%,黄酮产量可提高63%。在（25±1）℃环境中悬浮培养TUIP-8水母雪莲细胞,喂饲前体促进雪莲黄酮生物合成的效果不明显,与对照相比黄酮产量只提高5%-10%。反应器培养的雪莲细胞总黄酮含量可下降至8.5%,但在培养后期使用含有28mg/L乙酸钠、60mg/L苯丙氨酸的改进MS培养基,雪莲细胞的黄酮含量可恢复至11%,细胞密度可达到21g（干重）/L。在悬浮培养水母雪莲细胞过程中添加乙酸钠和苯丙氨酸等前体物质可以促进雪莲黄酮的合成。

雪莲对力竭性游泳小鼠行为和免疫功能的影响

目的 探讨雪莲对力竭性游泳小鼠行为和免疫功能的影响。方法 将小鼠进行力竭性游泳 ,以开场试验检测自主性行为、MTT法测定淋巴细胞转化和溶血空斑法测定抗体形成。结果 力竭性游泳对ConA诱导下的淋巴细胞增殖和抗体形成细胞数量有显著的抑制作用 ,力竭性游泳后小鼠活动时间、活动总路程和中区逗留时间均缩短。雪莲可显著对抗力竭性游泳引起的上述改变。结论 雪莲对力竭性游泳小鼠的疲劳现象、抑郁性行为和恐惧行为有改善作用 ,可能与其免疫调节功能有关。

两种藏药雪莲花的元素测定

本文利用原子吸收分光光度法(AAS)和高频电感耦合等离子体发射光谱法(ICP AES)测定了苞叶雪莲和水母雪兔子两种不同的藏药雪莲花中的K、Na、Ca、Mg、Fe、Mn、Cu、Zn、Cr等9种生命无机元素和Pb、Cd等有害元素的含量,结果表明苞叶雪莲中K、Zn、Cu含量较高,水母雪兔子中Ca、Mn、Fe、含量较高,两者中Pb、Cd含量都极低,为进一步研究藏药雪莲的利用提供了重要的依据.

水母雪莲两种再生系统的建立

Two kinds of regeneration system on \%Saussurea medusa \%Maxim. have been established. The shoots can be induced from cotyledons, leaf segments and somatic embryos at 25℃.The regeneration system by organic have advantages such as shorter period, higher efficiency, better synchronism and bigger average number of shoot than the others. The content of total flavonoids in shoots is 4 %, which is 3-4 times of it in wild type.

高效液相色谱法测定水母雪莲中东莨菪内酯、伞形花内酯的含量

用高效液相色谱法测定水母雪莲中东莨菪内酯、伞形花内酯的含量。色谱柱采用MerckLichrospher100RP-18e(250mm×4.0mm,5μm);流动相采用甲醇-四氢呋喃水溶液;检测波长为346nm。东莨菪内酯平均回收率为100.07%,RSD为1.42%;伞形花内酯平均回收率为99.41%,RSD为2.06%。本法简单、快速、准确,可用于水母雪莲的质量控制。

水母雪莲愈伤组织的多态性及其再分化条件的研究

以水母雪莲 ( Saussurea medusa Maxim.)的幼叶为外植体 ,接种于 MS补加 0 .2～4 .0 mg/ L NAA、0 .2～ 4 .0 mg/ L 6-BA的不同组合的培养基上培养 3周 ,即形成大量的原始愈伤组织 ,其中以 MS+2 .0 mg/ L NAA+0 .2 mg/ L 6-BA培养基上的诱导效果最好 ,诱导率可达1 0 0 % .水母雪莲原始愈伤组织呈多态性 ,经继代培养可分离出白色水状、淡黄绿色致密的和紫红色疏松的 3种愈伤组织 ,它们在分化能力上有明显差异 ,白色和淡黄绿色的愈伤组织均无分化能力 ,紫红色愈伤组织有分化能力 .将紫红色愈伤组织转入 MS补加 0 .5～ 4 .0 mg/ L 6-BA、0 .2～1 .0 mg/ L NAA的培养基上 ,经低温 -4℃和 4℃处理 1 0 d,然后置于 2 5℃下光照培养 ,2周后就能诱导出密集的丛生芽 .不定芽转接到 MS+0 .5～ 1 .0 mg/ L IAA+0 .1 mg/ L 6-BA的培基上 ,经 -4℃低温处理 2周 ,然后在 2 5℃下培养 3周就可生根 .低温处理是水母雪莲愈伤组织再分化的关键条件 .组织细胞学观察表明 ,水母雪莲的器官发生主要为不定芽途径 .

雪莲对大鼠耐缺氧能力、红细胞数及血红蛋白的影响

[目的 ]观察雪莲对实验大鼠耐缺氧能力和红细胞数及血红蛋白含量的影响。 [方法 ]Wistar雄性大鼠 80只 ,随机分成 8组 ,每组 10只 ,其中 4组分别用蒸馏水 (对照组 )和雪莲 160、3 2 5、65 0mg/ (kg·d)连续灌胃 10d ,测定大鼠密闭性缺氧存活时间 ;另外 4组经蒸馏水 (对照组 )和雪莲 80、160 3 2 0mg/ (kg·d) ,连续灌胃 10d ,分别测定大鼠外周血中红细胞数及血红蛋白含量。 [结果 ] 3 2 5及 65 0mg/ (kg·d)剂量组与对照组比较 ,缺氧存活时间均延长 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ;160及 3 2 0mg/ (kg·d)剂量组与对照组比较 ,红细胞数均增多 (P <0 .0 1) ;各剂量组血红蛋白含量均较对照组增加 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1)。 [结论

水母雪莲体细胞胚胎发生及其植株再生

水母雪莲 (Saussurea medusa Maxim.)茎和叶片的切段接种于 MS+2 mg/ L NAA+0 .5mg/ L6- BA的培养基上 ,2 0 d后产生黄褐色的愈伤组织。经过几个月的继代培养 ,愈伤组织仍保持旺盛的增殖能力 ,但部分由黄褐色逐渐变为红色。将红色愈伤组织转到 MS+0 .1mg/ L NAA+0 .2 mg/ L 6- BA+5mg/ L GA3的培养基上 ,30 d后可分化出大量的体细胞胚。体细胞胚成熟后转到 1 / 2 MS+0 .2 mg/ L IAA+0 .5%活性炭的培养基上 ,30 d后可长出 2～4cm的根。带根的小苗经锻炼后移栽到土壤中 ,成活率达 76%。细胞组织学观察表明 ,发育成熟的体细胞胚具有胚根、胚轴和胚芽的完整结构 ,且有独立的维管系统。

稀土元素对水母雪莲细胞生长及黄酮类化合物合成的影响

研究了稀土元素钕(Nd3+)、铈(Ce3+)、镧(La3+)和混合稀土(MRE)对摇瓶液体培养的水母雪莲细胞生长及黄酮类化合物合成的影响. 发现Ce3+和La3+及混合稀土可促进雪莲细胞的生长及黄酮类化合物的合成,其中以Ce3+效果最佳. 当初始浓度为0.025 mmol/L的Ce3+添加到改良的MS培养基中时,细胞生物量和黄酮类化合物产量最高,分别可达17.7 g/L及942 mg/L,分别是不添加稀土元素的对照实验的134.4%和166.7%;同时发现在培养基中不含外源激素6-BA的条件下,合适浓度的Ce3+可替代6-BA对雪莲细胞生长及黄酮类化合物合成的促进作用,而在培养基中不含NAA时,Ce3+不能替代NAA对雪莲细胞生长及黄酮类化合物合成的促进作用.