天山雪莲提取物固体脂质纳米粒的制备及其有效成分芦丁和绿原酸在Caco-2细胞中的摄取

目的制备天山雪莲提取物(SIHE)的固体脂质纳米粒(SLNs),并对其形态、粒径、电位、包封率及稳定性等进行考察;考察SIHE-SLNs和SIHE中芦丁和绿原酸在Caco-2细胞中的摄取。方法采用HPLC建立芦丁和绿原酸的含量测定方法。采用高压匀质法制备SIHE-SLNs。采用CCK-8法测定SIHE对Caco-2细胞存活率的影响。建立Caco-2细胞模型,进行SIHE-SLNs和SIHE中有效成分芦丁和绿原酸在Caco-2细胞中的摄取。结果制备的SIHE-SLNs具有较小的粒径和较高的包封率。SIHE浓度低于250μg/mL对Caco-2细胞无细胞毒性。SIHE-SLNs及SIHE中芦丁和绿原酸在Caco-2细胞中的摄取量随药物浓度和药物作用时间的增加而增加,SIHE-SLNs中的摄取量高于SIHE;抑制剂维拉帕米对SIHE-SLNs和SIHE中绿原酸的作用均随浓度的增加而降低,对SIHE中两成分的降低效果更显著;底物根皮苷可以同时竞争性抑制SIHE-SLNs和SIHE中芦丁的摄取,但对绿原酸影响不大。结论本研究制备了质量良好的SIHE-SLNs。SIHE-SLNs和SIHE中芦丁和绿原酸在Caco-2细胞中的摄取受浓度、时间和P-糖蛋白抑制剂及底物的影响。

HPLC法测定天山雪莲提取物固体脂质纳米粒载药量与包封率

目的:建立HPLC法同时测定天山雪莲提取物固体脂质纳米粒中绿原酸和芦丁的载药量和包封率的方法。方法:采用Shim-pack VP-ODS C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈(A)-0.4%磷酸(B),梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min;检测波长分别为327 nm、257 nm,柱温35℃。采用超滤法分离天山雪莲提取物固体脂质纳米粒与游离药物测定包封率。结果:绿原酸和芦丁分离度良好,质量浓度分别在9.625～96.25μg/mL、12.87～128.7μg/mL范围内与色谱峰面积均呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为(98.5±0.12)%和(99.40±0.21)%,精密度和稳定性较好。超滤法回收率分别为(99.31±0.97)%和(99.44±0.36)%。2种成分的重复性实验的RSD均小于2.0%。3批天山雪莲提取物固体脂质纳米粒中绿原酸和芦丁的包封率分别为(83.82±0.32)%和(87.78±0.80)%,载药量分别为(17.66±0.40)%和(20.14±0.33)%。结论:本法简单快速、结果准确可靠,可同时测定天山雪莲提取物固体脂质纳米粒中绿原酸和芦丁的载药量和包封率。