药用植物虎耳草的DNA条形码鉴定及基因组大小评估

目的:通过对虎耳草(Saxifraga stolonifera)进行物种鉴定和基因组大小测定,以更全面地开发其植物资源的遗传信息。方法:通过对虎耳草DNA条形码引物的筛选,发现ITS2+matK条形码可确认待测的植物样本为虎耳草。进一步利用虎耳草及其近似物种的ITS2和matK条形码序列构建系统发育树。进化分析结果表明虎耳草与其同属物种的亲缘关系较远。结果:流式细胞术估测虎耳草基因组大小约为949.4 Mb。结论:本研究基于条形码序列对十堰武当山本地的虎耳草物种进行了鉴定,为虎耳草的基因组提供了特征信息,为后续虎耳草全基因组测序研究的物种选择和测序策略规划提供了参考。

马尾松-虎耳草复合精油保鲜处理对阳光玫瑰葡萄贮藏期内品质的影响

本研究采用马尾松-虎耳草复合精油-β-环糊精包合物加载的保鲜纸和保鲜片两种精油装载形式研究其对阳光玫瑰葡萄在低温和常温贮藏过程中品质的影响。结果表明,马尾松-虎耳草精油保鲜纸比保鲜片更有效维持了贮藏期内阳光玫瑰葡萄的品质,且精油保鲜纸处理结合低温贮藏效果最优。马尾松-虎耳草精油保鲜纸有效抑制阳光玫瑰葡萄失重率增加,低温贮藏5周后葡萄失重率为0.36%,显著低于对照组(0.81%,P<0.05),维持葡萄贮藏期间的色泽和硬度,减缓果实中可溶性固形物含量、酸度和还原糖含量的下降,低温贮藏5周后葡萄的可溶性固形物含量和酸度分别显著高于对照组1.65%和0.13%(P<0.05),有效抑制多酚氧化酶活性和过氧化物酶活性的上升,并抑制果实中丙二醛含量的上升,低温贮藏5周后葡萄丙二醛含量为0.88 nmol/g,显著低于对照组(3.25 nmol/g,P<0.05)。综上所述,马尾松-虎耳草精油保鲜纸在常温和低温贮藏下均可起到维持阳光玫瑰葡萄贮藏期间品质的作用,且精油保鲜纸使用便利,具有产业化前景。

模拟大气CO_(2)浓度升高对虎耳草生理特性和药用品质的影响

探究大气CO_(2)浓度升高对虎耳草(Saxifraga stolonifera Curt)生长及药用成分含量的影响,以期为未来大气CO_(2)浓度升高环境下虎耳草的优质栽培及药物配伍使用提供理论依据。以一年生虎耳草为试验材料,设置目前大气CO_(2)浓度(400±10)μmol·mol^(-1)和升高CO_(2)浓度(800±10)μmol·mol^(-1)2个处理,对比分析不同CO_(2)浓度条件下,虎耳草生长、生物量、叶绿素含量、酶活性、渗透调节能力、N、P、K含量及药用成分含量变化。结果表明:升高CO_(2)浓度使虎耳草生长和药用品质发生显著变化。相比对照CO_(2)浓度,升高CO_(2)显著提高虎耳草的株高、根长、叶片数、叶柄长和叶厚,并且根、茎、叶和总生物量显著增加,较对照分别增加9.86%、69.65%、14.26%和23.46%。升高CO_(2)浓度处理后,虎耳草的叶绿素含量显著增加,较对照增加2.17%。相比对照CO_(2),升高CO_(2)处理使MDA含量显著下降,较对照下降3.25%,而可溶性糖、可溶性蛋白、脯氨酸含量及SOD均显著升高。CO_(2)浓度升高对虎耳草叶片K含量无显著影响,N和P含量显著下降,较对照分别下降11.44%和18.65%。另外,CO_(2)浓度升高使虎耳草中没食子酸和岩白菜素含量及生物产量显著增加,使得虎耳草的药用品质显著提高。综上,未来大气CO_(2)浓度升高后,虎耳草的形态指标和生物量积累将显著增加,药用成分积累提高,使得虎耳草的药用价值和经济价值升高.

CO_(2)浓度升高和干旱对虎耳草生长及有效成分的影响

以虎耳草为试材,采用盆栽控制试验的方法,设置400、800μmol·mol-12个CO_(2)浓度,每个CO_(2)浓度处理下设置2个水分梯度(正常水分(90%田间含水量)和干旱处理(40%田间含水量)),研究了CO_(2)浓度升高和干旱对虎耳草生长及药用成分的影响,以期为全球气候变化背景下虎耳草的种植与培育提供参考依据。结果表明:干旱处理后虎耳草株高、叶片数以及根、茎、叶和总生物量显著降低,次生代谢产物岩白菜素和没食子酸生物产量显著下降,而丙二醛(MDA)、可溶性糖、岩白菜素、没食子酸含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性显著增加;升高CO_(2)浓度显著增加虎耳草的株高、叶片数、生物量、岩白菜素和没食子酸含量及生物产量,显著降低MDA含量;在干旱处理下升高CO_(2)浓度显著增加虎耳草的株高、叶片数、生物量、SOD含量、可溶性糖及岩白菜素和没食子酸含量,显著降低MDA含量。综上,干旱对虎耳草生长有显著抑制作用,升高CO_(2)浓度能促进虎耳草生长并缓解干旱导致的负面影响,增加岩白菜素和没食子酸含量及生物产量。

虎耳草的生药学鉴定研究

目的:对虎耳草的性状和显微特征进行鉴定研究,为其物种真实性鉴定及质量控制提供依据。方法:采用眼观、鼻闻、手摸等方法观察虎耳草的形态、大小、色泽、气味等特征,并结合体式显微镜对其进行更清晰地观察和描述;采用水合氯醛透化和稀甘油封片的方法对虎耳草药材进行粉末制片,在光学显微镜下观察其细胞形态以及内含物等特征。结果:虎耳草多蜷缩成团状,全身遍布着较长的黄棕色茸毛,具鳞片状叶,丛生灰褐色细短须状根。粉末显微特征上:虎耳草药材粉末为棕褐色,嗅之微刺鼻。叶上表皮细胞呈类多角形,未见气孔;下表皮细胞类多角形或者不规则形,气孔类圆形或长圆形,体积较小;偶见腺毛,呈棒状,多断裂,腺头扁球形或球形,含红棕色或黄棕色分泌物;非腺毛常见,其表面光滑,胞腔明显,末端尖狭;螺纹导管较常见,呈长管状,多断裂;薄壁细胞排列疏松,有较为明显的细胞间隙;草酸钙方晶甚多,棱角长。结论:虎耳草的生药学特征较为明显,可为虎耳草的鉴别、质量标准的制定及其资源开发利用提供参考依据。

虎耳草的化学成分及生物活性研究

从虎耳草分离得到8个单体化合物,运用MS、IR、1H NMR和13C NMR等波谱解析方法并结合文献对照分别鉴定为:原儿茶酸(1),琥珀酸(2),桦木酸(3),原儿茶酸甲酯(4),5,7-二羟基色原酮(5),槲皮素3-O-β-L-鼠李糖苷(6),槲皮素5-O-β-D-葡萄糖苷(7),1-O-β-D-glucopyranosyl-(2S,3S,4R,8E/Z)-2-[(2'R)-2'-hydroxytetracosanoylamino)]-8-octadecene-1,3,4-triol(8)。除化合物1,2,7之外,其它化合物均为首次从虎耳草属植物中分离得到。以MTT法测试化合物对PC-3前列腺癌细胞的体外抑制作用,以平板打孔法测试提取浸膏及化合物对不同菌种的抑制作用。结果表明化合物6,7对PC-3前列腺癌细胞的生长有一定的抑制作用,化合物2对枯草芽孢杆菌有潜在的抑制作用。

虎耳草抗前列腺癌生物活性部位筛选研究

目的筛选虎耳草抗前列腺癌生物活性部位。方法采用MTT法研究虎耳草不同极性提取物对PC-3细胞的增殖抑制作用,运用流式细胞法检测受试药对PC-3细胞周期分布的影响以及凋亡情况,应用电镜观察PC-3细胞凋亡的形态学特征,探讨抗前列腺癌作用机制。结果虎耳草不同提取部位对PC-3细胞的增殖均有一定抑制作用,随着药物浓度和作用时间的增加而增强。结论虎耳草乙醇提取后乙酸乙酯萃取部位具有很好的抗前列腺癌活性。

虎耳草不同光温条件下光合特性及有效成分含量的相关性分析

对盆栽的虎耳草进行不同光照和温度处理,测定其叶片光合特性及重要有效成分,分析虎耳草有效成分与光合速率的相关性。结果表明:虎耳草光合速率在透光率50%的条件下最高,透光率100%下最低;100%光照下的岩白菜素和没食子酸的含量最高。光合速率在20℃/16℃(12 h昼/12 h夜)适温下最高,此时岩白菜素和没食子酸的含量也最高。相关性分析表明,温度处理条件下的岩白菜素和没食子酸含量与光合速率、气孔张开面积等呈正相关,其中没食子酸含量与光合速率及蒸腾速率的正相关达极显著;不同光照条件下,没食子酸含量与光合有效辐射呈显著正相关。

虎耳草中抗氧化活性物质的提取及成分研究

对虎耳草中抗氧化活性物质提取工艺进行优化研究并对其进行总黄酮、总多酚、多糖的含量测定。通过单因素试验和Box-Behnken设计,以虎耳草中抗氧化活性物质对DPPH.自由基的清除率为响应值,利用响应面分析法对提取参数进行优化。结果表明:在提取温度39℃、料液比1∶40.5(g/mL)、提取时间3.7 min,微波功率500 W的优化条件下,以水为提取溶剂时,其提取液对DPPH.的清除率达到最大,为80.32%,同时将该提取液进行成分分析,1 g提取液中含有总黄酮11.30 mg,总多酚20.27 mg,多糖55.85 mg。

自然强光对阴生植物虎耳草光合特性的影响

采用LI-6400光合测定仪对阴棚内和自然光强下的虎耳草叶片光合特性进行了比较,同时测定了叶绿素的含量。研究发现,阳光下的虎耳草光合速率显著降低,主要受光量子密度的影响;阳光下的叶片总叶绿素含量降低明显,类胡萝卜素却明显升高。

虎耳草乙醇提取物对细菌生长曲线的影响

以金黄色葡萄球菌和大肠杆菌为试验菌株,通过分析不同虎耳草乙醇提取物浓度下细菌生长曲线来研究虎耳草的抑菌作用。结果表明,0.01、0.05、0.10g/ml 3种较低浓度的提取物对摇床培养的金黄色葡萄球菌生长具有较强的抑制作用,而0.25和0.50g/ml 2种较高浓度的提取物对摇床培养的金黄色葡萄球菌生长有较强的促进作用;这5种浓度的提取物均对摇床培养的大肠杆菌生长表现为抑制作用。所以,虎耳草乙醇提取物具有明显的抑菌活性。

HPLC测定不同产地虎耳草中丹皮酚的含量

为建立虎耳草中丹皮酚的含量测定方法，并检测不同产地虎耳草中丹皮酚的含量。采用HPLC法，色谱柱为phenomenex C18（250min×4．60mm，5μm），流动相为甲醇-水（50：50），检测波长为274nm，流速为1．0mL／min。结果表明：丹皮酚进样量在0．0431～0．3877μg范围内与峰面积积分值呈良好线性关系（r=0．9998），平均回收率为98．97％，RSD=1．64％（n=6）。本法简便、易行、重现性好，可用于虎耳草的质量控制。

不同产地与采收季节虎耳草中原儿茶酸的含量测定

目的 测定不同产地与采收季节虎耳草中的原儿茶酸含量。方法 高效液相色谱法 ,WatersNova- Pa K C1 8柱 ,流动相为甲醇 - 0 .0 5 mol· L- 1磷酸 -水 ( 85∶ 9∶ 6 ) ,紫外检测波长 2 5 8nm,流速 0 .8m L·m in- 1 。结果 原儿茶酸在 0 .0 82 6～ 0 .4 13μg范围内线性关系良好 ,平均回收率为 98.5 %。结论 安徽产虎耳草中原儿茶酸含量最高 ,安徽以 5月份采收的虎耳草含量最高。

虎耳草属两种虎耳草营养器官的组织解剖学鉴定

对虎耳草及三色虎耳草的形态特征及显微结构等方面进行了比较研究.结果表明:虎耳草的叶较小,近圆形,叶片宽阔肥厚,边缘圆齿状,深绿色,网状叶脉处有白色条纹,表皮细胞较小,表皮绒毛较多且长,叶柄细且长,葡匐茎,紫红色,颜色较浅,叶柄及叶内都有蔟晶分布,茎和叶柄内有较多淀粉,根内初生木质部呈六棱形.而三色虎耳草的叶较大,肾形,叶片较薄,近边缘处具乳白粉红斑宽边,翠绿色,背面有紫红色斑点,表皮细胞较大,表皮绒毛较少且短,叶柄粗且短,匍匐茎,紫红色,颜色较深,叶柄及叶内也有蔟晶分布,茎和叶柄内有很多淀粉粒,根内初生木质部呈三棱形.这些特征的比较为药材的开发和利用提供了科学依据.

虎耳草乙醇提取物抑菌作用的研究

用不同浓度的虎耳草乙醇提取物对4种细菌、1种酵母菌和1种霉菌进行抑菌实验。结果表明,虎耳草乙醇提取物对金黄色葡萄球菌、苏云金芽孢杆菌、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌等4种细菌的最低抑菌浓度(MIC)分别为0.9.(12ml)-1、1.1.(12ml)-1、2.3.(12ml)-1和1.7g.(12ml)-1培养基,提取物对产黄青霉和啤酒酵母的生长无明显抑制作用。

虎耳草的研究进展

虎耳草为我国民间常用药物,是近年用于盆栽观赏、盆景点缀和园林地被的常绿草本植物。从虎耳草化学成分、药理作用和古今临床应用方面进行综合分析,拟为虎耳草的进一步开发与利用提供参考依据。

咳速停胶囊中5味药材成分的薄层色谱鉴别

目的为完善咳速停胶囊现有质量标准项下的薄层鉴别,对咳速停胶囊中枇杷叶、麻黄、罂粟壳、百尾参、虎耳草5味药材进行薄层色谱鉴别(TLC)研究。方法采用TLC法分别对5味药材进行鉴别。结果所建立的方法专属性较强,各色谱斑点清晰且分离度良好,阴性均无干扰。结论 TLC可适用于咳速停胶囊中5味药材的薄层鉴别。

虎耳草的薄层色谱研究

目的:建立虎耳草药材的薄层色谱鉴别方法。方法:虎耳草药材经超声提取后,以氯仿:甲醇:甲酸=5∶1∶0.2(体积比)为展开系统,对虎耳草药材中没食子酸作定性鉴别。结果:采用此法检测,斑点清晰,分离效果好。结论:建立了一种快速、有效的虎耳草药材薄层色谱鉴别方法。

微波消解/ICP-MS法测定不同地点虎耳草中16种元素含量

利用微波消解/ICP-MS法对3个地点虎耳草中16种元素进行了含量测定。结果表明,不同地点虎耳草元素的含量相差较大,虎耳草中Ca元素与海拔高度呈线性关系。该法的加样回收率在95.3%～105.0%之间,相对标准偏差在0.98%～2.82%之间,具有较高的准确度和精确度。结果为虎耳草的药效性和药理毒理提供了理论依据。

虎耳草石油醚提取物的化学成分分析

目的:对虎耳草微波辅助-石油醚提取物的化学成分进行研究。方法:采用气相色谱-质谱-数据系统联用技术对虎耳草微波辅助-石油醚提取物的化学成分进行分析鉴定。结果:石油醚提取物共鉴定出102种成分。结论:采用气相色谱-质谱-数据系统联用技术能够对低极性部位的化学成分快捷、简便、准确分析。