高粱TCP转录因子基因SbTCP14的克隆和表达分析

为探究高粱(Sorghum bicolor)TCP转录因子SbTCP14的表达特征,以高粱‘BTx623’为材料,对其进行基因克隆、生物信息学分析、响应胁迫表达及蛋白原核表达研究。结果显示,高粱SbTCP14基因CDS全长为1185 bp,其蛋白分子量大小为40.09 kDa,编码394个氨基酸,亚细胞定位于细胞核,无跨膜区和信号肽。系统进化分析表明高粱SbTCP14与玉米ZmTCP14的亲缘关系最近。qRT-PCR分析表明,在250 mmol·L^(-1)NaCl和20%PEG6000处理下,SbTCP14基因表达量呈先升高后降低模式。在300 mmol·L^(-1)甘露醇处理下,SbTCP14基因表达量在24 h内无显著变化。经0.01 mmol·L^(-1)IAA和1 mmol·L^(-1) SA处理后,SbTCP14基因表达量呈先升后降趋势。原核表达结果显示,SbTCP14蛋白最佳表达菌株为大肠杆菌BL21(DE3)菌株,最佳诱导温度为25℃,最佳IPTG浓度为0.8 mmol·L^(-1)。Western blot结果验证原核表达的蛋白为SbTCP14。