温胃阳汤对功能性消化不良大鼠肥大细胞活化及SCF/c-Kit信号通路的影响

目的:基于肥大细胞活化及干细胞因子(stem cell factor,SCF)/受体酪氨酸激酶c-Kit信号通路探讨温胃阳汤治疗大鼠功能性消化不良的作用机制。方法:将60只SD大鼠随机分为空白组,模型组,雷尼替丁组及温胃阳汤低、中、高剂量组,每组10只。空白组大鼠不予造模,其他各组采用夹尾刺激加不规则喂养复合番泻叶法建立大鼠功能性消化不良模型,模型建立后,空白组及模型组灌胃给予生理盐水,温胃阳汤低、中、高剂量组和雷尼替丁组则分别用温胃阳汤(0.743 g/mL、1.485 g/mL和2.970 g/mL)及盐酸雷尼替丁胶囊(3 g/L)灌胃。治疗结束后,以碳墨推进法测定小肠推进率;采用甲苯胺蓝染色观察大鼠十二指肠组织肥大细胞并计数;ELISA测定大鼠十二指肠中肥大细胞类胰蛋白酶(mast cell tryptase,MCT)和组胺(histamine,HA)的含量;RT-qPCR检测十二指肠中SCF和c-Kit mRNA的表达;Western blot和免疫组化检测十二指肠中SCF和c-Kit蛋白的表达水平。结果:与模型组相比,温胃阳汤治疗显著提高大鼠的小肠推进率(P<0.05);ELISA结果显示,温胃阳汤治疗可减少大鼠十二指肠黏膜组织肥大细胞数量及MCT和HA含量(P<0.05);Western blot和免疫组化结果表明,温胃阳汤治疗可上调大鼠十二指肠组织c-Kit和SCF蛋白的表达水平(P<0.05),增加SCF和c-Kit阳性细胞数(P<0.05);RT-qPCR结果显示,WWYD治疗可上调大鼠十二指肠组织c-Kit和SCF mRNA的表达(P<0.01)。而且,小肠推进率分别与MCT和HA含量呈负相关,与SCF和c-Kit的表达呈正相关。结论:温胃阳汤能促进大鼠十二指肠动力,其作用机制可能与抑制大鼠十二指肠MCT和HA的生成,及激活SCF/c-Kit信号通路有关。

基于SCF/c-kit信号通路探讨理气通便方对气滞型慢传输型便秘大鼠肠道动力的影响

目的 基于SCF/c-kit信号通路探讨理气通便方对气滞型慢传输型便秘(STC)大鼠肠道动力的影响。方法 将36只Wistar雌性大鼠按随机数字表法分为对照组6只和造模组30只。造模组采用“洛哌丁胺混悬液+夹尾刺激”复制气滞型STC大鼠模型,连续刺激14 d。当大鼠表现出激惹、易怒、烦躁等情况,正常喂养饲料时出现大便干硬、排便数量减少等表现时,说明气滞型便秘模型造模成功。将造模成功的大鼠按照随机数字表法分为模型组、西药组、低剂量组、中剂量组和高剂量组各6只,低、中、高剂量组分别按5.15、10.3、20.6 g/(kg·d)给予理气通便方药液灌胃;西药组按0.18 mg/(kg·d)给予琥珀酸普芦卡必利片混悬液灌胃;对照组和模型组按10 mL/(kg·d)给予无菌水灌胃,每日1次,连续灌胃14 d。比较6组末次给药后6 h的粪便排出量、粪便含水量和小肠推进率;HE染色观察结肠组织病理变化;免疫组化检测结肠组织c-kit蛋白表达水平;Western blot检测结肠组织c-kit、SCF蛋白表达量。结果 HE染色显示:对照组大鼠结肠黏膜完整,杯状细胞和腺体排列整齐,未见炎症细胞聚集;模型组结肠黏膜出现肠腺排列欠整齐,黏膜下层间质血管扩张;各给药组结肠黏膜肠腺排列整齐,未观察到明显上皮损伤。与对照组比较,模型组粪便排出量、粪便含水量和小肠推进率均明显降低(P<0.05),结肠组织c-kit蛋白表达水平和c-kit、SCF蛋白表达量均明显降低(P<0.05)。与模型组比较,西药组、中剂量组、高剂量组粪便排出量、粪便含水率和小肠推进率均明显提高(P<0.05),低剂量组粪便排出量和粪便含水率均明显提高(P<0.05);给药组结肠组织c-kit蛋白表达水平均明显提高(P<0.05);低、中、高剂量组结肠组织c-kit蛋白表达量均明显提高(P<0.05),高剂量组SCF蛋白表达量明显提高(P<0.05)。结论 理气通便方可提高气滞型STC模型大鼠结肠组织中ICC的表达及调控SCF/c-kit信号通路,恢复对胃肠道节律的正常调控来改善便秘的症状。

基于SCF/C-kit信号通路探讨益髓破血方改善脑出血小鼠肠动力“通腑”作用机制

目的观察益髓破血方对脑出血小鼠排便情况与结肠组织干细胞因子(stem cell factor,SCF)/酪氨酸激酶受体(kit proto-oncogene,C-kit)信号通路的影响,探讨益髓破血方调节脑出血小鼠肠动力通腑作用机制。方法将54只SPF级健康雄性C57BL/6J小鼠随机均分为假手术组、模型组与方剂治疗组,采用鼠尾自体血注入法制作实验性脑出血模型,假手术组只进针不注射。方剂治疗组给予1 g/mL益髓破血方悬浊液灌胃,假手术组、模型组给予等体积生理盐水灌胃,每天1次。观察各组小鼠排便情况,记录第1天、第3天、第7天同时段6 h内的排便量以及末次灌胃后首次排便间隔时间,并于相同时间分段点处死小鼠取材,采用免疫组化和Western Blot法检测小鼠结肠组织中的SCF、C-kit蛋白。结果与假手术组比较,模型组小鼠第1天、第3天、第7天各6 h内排便量显著减少(P<0.05),末次灌胃首次排便时间明显滞后(P<0.05),结肠组织中SCF、C-kit蛋白表达显著减少(P<0.05),且随周期延长呈逐渐降低趋势;与模型组比较,方剂治疗组第1天、第3天、第7天各6 h内排便量相对增多(P<0.05),首次排便时间缩短(P<0.05),SCF、C-kit蛋白表达水平升高(P<0.05),且随时间推移逐渐向正常量恢复。结论益髓破血方干预治疗脑出血小鼠,可以增加肠动力,促进排便,发挥通腑作用使肠功能恢复,改善脑出血后便秘,其机制可能与SCF/C-kit信号通路有关。

二陈汤通过调控SCF/C-kit通路介导的痰湿型脑出血急性期胃肠功能障碍的研究

目的通过观察二陈汤对痰湿证脑出血急性期大鼠胃肠组织干细胞因子(stemcellfactor,SCF)/干细胞因子受体(C-kit)信号通路的动态变化的影响,探讨痰湿型体质与脑出血急性期胃肠功能障碍的关系及二陈汤的作用机制。方法将60只SD大鼠随机均分为空白组、假手术组、模型组、莫沙必利组(0.27 mg/d)、二陈汤低剂量组和二陈汤高剂量组(217、434 mg/d),每组10只。除空白组、假手术组外其余各组均采用自体血注入法制备大鼠脑出血模型,各组按剂量给予灌胃,空白组、假手术组、模型组给予生理盐水灌胃,每天2次,于给药7天处死大鼠,采用苏木精—伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色法观察大鼠胃肠黏膜细胞形态变化,采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR,RT-PCR)法和蛋白印迹(Western blot,WB)法检测大鼠胃、小肠组织中的SCF、C-kit蛋白及mRNA的表达水平。结果光镜下见空白组、假手术组大鼠胃肠黏膜细胞结构完整、形态规则,偶见轻微充血现象;模型组见组织细胞充血、水肿、炎性细胞浸润明显、组织糜烂;莫沙必利组及二陈汤低、高剂量组胃肠黏膜各层次欠清晰、排列不规则,部分组织可见组织细胞充血、水肿、炎性细胞浸润,此3组中以二陈汤低剂量组胃肠黏膜表现最为严重。模型组大鼠胃肠组织中SCF、C-kit mRNA表达水平较空白组、假手术组显著降低(P<0.05),莫沙必利组、二陈汤低剂量组、二陈汤高剂量组的表达增加(P<0.05),莫沙必利组和二陈汤高剂量组大鼠胃组织中的SCF mRNA表达显著增加(P<0.05),二陈汤高剂量组C-kit mRNA表达显著增加(P<0.05);小肠组织中的SCF、C-kit mRNA含量随二陈汤浓度提高而增加(P<0.05)。与模型组相比,莫沙必利组、二陈汤低、高剂量组大鼠胃肠组织中SCF、C-kit蛋白表达水平较模型组显著升高(P<0.05),三组中以莫沙必利及高剂量二陈汤效果更佳(P<0.05)。结论脑出血急性期痰湿型胃肠黏膜损伤及功能障碍的作用机制与SCF/C-kit信号通路相关蛋白及mRNA的表达降低有关,二陈汤可通过此机制进行有效干预,上调相关蛋白及mRNA的表达,有利于脑出血急性期胃肠功能障碍恢复。

基于深度学习的兰姆波SCF-TFM超分辨率成像

腐蚀和裂纹是结构板常见的缺陷形式,兰姆波在非贯穿型损伤处发生模式转换是制约兰姆波成像质量的主要因素。此外,声波衍射遵循瑞利准则,超声成像存在分辨率极限。本文设计了一个全卷积神经网络对接收信号进行分割与重构,实现目标模态的自动拾取,抹除杂波和模式转换的干扰。提出符号相干因子全聚焦成像法(SCF-TFM),在全矩阵聚焦成像过程中施加符号相干因子,抑制非目标区域散射波对成像结果的干扰,同时考虑散射信号的幅值及相位信息,可以一定程度上突破瑞利准则的限制,实现超分辨率成像。实验结果表明:对于单个盲孔缺陷,该方法成像结果的横向分辨率比全聚焦提高62.41%,信噪比提升58.23%;而对于多个非对称盲孔缺陷,当缺陷间距大于瑞利准则分辨率极限时,该方法的信噪比提高了92.89%;缺陷间距小于瑞利准则分辨率极限时,该方法可以实现超分辨率成像。

SCF泛素连接酶的体外泛素化体系构建与检测

为研究蛋白质的体外泛素化过程,利用大肠杆菌表达系统异源表达和纯化APPBP1/UBA3(E1)、UBC12(E2)、Cullin1-Rbx1(E3)和Nedd8(neural precursor cell expressed developmentally down-regulated protein 8)蛋白,制备FITC-Cysteine绿色荧光素标记的泛素Ub(Ubiquitin),构建了SCF泛素连接酶的体外泛素化体系,同时实现快速检测SCF泛素连接酶中Cullin1蛋白的自泛素化修饰。结果表明,建立的体外SCF E3自泛素化活性反应体系具有较高的可操作性和便利性。

基于SCF/C-kit通路探讨三焦针法对腹泻型肠易激综合征大鼠的影响

目的 观察三焦针法对腹泻型肠易激综合征(irritable bowel syndrome with diarrhea, IBS-D)大鼠胃肠动力异常及结肠组织干细胞因子(stem cell factor, SCF)、酪氨酸激酶受体(tyrosine kinase receptor, C-kit) mRNA和蛋白表达的影响,探讨三焦针法治疗IBS-D的作用机制。方法 wistar雄性大鼠随机分为空白组、模型组、西药组和三焦组,每组6只。除空白组外,其余各组采用“冰醋酸灌肠+束缚应激”建立IBS-D大鼠模型。西药组予匹维溴胺灌胃(15 mg/kg),三焦组针刺膻中、中脘、气海、血海(双侧)及足三里(双侧),诸穴行捻转补法30秒,1次/d,均治疗14天。观察大鼠一般状态;测定体质量、旷场实验(大鼠横向运动和纵向运动)、稀便率、腹壁撤退反射(abdominal retraction reflex, AWR)3分阈值时注水量;RT-PCR法、Western blot法检测结肠组织SCF、C-kit mRNA及蛋白表达。结果 与空白组相比,IBS-D模型大鼠一般状态较差,体质量显著降低(P<0.01),旷场实验检测横向运动距离与纵向运动次数显著降低(P<0.01),稀便率显著增高(P<0.01),AWR3分时注水量显著降低(P<0.01),结肠组织中SCF、C-kit mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,西药组、三焦组大鼠体质量显著升高(P<0.01,P<0.05),横向运动距离与纵向运动次数均显著升高(P<0.05,P<0.01),稀便率显著下调(P<0.01),AWR3分时注水量显著提升(P<0.01),三焦组大鼠结肠组织中SCF、C-kit mRNA及蛋白水平表达均显著降低(P<0.01),而西药组SCF、C-kit mRNA及蛋白表达无统计学意义(P>0.05)。结论 三焦针法可改善IBS-D大鼠症状,可能是与调节结肠组织中SCF、C-kit mRNA及蛋白表达水平有关。

基于SCF/C-kit信号通路探讨黄连解毒汤对脑出血急性期模型大鼠胃损伤的影响

目的:观察黄连解毒汤对脑出血急性期模型大鼠胃损伤的干预作用,并从干细胞因子/酪氨酸激酶受体(SCF/C-kit)信号通路方面探索其作用机制。方法:选择健康SD雄性10周龄大鼠进行实验。取部分大鼠采用自体血注入法制作脑出血模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组、莫沙必利组和黄连解毒汤组,每组24只;另取24只大鼠仅进针不注入自体血,作为假手术组;另取24只常规饲养大鼠作为正常组。黄连解毒汤组大鼠予黄连解毒汤颗粒剂悬浊液54 mg/d灌胃,莫沙必利组大鼠予莫沙必利悬浊液0.27 mg/d灌胃,其余各组均灌胃给予生理盐水。分别于给药24 h、4 d、7 d后,随机取每组8只大鼠,处死取材。采用苏木精-伊红(HE)染色法观察各组各时期大鼠胃组织损伤情况并进行病理损伤评分,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测各组各时期大鼠胃组织SCF、C-kitmRNA表达水平,蛋白免疫印迹(Westernblot)法检测各组各时期大鼠胃组织SCF、C-kit蛋白相对表达量。结果:正常组与同期假手术组大鼠胃黏膜病理评分、胃组织SCF、C-kitmRNA及蛋白表达比较,差异均无统计学意义(P>0.05);正常组、假手术组上述指标不同时间点组内比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。模型组大鼠胃黏膜各观察时点病理评分均明显高于同期正常组、假手术组(P<0.01),胃组织SCF、C-kitmRNA及蛋白相对表达量均明显低于同期正常组、假手术组(P<0.01)。黄连解毒汤组、莫沙必利组大鼠各观察时点胃黏膜病理评分均明显低于同期模型组(P<0.01),给药7 d时评分均明显低于同组给药24 h、4 d时(P<0.05,P<0.01);黄连解毒汤组大鼠各观察时点胃黏膜病理评分均明显低于同期莫沙必利组(P<0.01)。黄连解毒汤组、莫沙必利组大鼠各观察时点胃组织SCF、C-kitmRNA及蛋白相对表达量均明显高于同期模型组(P<0.01),给药7 d时上述指标相对表达量均明显高于同组给药24 h、4 d时(P<0.05,P<0.01);黄连解毒汤组大鼠各观察时点上述指标相对表达量均明显高于同期莫沙必利组(P<0.01)。结论:脑出血急性期常继发急性胃黏膜损伤,黄连解毒汤对脑出血急性期胃黏膜损伤有一定的保护作用,其可能通过调控SCF/C-kit信号通路保护胃黏膜,有效减轻胃黏膜损伤。

SCF型煤矿除尘通风机叶栅及后流道性能分析

为进一步提升除尘通风机的运行质量,针对煤矿企业常用的SCF型除尘通风机,对其叶栅部位和后流道流场运行情况进行仿真分析,以明确该SCF型除尘通风机在性能方面仍存在的不足;然后根据仿真分析数据,全方位地优化设计该SCF型除尘通风机各部件参数。结果显示,优化后的除尘通风机设备在理论上具有更高的性能优势,表明本次仿真分析方法具有潜在的应用价值。

超临界二氧化碳流体中SCFX-AYRL染料的溶解性研究

染料在超临界二氧化碳流体(SCF-CO_(2))中的良好溶解性是超临界无水染色技术应用的前提和基础。采用研制的超临界流体溶解度测试装置,研究了活性分散红SCFX-AYRL专用染料在SCF-CO_(2)中的溶解性,并分别从流体处理时间、温度、系统压力和助溶剂应用方面对该专用染料溶解性的影响进行了探讨。研究表明当系统压力为20 MPa、温度为80~130℃时,SCF-CO_(2)中该染料在30~60 min可达到溶解平衡,在一定范围内升高流体温度和系统压力可提高专用染料的溶解性;加入助溶剂可显著改善染料的溶解行为,提高其溶解度及溶解速率,降低温度、压力等系统因素的影响;Chrastil经验模型可实现对SCF-CO_(2)和SCF-CO_(2)/助溶剂体系中该专用染料溶解行为的良好关联和预报。

梅花鹿SCF基因参与色素合成的作用研究

【目的】探究干细胞因子(stem cell factor, SCF)对梅花鹿色素合成过程的影响。【方法】构建梅花鹿SCF基因野生型(SCF1-9)和突变型(SCF789)表达载体并转染HEK293细胞。用孵育HEK293细胞的培养液培养小鼠黑色素瘤细胞(B16),模拟SCF在机体的转运过程,检测B16细胞的黑色素含量及酪氨酸酶活性;用RT-PCR法检测小眼症转录因子M型(MITF-M)、酪氨酸酶(TYR)、酪氨酸酶相关蛋白1(TYRP1)、TYRP2、溶质载体家族45成员2(SLC45A2)、SRY盒转录因子10(SOX10)和cAMP反应元件结合蛋白(CREB)的mRNA表达量;用Western boltting检测MITF-M、TYR蛋白表达水平。【结果】SCF1-9组黑色素含量、酪氨酸酶活性和MITF-M、TYR、SOX10基因mRNA表达量及TYR和MITF-M的蛋白表达量与对照组、SCF789组相比均极显著或显著升高(P<0.01;P<0.05)。SCF1-9组SCL45A2基因mRNA表达量与SCF789组相比显著升高(P<0.05),与对照组无显著差异(P>0.05)。【结论】梅花鹿SCF基因通过SCF/c-kit信号通路调节色素基因MITF-M、SOX10、TYR、SLC45A2表达,促进色素合成。试验结果为进一步研究色素合成相关基因的表达调控提供理论依据。

浮式平台上部模块非管节点SCF控制方法

应力集中系数(Stress Concentration Factor,SCF)是评估节点疲劳损伤的重要参数。针对浮式平台上部模块非管节点的SCF控制,设计5种加强形式,采用Ansys软件对非管节点进行SCF分析。结果表明:筋板加强可有效改善面外弯矩作用下的应力集中;扣管加强对轴向力、面内弯矩和面外弯矩均具有较好的改善效果。

便塞通合剂对慢传输型便秘大鼠结肠SCF/c-Kit信号通路的影响

目的:探讨便塞通合剂(BST)对慢传输型便秘(STC)大鼠结肠干细胞因子(SCF)/c-Kit信号通路的影响。方法:将40只健康SD雄性大鼠分为正常组(NC组,n=10)和造模组(n=30);运用洛哌丁胺复制STC大鼠模型,造模成功后,将造模组大鼠随机分为模型组(MC组)、莫沙比利组(PC组)、便塞通合剂组(BST组),每组各10只。药物干预14 d后,比较各组大鼠一般情况、24 h粪便颗粒数、粪便含水量及肠道炭墨推进率;免疫组化和RT-qPCR检测SCF、c-Kit的表达。结果:与模型组比,BST组大鼠24 h粪便颗粒数、粪便含水量、肠道炭墨推进率均增高(P<0.05);与空白组比,模型组大鼠结肠组织c-Kit、SCF蛋白及mRNA表达水平均降低(P<0.05);与模型组比,BST组大鼠结肠组织c-Kit、SCF蛋白及mRNA表达水平均增高(P<0.05)。结论:BST可有效治疗大鼠慢传输便秘,机制可能与上调肠道SCF及c-Kit表达,加快肠道蠕动有关。

“朴实方”对慢传输型便秘小鼠结肠Cajal细胞及SCF/c-Kit信号通路的影响

目的:观察朴实方对慢传输型便秘(STC)模型小鼠结肠Cajal间质细胞(ICC)及干细胞因子(SCF)/酪氨酸激酶受体(c-Kit)信号通路的影响,探索朴实方治疗STC的作用机制。方法:50只ICR小鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组(普芦卡必利,每日灌胃给药量为0.3 mg/kg)和朴实方高、低剂量组(每日灌胃给药量分别为17.0、8.5 g/kg),每组10只。除正常组外,其余各组小鼠采用复方地芬诺酯混悬液连续灌胃2周构建STC模型。造模成功后各给药组每日分别予相应药物灌胃,正常组和模型组每日灌胃给予同体积生理盐水,各组均连续灌胃2周。干预完成后,使用活性炭灌胃法测定各组小鼠肠道推进率,苏木精-伊红(HE)染色比较各组小鼠结肠组织学特征,酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组小鼠血清SCF含量,蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测各组小鼠结肠组织c-Kit蛋白、SCF蛋白表达情况,酶联实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组小鼠结肠组织c-Kit mRNA、SCF mRNA表达。结果:模型组小鼠肠道推进率明显低于正常组(P<0.01),各给药组小鼠肠道推进率均明显高于模型组(P<0.01)。模型组小鼠结肠肌层厚度降低,腺体数量减少且充血、水肿,各给药组小鼠结肠组织病理改变较模型组减轻,以朴实方高剂量组和阳性对照组改善更为显著。模型组小鼠血清SCF含量和结肠组织c-Kit mRNA、SCF mRNA及c-Kit、SCF蛋白相对表达量均明显低于正常组(P<0.01);朴实方高、低剂量组及阳性对照组小鼠血清SCF含量明显高于模型组(P<0.01),结肠组织c-Kit mRNA、SCF mRNA及c-Kit、SCF蛋白相对表达量均明显高于模型组(P<0.05,P<0.01)。上述指标各给药组组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:朴实方可以提高STC模型小鼠肠道推进率,改善小鼠结肠组织病理,其可能通过上调结肠组织中c-Kit和SCF的表达,激活SCF/c-Kit信号通路,促进结肠ICC增殖,增强肠道蠕动,从而改善STC模型小鼠便秘状态。

色象中药血清对SCF、c-Kit表达及黑素瘤细胞调控的研究

【目的】探讨色象中药对黑素的体外调控机制。【方法】筛选黑药(首乌、熟地、乌梅、女贞子、黒芝麻、丹参、鸡血藤)和白药(白芷、白附子、白茯苓、白蔹、白芨、白僵蚕、白术),制备各中药含药血清,体外处理人A375黑素瘤细胞16~48 h。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定黑素瘤细胞增殖情况;采用NaOH溶解法测定黑素瘤细胞黑素含量;采用免疫荧光染色法测定黑素瘤细胞干细胞因子(SCF)、c-Kit蛋白表达。【结果】(1)分别含首乌、乌梅、黑芝麻、白茯苓、白术、女贞子、白芷、白附子、白芨、白僵蚕的血清组黑素瘤细胞增殖能力较对照组升高(P<0.05或P<0.01);分别含丹参、白蔹的血清组黑素瘤细胞增殖能力较对照组降低(P<0.01)。(2)分别含熟地、黑芝麻、丹参、鸡血藤、白蔹、白术、首乌、女贞子、白芷、白附子、白芨、白僵蚕的血清组黑素瘤细胞中黑素含量较对照组增加(P<0.05或P<0.01)。(3)与对照组比较,含乌梅血清组SCF、c-Kit蛋白表达量均增加(P<0.01),分别含女贞子、白芷、白茯苓、白蔹的血清组SCF、c-Kit蛋白表达量均减少(P<0.05或P<0.01),分别含首乌、黑芝麻、丹参、白附子的血清组SCF蛋白表达量增加、c-Kit蛋白表达量减少(P<0.05或P<0.01),含白僵蚕血清组SCF蛋白表达量减少、c-Kit蛋白表达量增加(P<0.05或P<0.01),分别含熟地、鸡血藤、白术的血清组SCF蛋白表达量增加(P<0.05或P<0.01)。c-Kit蛋白表达量变化不明显(P>0.05),含白芨血清组SCF蛋白表达量变化不明显(P>0.05)。c-Kit蛋白表达量减少(P<0.01)。【结论】白药与黑药均可通过调控SCF、c-Kit表达,对黑素瘤细胞黑素代谢有双向调节作用。

中医疗法靶向干预SCF/c-kit信号通路治疗功能性消化不良机制研究进展

功能性消化不良(FD)的病理机制尚未阐明,中医治疗FD优势明显,临床疗效确切,其中以中药复方、单味药及其成分和针灸等为代表的中医疗法在FD的临床治疗中具有重要地位。目前,针对FD的研究中干细胞因子(SCF)/c-kit信号转导的重要性日益凸显,并取得一定进展。中医疗法干预SCF/c-kit系统治疗FD的机制可能与其调节胃肠卡哈尔间质细胞、神经细胞和肥大细胞功能异常引起的胃肠动力障碍、十二指肠低度炎症和内脏敏感性增高有关。本文对中医疗法调控SCF/c-kit通路治疗FD进行综述,以期为临床治疗提供依据。

增液承气汤加减通过SCF/c-kit信号通路对慢性传输型便秘的作用机制研究

目的:探讨增液承气汤加减对慢性传输型便秘治疗的作用及其作用机制。方法:健康SD大鼠60只,应用复方地芬诺酯片灌胃构建慢性传输型便秘模型大鼠,造模成功后随机分成模型组、增液承气汤加减高、中、低剂量组(剂量分别为38.88、19.44、9.72 mg/kg)、阳性药组(12.5%的伊托必利混悬液,54 mg/kg),每组10只。另取未经造模的10只SD大鼠作为正常组。正常组和模型组大鼠给予等量的超纯水,各组大鼠连续灌胃7 d。给药期间每日定期监测大鼠体质量变化、活动状态、摄食量、饮水量;给药结束后测定大鼠排便情况、肠道传输功能;ELISA法检测血清中5-HT、VIP、SP水平;Western Blotting法检测大鼠结肠组织SCF、c-kit的表达水平。结果:与模型组比较,增液承气汤加减高、中、低剂量组和阳性药组大鼠在给药期间体质量增长明显(P<0.05),摄食量增加(P<0.05),饮水量增加(P<0.05);大鼠首粒黑便排出时间明显缩短(P<0.05),血清中5-HT、VIP、SP水平明显降低(P<0.05);12 h大便数量、粪便含水量、肠管总长度、碳末推进长度、碳末推进率均明显升高(P<0.05);SCF、c-kit蛋白相对表达水平明显升高(P<0.05)。结论:增液承气汤加减可剂量依赖性地改善大鼠慢性传输型便秘,其机制可能与SCF/c-kit信号通路有关。

SCF/c-kit信号通路对乳腺癌侵袭转移调控的作用及机制研究

目的:探讨SCF/c-kit信号通路对乳腺癌侵袭转移调控的作用及机制研究。方法:采用人乳腺癌细胞株MCF-7构建体外模型。将细胞分为空白对照组、SCF过表达组和SCF抑制组。采用MTT法检测细胞24h、48h、72h的增殖率,采用Transwell实验检测细胞24h、48h、72h的侵袭情况。结果:SCF过表达组在24h、48h、72h的细胞增殖率均显著大于SCF抑制组和空白对照组(P<0.05),且SCF抑制组细胞增殖率显著低于空白对照组(P<0.05);SCF过表达组在24h、48h、72h的细胞侵袭数均显著大于SCF抑制组和空白对照组(P<0.05),且SCF抑制组细胞侵袭数显著低于空白对照组(P<0.05)。结论:SCF/c-kit信号通路的激活可增强乳腺癌细胞的增殖和侵袭能力,靶向抑制SCF/c-kit信号通路的表达可有效逆转对乳腺癌细胞增殖和侵袭的促进作用。

利那洛肽联合普芦卡必利对IBS-C小鼠氧化应激状态及SCF/c-kit信号通路的影响

目的探究利那洛肽联合普芦卡必利通过调控干细胞因子(SCF)/c-kit信号通路对便秘型肠易激综合征(IBS-C)小鼠氧化应激损伤的修复作用。方法从50只C57BL/6野生型小鼠中随机选取10只作为对照组,其余40只采用冰水灌胃法构建IBS-C小鼠模型。造模成功后,将40只小鼠随机分为模型组(不进行其他处理)、利那洛肽组(给予利那洛肽)、普芦卡必利组(给予普芦卡必利)及联合给药组(同时给予利那洛肽和普芦卡必利),每组各10只。治疗14 d后,观察各组的粪便颗粒数和粪便含水量变化,采用墨汁灌胃法检测各组的胃残留率和小肠推进率,采用免疫组织化学染色法检测各组结肠组织中胃动素(MOT)和生长抑素(SS)水平,采用ELISA法检测各组血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧(ROS)和总抗氧化能力(TAOC)水平,采用蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR法检测结肠组织中SCF、c-kit的蛋白和mRNA的相对表达量。结果与模型组相比,各给药组的粪便颗粒数和粪便含水量均显著增多,胃残留率均显著降低,小肠推进率均显著升高,结肠组织中MOT、SS水平均显著降低,血清MDA、ROS水平均显著降低,血清SOD、TAOC水平均显著升高,结肠组织中SCF、c-kit的蛋白和mRNA的相对表达量均显著升高(P均<0.05)。与利那洛肽组、普芦卡必利组相比,联合给药组的胃残留率均显著降低,小肠推进率均显著升高(P均<0.05)。结论利那洛肽联合普芦卡必利治疗可有效降低IBS-C模型小鼠的胃残留率,升高小肠推进率,并减轻其氧化应激损伤,这可能与SCF/c-kit信号通路的激活有关。

电针天枢穴对慢传输型便秘大鼠结肠c-kit、SCF基因表达的调节

目的从基因水平探讨电针天枢穴治疗慢传输型便秘(STC)的作用机理,为临床治疗提供实验依据。方法以饲喂复方苯乙哌啶饲料建立慢传输型便秘大鼠模型。将造模成功的实验大鼠随机分为电针组、模型组,每组各6只。予电针组电针双侧天枢穴,疗程14 d。治疗结束后采用RT-PCR法分别检测各组大鼠结肠c-kit和SCF的mRNA表达。结果模型组结肠c-kit和SCF的基因表达率分别是正常大鼠的(0.37±0.03)倍和(0.24±0.09)倍,电针组结肠c-kit和SCF的基因表达率分别是正常大鼠的(0.48±0.06)倍和(0.38±0.07)倍;与模型组相比,电针组大鼠结肠c-kit和SCF的基因表达率都有所上升,有显著性差异(P<0.05)。结论 STC模型大鼠的结肠c-kit和SCF基因表达下调,c-kit/SCF系统受损。电针天枢穴对结肠c-kit和SCF的基因表达有上调作用,可能是针灸治疗慢传输便秘的机制之一。