Preventive Effect and Mechanism of Ethyl Acetate Extract of Sceptridium ternatum in Monocrotaline-Induced Pulmonary Arterial Hypertension

Objective:To observe the effect and molecular mechanism of ethyl acetate extract of Sceptridium ternatum(STE)on the monocrotaline(MCT)-induced pulmonary arterial hypertension(PAH).Methods:The main chemical components of Sceptridium ternatum were determined,and the effects in PAH rats were observed.A total of 140 Sprague Dawley rats were randomly and equally divided into the normal group,the model group,the Bosentan group,and the STE groups(2.5,5,10 g/kg)by the random number table method.The characteristic indicators of PAH were measured,and immunohistochemistry was used to observe the lung tissue of rats.Morphological changes of the lung tissue were observed under the light microscope.Results:Compared with the normal group,rats in the model group showed a significant increase in right ventricular free wall thickness(RVFWT),mean pulmonary arterial pressure(mPAP),mean right ventricular pressure(mRVP),max right ventricular pressure(max RVP),weight of right ventricle(RV),and lung index(LI),while a significant decrease in pulmonary artery acceleration time(PAAT,P<0.01).Compared with the model group,rats treated with STE had a significant decrease of RVFWT,mPAP,mRVP,max RVP,and RV,while a significant increase of PAAT(P<0.01).After injection of MCT,nuclear factor-κB(NF-κB)p65 andα-smooth muscle actin(α-SMA)expression levels were up-regulated,and on the contrary,the treatment groups showed a significant downregulation without dose-dependent trend.Conclusions:STE can relieve the PAH in rats.STE may relieve pulmonary vascular disease and pulmonary injury by down-regulating the expression of NF-κB p65 andα-SMA.

小春花总黄酮提取纯化工艺研究

目的：建立小春花总黄酮的提取、纯化工艺,为总黄酮化学成分、药理研究和制剂开发提供基础。方法：以小春花总黄酮为指标,考察提取工艺;采用大孔吸附树脂、聚酰胺树脂纯化小春花总黄酮,对树脂型号、上样浓度、上样液pH值、洗脱溶剂的用量等进行了考察,确定最佳工艺。结果：小春花总黄酮的最佳提取工艺为：6倍量70%乙醇提取3次,每次2 h;得到总黄酮的平均含量4.14 mg/g,转移率均达到90%以上;大孔吸附树脂纯化小春花总黄酮的最佳工艺为：以D101型大孔吸附树脂为吸附剂,上样液浓度p H为5、浓度为1.22 mg/mL,以流速2 mL/min过柱,用水6BV进行洗脱,再用70%乙醇4BV洗脱,得到的小春花总黄酮含量达7.25%,得率均在75%以上;聚酰胺树脂纯化最佳工艺为：以100-200型聚酰胺树脂为吸附剂,上样浓度为1.18 mg/mL,流速2mL/min过柱,再用70%乙醇4BV洗脱,得到小春花总黄酮的含量符合制剂学要求。结论：本部分建立了小春花总黄酮的提取工艺,并采用大孔吸附树脂、聚酰胺树脂进行纯化,提取的总黄酮含量≥50%,满足制剂开发的需求。

小春花对肝纤维化小鼠肝功能及TGFβ_1、CTGF水平的影响

目的研究小春花对肝纤维化的作用及其作用机制。方法通过建立肝纤维化小鼠模型给予药物治疗,检测小鼠肝功能的变化及转化生长因子(TGFβ1)、结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。结果结果表明小春花能有效的抑制小鼠肝纤维化,并可以减少小鼠肝脏TGFβ1、CTGF的表达。结论小春花不但能减轻肝细胞损伤,改善肝功能,而且通过抑制TGFβ1的产生,阻断和逆转肝纤维化的形成,对CCL4诱导的小鼠肝纤维化有明确的治疗作用,对肝脏没有明显的毒性作用。

响应面法优化小春花根黄酮提取工艺及其抗油脂氧化活性研究

目的研究小春花根黄酮提取工艺及其抗油脂氧化活性。方法以总黄酮提取率为考察指标,利用单因素试验结合响应面Box-Benhnken试验设计方法,研究乙醇浓度、料液比、提取时间、提取温度4个因素对提取工艺的影响,优化小春花根黄酮提取工艺;通过烘箱热贮藏实验研究小春花根黄酮对油脂的抗氧化作用。结果影响小春花根总黄酮提取的因素依次为:超声提取温度>乙醇浓度>提取时间>料液比,小春花根总黄酮最佳工艺条件为:乙醇体积分数73%,料液比1:43(g/mL),提取时间73 min,提取温度71℃。黄酮提取得率为3.4299 mg/g,与理论预测值3.4913 mg/g接近。抗氧化活性分析表明,黄酮提取物有较强抗油脂氧化活性;对油脂的抗氧化能力与黄酮提取物浓度成正相关,1 mg/mL黄酮提取物与VC的抗氧化作用相当。结论小春花根黄酮对油脂良好的保护效果,在油脂抗氧化添加剂的应用方面具有潜在的开发价值。

小春花治疗肺心病模型大鼠肺动脉高压的研究

目的 观察小春花对肺心病模型大鼠肺动脉高压（pulmonary arterial hypertension,PAH）的影响。方法 120只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、西地那非组和小春花提取物高、中、低剂量组,每组20只。采用野百合碱（60 mg.kg 1）皮下注射建立大鼠肺心病PAH模型;连续灌胃给药21 d。采用右心导管法测定平均右心室压（mean right ventricularpressure,mRVP）、平均肺动脉压（mean pulmonary arterial pressure,mPAP）和最大右心室压（max right ventricular pressure,max RVP）,处死动物测定称取肺湿重（lung wet weight,WW）、右心室游离壁（right ventricu tar free wall mass,RV）、左心室加心室间隔（left ventricular pus septal,LV＋S）重量,计算肺指数（lung index,LI）和右心肥厚指数（right ventricularhypertrophy index,RVHI）。结果 模型组大鼠mRVP、mPAP和max RVP显著高于正常对照组（P〈0.001）;与模型组比较,小春花高、中剂量组大鼠mPAP、mRVP和max RVP均显著降低（P〈0.001-0.05）;小春花高剂量组大鼠RV、LV＋S、WW、LI均显著低于模型组（P〈0.001-0.01）。结论 小春花对野百合碱诱导的大鼠肺心病PAH有一定的干预作用。

小春花药材质量标准研究

目的制定并考察小春花药材质量标准,为进一步开发小春花药材提供基础。方法采用紫外-可见分光光度法建立小春花中总黄酮的含量测定方法;采用HPLC同时测定小春花药材中槲皮素和山奈酚的含量。结果建立小春花总黄酮的测定方法,槲皮素为在30.23~181.40μg·m L^(-1)呈良好线性关系,R^2=0.998 4;确定药材中槲皮素、山奈酚的含量测定方法,槲皮素在2.64~21.12μg·m L^(-1)呈良好的线性关系,R^2=0.999 8,山奈酚在2.00~16.00μg·m L^(-1)呈良好的线性关系,R^2=0.999 9;小春花总黄酮以槲皮素计不得<0.2‰,山奈酚计不得<0.6‰。结论本研究对小春花药材进行质量控制,提升并建立了新的小春花药材质量标准。