基于Box-Behnken响应面法结合BP神经网络多指标优化汉桃叶微丸的制备工艺

目的采用Box-Behnken响应面法结合BP(back-propagation)神经网络多指标优化汉桃叶微丸的制备工艺。方法利用挤出滚圆法制备汉桃叶微丸,在单因素试验的基础上,以辅料微粉硅胶与微晶纤维素(microcrystalline cellulose,MCC)的比例、润湿剂、载药量、滚圆频率和滚圆时间为考察因素,以收率(%)、圆整度、豪斯纳比(hausner ratio,HR)和脆碎度(%)为评价指标,基于G1-熵权法对各评价指标进行组合赋权并计算综合评价结果,从而优化处方组成及其制备工艺;建立BP神经网络模型,选取合理数据进行学习和验证并预测汉桃叶微丸的最佳制备工艺。结果采用Box-Behnken响应面法及BP神经网络预测的汉桃叶微丸的最佳制备工艺为微粉硅胶与MCC的比例为1∶3(g∶g)、载药量为25%、滚圆频率为22 Hz。验证试验的结果表明,Box-Behnken响应面法的综合评价结果均值与响应面优化理论值的绝对误差为0.0077,相对误差为0.79%。结论基于Box-Behnken响应面法结合BP神经网络多指标优化的汉桃叶微丸的制备工艺稳定可行、较为合理。

两种鹅掌柴属植物挥发油的气相色谱-质谱联用鉴别研究

目的对七叶莲和广西鹅掌柴两种鹅掌柴属植物中挥发油的化学成分进行比较研究。方法采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,利用气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术对其进行了分离分析。结果七叶莲挥发油共鉴定出16个化合物,广西鹅掌柴挥发油共鉴定出了20个化合物,其中共有成分8个。两者所含的主要化学成分有很大差异,七叶莲挥发油中大部分是萜烯类化合物,以β-elemene和β-eudesmene和α-selinene为主,而广西鹅掌柴以α-curcumene,eudesm-7[11]-en-4-ol,1,4-dimethyl-8-isoproplderetricyclo(5,3,0,0(4,10))decan、Spathuleno为主。结论两者挥发油GC/MS分析图谱和成分存在明显差异。该方法快速、简便,可用于两者的分析鉴别。

七叶莲不同溶剂提取部分的抗炎镇痛作用

目的探讨七叶莲不同溶剂提取部分的抗炎镇痛作用。方法采用醋酸扭体法、小鼠耳二甲苯致炎法、肿胀法等方法评价七叶莲不同提取部分的抗炎镇痛效果,并明确其抗炎镇痛有效部分。结果七叶莲叶挥发油可明显减少小鼠醋酸所致的扭体次数,可明显缓解小鼠二甲苯所致的耳廓肿胀;七叶莲茎水提液氯仿部分、正丁醇部分也可减少小鼠醋酸所致扭体次数,有效缓解小鼠二甲苯所致的耳廓肿胀和角叉菜胶所致的足趾肿胀。结论七叶莲抗炎镇痛药理作用的有效部分主要集中在叶挥发油部分、茎水提液的氯仿部分和正丁醇部分。

七叶莲化学成分的系统试验研究

目的研究七叶莲所含化学成分。方法采用化学成分系统预试验辅助专项预试验法。结果七叶莲中黄酮、糖类、氨基酸、皂苷、挥发油、酚性成分、有机酸、油脂、甾体类成分的系统预试实验结果为阳性。黄酮的辅助专项预试实验结果为阳性。结论七叶莲中含有黄酮、糖类、氨基酸、皂苷、挥发油、酚性成分、有机酸、油脂、甾体类等成分。

七叶莲枝叶挥发油化学成分的GC/M S分析

目的研究七叶莲嫩枝及鲜叶中挥发油的化学成分。方法采用水蒸气蒸馏法提取七叶莲枝叶挥发油,并利用气质联用技术对其化学成分进行分析。结果共分离出42种成分并确认了其中16种主要成分,占总挥发油含量的82.80%。结论七叶莲枝叶主要成分为萜烯类化合物,包括β-榄香烯(24.20%)、β-桉叶烯(24.00%)、α-蛇床烯(12.46%)等。

均匀设计法优选大孔树脂纯化七叶莲总皂苷工艺研究

以总皂苷比吸附量和解吸率为指标,通过静态和动态吸附解吸附试验,从9种树脂中筛选出AB-8型大孔吸附树脂;以总皂苷收率和总皂苷纯度为指标,通过单因素试验考察了最佳洗脱剂浓度,并利用均匀设计法对大孔树脂富集纯化的工艺进行了优化。结果表明:以70%乙醇为洗脱剂,以总皂苷收率为指标,优选的工艺参数为:上样质量浓度0.976g/L、上样流速2.2mL/min、洗脱剂用量3.0BV(1BV=80mL,下同)、洗脱流速3.6mL/min,其总皂苷收率62.17%,总皂苷纯度41.22%;以总皂苷纯度为指标,优化的工艺参数为:上样质量浓度0.976g/L、上样流速2.8mL/min、洗脱剂用量0.6BV、洗脱流速0.8mL/min,其总皂苷收率41.25%,总皂苷纯度49.79%。

响应面法优化七叶莲多酚提取工艺及抗氧化性研究

以七叶莲为试材,采用纤维素酶协同超声辅助提取七叶莲多酚,通过单因素试验和响应面试验优化提取条件,研究了七叶莲多酚对羟基自由基(·OH)、DPPH自由基(DPPH·)和亚硝酸盐(NO_(2)^(-))的清除能力,以期为综合开发利用七叶莲多酚提供参考依据。结果表明:七叶莲多酚最佳提取工艺条件为乙醇体积分数40%,料液比1:35g·mL^(-1),酶解时间35min,超声功率350 W,酶解温度50℃,纤维素酶用量3.0%(以七叶莲干粉质量为基准,下同);在该条件下,七叶莲多酚提取量为(15.52±0.824)mg·g^(-1),与预测值(15.61mg·g^(-1))接近;七叶莲多酚对·OH、DPPH·和NO_(2)^(-)有较强的清除能力,且随多酚质量浓度的增大而逐渐增强;七叶莲多酚质量浓度为0.137mg·mL^(-1)时,对·OH、DPPH·和NO_(2)^(-)的清除率分别为54.33%、91.14%和61.42%。采用响应面法优化的多酚提取工艺参数准确可靠,可用于七叶莲多酚提取;七叶莲多酚具有较强的体外抗氧化能力,可作为食品及医药的天然抗氧化剂资源进行开发利用。

七叶莲果实的抗炎镇痛作用研究

目的:研究七叶莲果实水提物的抗炎镇痛作用。方法:采用热板法疼痛模型、醋酸诱发的小鼠扭体疼痛模型评价水提物的镇痛作用和二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型评价水提物的抗炎作用。结果:七叶莲果实水提物对热板、醋酸导致的疼痛,二甲苯所致的耳廓肿胀均有不同程度的抑制作用。结论:七叶莲果实水提物有较强的抗炎镇痛作用。

七叶莲挥发油的GC/MS分析和抗炎镇痛作用研究

[目的]研究福建七叶莲挥发油的化学成分,探讨七叶莲挥发油的抗炎镇痛作用。[方法]采用气相色谱-质谱联用技术对七叶莲挥发油的化学成分进行了分析,结合计算机检索技术对分离的化合物进行鉴定,应用面积归一法计算各成分的相对含量,采用醋酸扭体法、小鼠耳二甲苯致炎肿胀法评价七叶莲挥发油的抗炎镇痛效果。[结果]从七叶莲部分挥发油中共分离出61种成分,并鉴定确认了其中53种主要成分,其中主要化合物和含量分别为4-萜品醇20.40%、(-)-斯巴醇16.01%、氧化石竹烯8.90%等;七叶莲挥发油可明显减少小鼠醋酸所致的扭体次数,可明显缓解小鼠二甲苯所致的耳廓肿胀。[结论]福建七叶莲挥发油中主要含萜品烯、醇类化合物,且其挥发油具有明显抗炎镇痛作用。

一氧化氮合酶抑制剂对七叶莲花镇痛作用的影响

目的探讨一氧化氮合酶(NOS)抑制剂与七叶莲花镇痛作用的关系。方法采用小鼠热板法,将小鼠随机分为等渗盐水组(阴性对照组)、曲马多组(阳性对照组)及各实验组,观察L-精氨酸(L-Arg)和NOS抑制剂L-硝基精氨酸甲酯(L-NAME)对七叶莲花醇提物(SAHF)镇痛作用的影响。结果与等渗盐水组比较,L-NAME可显著增强七叶莲花的镇痛作用(P<0.01);与SAHF组比较,脑组织中NO水平显著降低(P<0.05)。结论七叶莲花的镇痛作用和NOS抑制剂之间存在一定的相互作用,L-NAME可显著增强七叶莲花的镇痛作用,提示SAHF的镇痛作用机制与降低体内过量的NO有关。

汉桃叶抗炎镇痛作用有效部位的筛选

目的分离并筛选汉桃叶抗类风湿性关节炎的有效部位。方法采用系统溶剂提取法对汉桃叶进行提取、分离得到不同部位的提取物。分别采用小鼠二甲苯致耳廓肿胀、大鼠棉球所致肉芽肿、小鼠醋酸扭体法和小鼠热板法评价活性。结果乙酸乙酯提取物对小鼠耳廓肿胀抑制率为50.10%,有显著抗炎作用(P<0.01);对大鼠棉球所致肉芽肿的抑制率为56.05%,有显著抗炎作用(P<0.01);对醋酸致小鼠疼痛的扭体抑制率达50.17%,有明显镇痛作用(P<0.01);对热板所致的小鼠疼痛抑制率为55.01%,有显著镇痛作用(P<0.01)。结论汉桃叶乙酸乙酯提取物可能是其治疗类风湿性关节炎的有效部位。

汉桃叶总黄酮的提取及其镇痛抗炎活性研究

目的研究汉桃叶总黄酮的提取工艺及其镇痛抗炎活性。方法采用乙醇回流提取法,通过正交设计试验,确定总黄酮提取工艺的最佳条件;用扭体法观察镇痛作用,用二甲苯使小鼠致炎法观察该药的抗炎作用。结果汉桃叶总黄酮提取的最佳工艺条件为加8倍量80%乙醇提取2次,每次1.5 h;所得黄酮具有较强的镇痛抗炎活性。结论优选的提取工艺效率高,可增加汉桃叶的利用率。

GC法测定七叶莲提取物中大孔树脂有机残留物

目的建立七叶莲提取物中7种大孔树脂有机溶剂残留物的检测方法。方法采用顶空进样毛细管气相色谱法,色谱柱为HP-INNOWAX毛细管柱;柱温(程序升温):60℃维持16min,再以20℃.min-1的升温速率升至200℃,维持2min;进样口温度:240℃;FID检测器温度:300℃;25%N,N-二甲基乙酰胺为溶解介质,载气为氮气,测定七叶莲提取物中正己烷、苯、甲苯、对二甲苯、邻二甲苯、苯乙烯、1,2-二乙基苯7种大孔树脂有机溶剂残留量。结果本法线性关系良好,r=0.9983～1.0,精密度RSD均小于7.0%,7种溶剂的平均回收率为93.34%～98.39%,其RSD在0.99%～5.10%。结论该方法操作简便快速,灵敏度高,准确度好,可作为七叶莲提取物中大孔树脂有机溶剂残留量的测定方法。

七叶莲对佐剂性关节炎大鼠的治疗效果及对血清白细胞介素-4、白细胞介素-10和肿瘤坏死因子-α水平的影响

目的 探讨七叶莲对佐剂性关节炎(AA)大鼠的治疗效果及其对血清白细胞介素(IL)-4、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的影响。方法 将50只雄性Sprague Dawley大鼠按随机数字表法分为正常对照组、模型组、吲哚美辛组、低剂量七叶莲组、高剂量七叶莲组,每组10只。模型组、吲哚美辛组、低剂量七叶莲组、高剂量七叶莲组大鼠于左后足趾皮内注射弗氏完全佐剂100μL制备AA模型。造模成功后,吲哚美辛组大鼠给予2.5 mg·kg^(-1)吲哚美辛灌胃作为阳性对照,低剂量七叶莲组和高剂量七叶莲组大鼠分别给予10.0、25.0 mg·kg^(-1)七叶莲灌胃,正常对照组和模型组大鼠给予等体积生理盐水灌胃,均每日1次,连续给药10 d。实验期间观察各组大鼠进食、饮水、皮毛、关节肿胀等一般情况。分别于造模后及给药2、5、8、10 d时,采用关节炎指数(AI)评分评估模型组、吲哚美辛组、低剂量七叶莲组、高剂量七叶莲组大鼠全身关节炎病变程度。分别于造模前、造模后及给药2、5、8、10 d时,使用游标卡尺测量各组大鼠后足跖厚度,以后足跖厚度表示大鼠足跖肿胀度。给药10 d后,采用酶联免疫吸附试验检测各组大鼠血清中IL-4、IL-10、TNF-α水平。结果 实验期间,正常对照组大鼠进食、饮水正常,皮毛整洁,神态活泼,无关节肿胀;模型组大鼠进食、饮水量下降,活动减少,精神倦怠,局部关节肿胀明显,甚至出现溃烂;低剂量七叶莲组和高剂量七叶莲组大鼠给药6 d后,进食、饮水逐渐增加,神态良好,局部出现的溃烂开始结痂;吲哚美辛组上述表现较模型组也有改善。造模后及给药2、5 d时,模型组、吲哚美辛组、低剂量七叶莲组、高剂量七叶莲组大鼠的AI评分比较差异无统计学意义(P>0.05);给药8、10 d时,吲哚美辛组、低剂量七叶莲组、高剂量七叶莲组大鼠AI评分比较差异无统计学意义(P>0.05);给药8、10 d时,吲哚美辛组和高剂量七叶莲组大鼠AI评分显著低于模型组(P<0.05)。造模前,5组大鼠后足跖厚度比较差异无统计学意义(P>0.05);造模后及给药2 d时,模型组、吲哚美辛组、低剂量七叶莲组、高剂量七叶莲组大鼠后足跖厚度比较差异无统计学意义(P>0.05);给药5、8、10 d时,吲哚美辛组、低剂量七叶莲组、高剂量七叶莲组大鼠后足跖厚度比较差异无统计学意义(P>0.05);造模后及给药2、5、8、10 d时,模型组、吲哚美辛组、低剂量七叶莲组、高剂量七叶莲组大鼠后足跖厚度均显著大于正常对照组(P<0.05);给药5、8、10 d时,吲哚美辛组、高剂量七叶莲组大鼠后足跖厚度均显著低于模型组(P<0.05);给药8 d时,低剂量七叶莲组大鼠后足跖厚度显著低于模型组(P<0.05)。模型组大鼠血清中IL-4水平显著低于正常对照组(P<0.05);吲哚美辛组、低剂量七叶莲组、高剂量七叶莲组大鼠血清中IL-4水平显著高于模型组(P<0.05)。模型组、吲哚美辛组、低剂量七叶莲组大鼠血清中IL-10水平显著低于正常对照组(P<0.05);吲哚美辛组、高剂量七叶莲组大鼠血清中IL-10水平显著高于模型组和低剂量七叶莲组(P<0.05)。模型组大鼠血清中TNF-α水平显著高于正常对照组和高剂量七叶莲组(P<0.05)。结论 高剂量七叶莲可显著改善AA大鼠的关节炎病变程度和足肿胀度,作用机制可能与其调控血清中IL-4、IL-10、TNF-α水平有关。

预给七叶莲花醇提物对大鼠布比卡因毒性影响

目的探讨预先给予3种不同剂量七叶莲花醇提物对布比卡因(BPV)致大鼠中枢和心脏毒性反应的影响。方法 60只雄性10周龄SD大鼠随机均分为4组,所有大鼠禁食不禁水12 h后连续3 d进行灌胃处理,每天1次。对照组(D组)灌胃生理盐水,另外3组分别按大鼠每公斤体质量灌胃七叶莲花醇提物2 g(S1组)、4 g(S2组)和8 g(S3组),连续灌3 d后所有大鼠经股静脉泵注0.5%BPV 2 mg/(kg·min)。分别记录大鼠发生抽搐、室性心律失常和心跳停止时BPV的用量。并对各组大鼠出现抽搐时血气分析、心脏组织HE切片病理检查、qRT-PCR测定各组大鼠海马N-甲基-D天冬氨酸受体(NMDAR)1亚基与2B亚基表达水平变化情况等考察七叶莲花醇提物解救大鼠BPV中枢毒性的效果。结果 S1组、S2组和S3组大鼠出现抽搐、心律失常和心跳停止时,BPV用量大于D组,S2组、S3组的用量也大于S1组,差异均有统计学意义(P<0.05)。血气分析S1组、S2组和S3组大鼠抽搐时动脉二氧化碳分压均高于D组,且S3组与D组相比差异有统计学意义(P<0.05)。心脏组织HE切片病理检查D组大鼠可见炎细胞浸润,间质充血或出血明显,S1组、S2组、S3组大鼠间质炎细胞浸润较D组明显减轻,间质轻微充血或轻微出血。qRT-PCR测定的S1组、S2组、S3组NMDAR1和NMDAR2B,与D组相比表达水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论七叶莲花醇提物预先给药可减轻BPV所致大鼠中枢和心脏毒性反应。

七叶莲不同醇沉工艺评价

目的考察不同醇沉方式对七叶莲醇沉产物品质的影响。方法七叶莲水提液分别采用50%,60%,70%,80%4个浓度按计算量一次醇沉、分次醇沉、分级醇沉、多次醇沉4种不同工艺制备醇沉产物,采用聚类分析的方法对不同醇沉产物的品质进行综合评价。结果 16种样品以浓度为依据聚类,在各自浓度下醇沉工艺不同聚合距离不同。结论醇沉浓度对醇沉效果影响较大,醇沉工艺对醇沉效果有一定的影响。

大孔树脂纯化七叶莲总三萜工艺研究

目的:研究大孔树脂纯化七叶莲总三萜的工艺条件及参数。方法:采用紫外分光光度法测定七叶莲总三萜含量,选择3种大孔树脂,以总三萜吸附率和解吸率为指标,筛选适宜树脂类型,并对分离纯化工艺进行优化。结果:AB-8树脂对总三萜的吸附解吸效果最好。最佳纯化工艺条件:以自然p H条件下的样液上样,上样浓度为0.884mg/m L,最大上样量6BV,用8BV的80%乙醇进行洗脱。该工艺下产品的洗脱率达48.14%,纯化后总三萜的质量分数达45.98%。结论:AB-8大孔树脂分离纯化七叶莲总三萜工艺效果好,简单可行,可为工业化纯化七叶莲总三萜提供理论依据。

七叶莲对蟾蜍坐骨神经动作电位的影响

目的:观察七叶莲水煎液对蟾蜍离体坐骨神经复合动作电位的幅度及传导速度的影响,研究其对坐骨神经电生理特性的作用。方法:将制备的蟾蜍坐骨神经干分为4组,分别在任氏液和浓度为10%,20%,40%的七叶莲水煎液中浸泡,用MedLab生物信号采集处理系统引导神经干复合双相动作电位,并分别测定各组不同浸泡时间的坐骨神经干动作电位的幅度和传导速度两项电生理指标。记录不同浓度的七叶莲水煎液对蟾蜍离体坐骨神经复合动作电位的幅度和传导速度的影响。结果:10%,20%,40%3种浓度的七叶莲水煎液均使坐骨神经复合动作电位的幅度变小(P<0.01),传导速度变慢(P<0.01)并最终使坐骨神经动作电位消失,且经过一段时间后动作电位的幅度和传导速度均能恢复。结论:七叶莲能可逆地阻滞神经动作电位的传导。