南五味子果酒工艺优化及品质分析

以酒精度为指标,采用单因素试验和正交试验确定南五味子果酒最佳发酵工艺,并进行品质分析。结果表明,南五味子果酒最佳发酵工艺为发酵温度32℃,发酵时间8 d,初始糖度26%,菌种接种量1.2%。在此条件下发酵出来的南五味子果酒酒精度为8°,还原糖质量浓度为23 mg/mL,感官评价良好。

秦岭华中五味子种实性状变异与环境因子的关联研究

为解决华中五味子人工栽培模式下就地取材、无性扩繁出现品质下降、产量降低等问题,以华中五味子的种子和果实为研究对象,对其种子大小、果串长度、果串直径、果串质量等表观性状,和果实化学成分如果实多糖含量、五味子酯甲含量等进行测定,与环境因子进行相关性分析,研究华中五味子种源地种实特异性及表型变异规律。结果显示:(1)华中五味子种子和果实的表观性状均表现出较大变异性,种子大小、果串长度、果实质量等指标变异最大;而种子长宽比、果实果柄质量比变异较小。(2)华中五味子果实多糖含量以及木脂素含量均有较大变异,商洛地区果实样品中木脂素含量最高。(3)华中五味子种子和果实所测指标和环境因子之间有较高相关性,主要表现在种子活力值以及果串直径与海拔之间呈正相关关系。研究发现,华中五味子的果实和种子在秦岭南北两侧表型变异丰富,华中五味子存在明显的地理遗传分化,体现在与海拔、年均温和年均降水量显著相关,商洛市所产华中五味子果实有较高品质,以此推断商洛市的气候地理环境适宜华中五味子生长。

北五味子对糖尿病脑病大鼠脑中神经活性物质含量影响的在线微透析-高效液相色谱-串联质谱联用分析

采用在线微透析-高效液相色谱-串联质谱联用方法,测定了糖尿病脑病大鼠大脑海马区的8种脑递质的含量,从脑中神经活性物质的角度研究五味子改善学习记忆能力的作用机制.实验结果表明,经五味子治疗后,痴呆大鼠脑透析液中的谷氨酸(Glu)、丝氨酸(Ser)、多巴胺(DA)及5-羟色胺(5-HT)的含量显著降低(P<0.05),牛磺酸(Tau)及乙酰胆碱(Ach)的含量显著升高(P<0.01),天冬氨酸(Asp)和γ-氨基丁酸(GABA)的含量有降低趋势(P>0.05),8种神经活性物质的水平均向正常水平发生了调节.此结果说明五味子可能通过调节糖尿病大鼠大脑中神经活性物质的含量发挥保护中枢神经系统的作用,从而改善糖尿病脑病大鼠的学习记忆能力.Morris水迷宫实验结果表明,五味子水提物可以明显缩短糖尿病脑病大鼠的逃避潜伏期,增加穿越目标区域次数及中心区域(%)(P<0.05).

五味地龙汤对实验性哮喘豚鼠平喘机理的探讨

目的:探讨五味地龙汤的平喘作用及机制。方法:取豚鼠48只,随机分为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松组、五味地龙汤高、中、低剂量组,每组8只。以卵白蛋白(OVA)腹腔注射致敏、气道吸入激发建立哮喘动物模型。致敏15d后,ig,连续8d。颈动脉取血离心取血清,用豚鼠二羟酸白三烯(LTB4)ELISA试剂盒测定血清LTB4水平。并分类计数肺泡灌洗液(BALF)和血中总细胞数、嗜酸性粒细胞(Eos)和淋巴细胞(Ly)数。结果:BALF和血中Eos、Ly分类计数显示:五味地龙汤大剂量组、中剂量组、小剂量组与哮喘模型组比较,均有显著的降低(P<0.01)。血清LTB4分析显示:五味地龙汤大剂量组(11.9±1.5)ng.L-1、中剂量组(12.1±1.4)ng.L-1及小剂量组(12.3±0.8)ng.L-1与哮喘模型组(17.5±1.6)ng.L-1比较,有显著降低(P<0.01)。五味地龙汤高剂量组降低总细胞数及Eos、Ly数的作用优于低剂量组,组间比较,差异有显著性(P<0.01)。结论:五味地龙汤能减少Eos浸润,促进Eos凋亡,降低哮喘血清LTB4含量,从而具有抗气道炎症及气道重塑作用,与剂量呈正比例关系。

五味子对自由活动大鼠睡眠时相的影响

目的:观察五味子水煎液对自由活动大鼠睡眠时相的影响。方法:采用大鼠皮层脑电图描记技术,观察五味子水煎液对大鼠总睡眠时间及各睡眠时相的影响。结果:五味子水煎液能延长正常大鼠总睡眠时间(total sleep time,TST),在睡眠时相上表现为明显延长大鼠慢波睡眠Ⅱ期(slow wave sleep 2,SWS2),对慢波睡眠Ⅰ期(slow wave sleep 1,SWS1)和快波睡眠(fast wave sleep,FWS)无影响。结论:五味子水煎液具有改善睡眠的作用。

用人工智能计算技术估测东北地区北五味子果实资源量

五味子植物资源分布广泛,是名贵的地道药材。五味子的结实量、有效成分与地理环境关系密切。在东北选择了3个地区做为研究对象:长白山地区辽宁省新宾县;张广财岭苇河林业局;小兴安岭伊春桃山林业局;本文采用人工神经网络技术建立了五味子宏观结实量与地理环境关系的模拟与仿真模型,计算了五味子结实在有关区域上的分布和资源蕴藏量。研究结果表明:小兴安岭地区五味子结实量较高,是五味子较适宜生长地区。

五味子果醋的研制

以分离筛选的醋酸菌HAc-5为发酵菌种,发酵五味子干酒制备成五味子果醋。醋酸发酵于163h时达到峰值,总酸度为10.363g/100mL,醋酸的转化率为98.11%。制备成的五味子果醋色泽黄而微红,半透明,酸味醇厚丰满,微涩,具有五味子独特的药味香气,并可开发成具有保健功能性的果醋饮品。

HPLC测定五味子不同炮制品及不同部位有机酸含量

目的测定五味子不同炮制品及不同部位有机酸含量,探讨炮制对有机酸含量的影响。方法采用Ecosil C18-AQ色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-0.5%冰醋酸(15∶85)为流动相、流速0.8 mL/min、检测波长260 nm测定原儿茶酸的含量,以乙腈∶15 mmol/L磷酸二氢钾缓冲盐溶液=3∶97(磷酸调pH=3)为流动相、流速1.0 mL/min、检测波长210 nm测定柠檬酸的含量。结果生五味子、酒五味子、醋五味子中原儿茶酸和柠檬酸含量分别为0.009 8%、0.012 4%、0.012 1%和14.829 3%、14.169 4%、14.365 0%;果肉、种仁中原儿茶酸和柠檬酸含量分别为0.012 3%、0.009 0%和22.881 0%、3.899 0%。结论五味子炮制后原儿茶酸含量明显增加,柠檬酸含量变化不大,有下降趋势。果肉中2种有机酸含量均高于种仁。

五味地龙汤的止咳作用研究

目的:探讨五味地龙汤水煎液的止咳作用。方法:用小鼠氨水引咳法、豚鼠枸橼酸引咳法及电刺激豚鼠引咳法进行实验。结果:五味地龙汤水煎液对氨水所致小鼠咳嗽及枸橼酸所致豚鼠咳嗽均有显著的止咳作用(P<0.01);对电刺激豚鼠所致咳嗽有显著的抑制作用(P<0.01)。结论:五味地龙汤水煎液有显著的止咳作用。

五味子药材HPLC指纹图谱的研究

采用HPLC/UV测定五味子药材甲醇提取液的指纹图谱,并对不同产地的五味子的指纹图谱进行比较。色谱条件:ODS色谱柱,甲醇-水线性梯度洗脱,流速1.30 mL.min-1,检测波长220 nm,柱温30℃。结果发现指纹图谱中有22个色谱峰为共有峰,根据其相对保留时间和紫外光谱,确定五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲6个成分,并计算了13个样品间相似度。研究证实五味子指纹图谱可用于全面控制五味子药材的质量。

五味地龙汤对哮喘豚鼠血清白细胞介素-4的影响

目的:观察五味地龙汤对哮喘血清白细胞介素-4(IL-4)水平的影响,以探讨其治疗机制。方法:取豚鼠48只,随机分为正常对照组,哮喘模型组,地塞米松组,小青龙汤组,五味地龙汤大、小剂量组,每组8只。卵白蛋白(OVA)腹腔注射致敏,气道吸入激发建立哮喘动物模型。按豚鼠IL-4 ELISA试剂盒说明,采用双抗夹心ELISA法,测定血清IL-4含量。结果:哮喘模型组豚鼠OVA致敏并激发后出现活动减少,反应迟钝,毛色失去光泽,呼吸次数增加,呼吸困难。IL-4测定结果显示,五味地龙汤大剂量组豚鼠血清IL-4浓度为(9.27±0.86)pg·ml-1,五味地龙汤小剂量组血清IL-4浓度为(10.77±1.17)pg·ml-1,地塞米松组血清IL-4含量(9.40±2.91)pg·ml-1,与哮喘模型组(13.37±1.86)pg·ml-1比较,差异均有显著性(P<0.01)。小青龙汤组血清IL-4含量为(10.94±1.30)pg·ml-1,与哮喘模型组比较,差异亦有显著性(P<0.05)。各药物组与正常对照组(10.45±0.62)pg·ml-1比较,均无统计学意义(P>0.05)。结论:五味地龙汤能降低哮喘动物血清IL-4含量。这可能是五味地龙汤能抑制炎症介质的释放、治疗气道炎症的机制之一。

现代质谱及其联用技术在中药五味子研究中的应用

本文对质谱及其联用技术(气相色谱-质谱,液相色谱-质谱,毛细管电泳-质谱等)在北五味子及南五味子中木脂素、挥发油、有机酸及三萜类等化学成分研究中的应用进行了综述,总结了其发展潜力。为中药化学成分的快速筛选、药材品种鉴定及质量控制方法等提供了一定的基础。

五味子对鲍曼不动杆菌体外杀菌和抑菌作用的研究

目的研究中药五味子对头孢哌酮-舒巴坦耐药和非耐药的鲍曼不动杆菌的杀菌和抑菌作用。方法制备五味子浸液,采用等倍稀释法进行体外抑菌和杀菌试验,分别测定五味子药液对头孢哌酮-舒巴坦耐药和非耐药的鲍曼不动杆菌最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。结果五味子对头孢哌酮-舒巴坦耐药和非耐药的鲍曼不动杆菌的MIC50分别为15.6和7.8 mg/mL,在此药物浓度处,对头孢哌酮-舒巴坦非耐药的鲍曼不动杆菌的抑菌率均高于耐药的菌株(χ2=4.26、3.98,P均<0.05);当药物浓度达到31.3 mg/mL时对二者的抑菌率均为100%;五味子对头孢哌酮-舒巴坦耐药和非耐药的鲍曼不动杆菌的MBC50均为31.3 mg/mL,杀菌率差异无统计学意义(χ2=0.74,P>0.05)。结论五味子在体外对头孢哌酮-舒巴坦耐药和非耐药的鲍曼不动杆菌均有一定的杀菌和抑菌作用,对头孢哌酮-舒巴坦耐药的菌株MIC略高,可尝试用于临床鲍曼不动杆菌感染的治疗。

复合酶法提取五味子果肉中总酚的工艺研究

【目的】采用复合酶辅助法提取五味子果肉中的总酚类物质,为五味子的综合利用提供参考。【方法】以五味子果肉为原料,从9种生物酶中优选出果胶酶、纤维素酶、中性蛋白酶和漆酶4种酶,在单因素(酶解时间、酶解温度、酶解pH、酶添加量)试验基础上,采用正交试验及方差分析确定复合酶法提取五味子果肉总酚的最佳条件。【结果】单因素试验结果显示,随着酶解时间和pH的增加,4种酶处理五味子果肉总酚提取率总体呈先上升后下降的趋势。随着酶解温度和酶添加量的增加,果胶酶、纤维素酶、中性蛋白酶处理五味子果肉总酚提取率呈先上升后下降趋势,而漆酶处理总酚提取率与以上三者不同。通过正交试验,得到五味子果肉总酚提取的最佳条件为添加1.0%果胶酶、3.0%纤维素酶、3.0%中性蛋白酶、5.0%漆酶(以上均为质量分数),pH 5.0,酶解时间20min,温度30℃,在此条件下五味子果肉总酚的提取率为2.83%,高于单酶处理总酚提取率,是无酶工艺(1.19%)的2.38倍。【结论】得到的复合酶辅助提取法能够明显提高五味子果肉总酚提取率,且工艺简单,可用于规模化生产。

HPLC法测定五味子果梗中6种木脂素

目的通过HPLC法测定五味子Schisandra chinensis(Turcz.)Baill.果梗中五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素的含有量。方法果梗甲醇提取液的分析采用Agilent TC-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相甲醇-乙腈-水,梯度洗脱;检测波长220 nm;柱温35℃;体积流量0.9 m L/min。结果 6种木脂素在各自范围内均呈良好的线性关系,平均加样回收率98.61%~99.92%,RSD 0.12%~1.68%。五味子醇甲在67批样品中平均含有量最高,而五味子酯甲最低。栽培样品中五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素含有量均高于野生样品,而五味子酯甲、五味子乙素、五味子丙素含有量恰好相反。小兴安岭样品中各成分含有量最高,长白山次之,辽宁省东部山区最低。结论五味子果梗中的五味子丙素具有一定药用价值,应加以关注。

适合果实类中药的DNA条形码鉴定方法研究

目的：探索适合果实类中药的通用DNA条形码鉴定方法。方法：以南五味子、五味子药材为实验材料,筛选最佳DNA提取方法和提取部位,选择ITS2片断进行PCR扩增后测序,所得序列用MEGA 5.10软件分析比对,计算遗传距离（K2P）,利用Neighbour-joining tree（NJ树）法和Blast法进行序列比对,构建系统聚类树;并用木瓜等8种常用果实类中药验证方法的可行性和有效性。结果：适合果实类中药的通用DNA条形码鉴定方法是：采用试剂盒法（离心柱型）提取种仁部位DNA,以ITS2片段为DNA条形码序列进行PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳检测及测序后,录入＂中药材DNA条形码鉴定系统＂进行物种鉴定。结论：该方法可有效应用于果实类药材的鉴定。

北五味子的果实解剖研究

采用不同花期的子房与花谢后的果实解剖制片为材料,综合研究结果,明确北五味子的雌花,其离生心皮雌蕊群呈螺旋状着生在圆顶状的花托上。每一个单雌蕊均由鸡冠状柱头与下面膨大的子房构成。花柱缺如。子房有自背缝线上发生的假隔膜隔开,致将子房形成假二室;胚珠倒生乃至弯生,亚边缘胎座(submarginal placenta),受精后发育成旋生聚合浆果(spiral-baccacetum),内含种子1-3(2)枚。种子属双子叶有胚乳种子,胚甚小,约为种子的1/50。

基于硫酸-苯酚法的可溶性糖高通量测定方法及其应用

目的基于硫酸-苯酚法建立一种测定可溶性糖含量的高通量方法,并应用于五味子、枸杞子和梨的可溶性糖含量测定。方法以硫酸-苯酚比色法为基础,在微孔板中进行反应和测定,对苯酚加入顺序、反应温度、浓硫酸用量和苯酚浓度进行考察和优化。以五味子、枸杞子和梨为研究对象,进行方法学考察,并与传统苯酚-硫酸法的含量测定结果进行比较。结果先加入浓硫酸后加入苯酚的反应顺序能获得较高吸光度值,葡萄糖-果糖标准曲线在1.515~30.285μg/孔范围内线性关系良好,方法的精密度、重复性和稳定性较好,测定五味子、枸杞子、梨样品中葡萄糖-果糖的加样回收率分别为98.34%、103.88%、101.26%,相对标准偏差均小于5%。结论本研究方法与传统方法相比操作简单、试剂用量小、线性范围广,可以用作植物样品中可溶性糖的高通量测定。

五味子果酒酿造工艺研究

以五味子烘干果实为原料,研究了酵母接种量、初始糖度、发酵温度、SO2添加量、初始pH对五味子果酒酿造工艺的影响。并以感官评定分数为标准设计进行了优化实验。结果表明其发酵的最佳条件为:接种量为0.6%,初始糖度为20%,发酵温度为27℃,SO2添加量为40mg/L。

五味子优良品种优选的模式识别方法

通过超高效液相色谱法,对不同生长特征的五味子样品中5种主要的木脂素成分:五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子甲素和五味子乙素进行测定,同时考察其抗氧化活性。对所得到的5种木脂素成分的含量及抗氧化数据进行聚类分析和主成分分析,并且通过逐步判别分析建立判别函数,从而筛选五味子优良品种。主成分分析和聚类结果基本一致,均将样品分为3大类,逐步判别分析的正确率高达90%。