蒿甲醚预防血吸虫感染的实验研究

为了观察蒿甲醚预防血吸虫感染的作用，小鼠、兔和犬于感染血吸虫尾蚴后不同时间灌服（ｉｇ）蒿甲醚（Ａｒｔ），并根据总减虫率和减雌虫率评价预防效果。结果，小鼠于感染后ｄ７开始ｉｇ１剂Ａｒｔ，然后每ｗｋ重复给药１次，共４次的效果最好。兔与犬于感染后ｄ７ｉｇＡｒｔ１０或１５ｍｇ／ｋｇ，然后每１－２ｗｋ重复给药１次，共２－４次，总减虫率和减雌虫率为９６．８％－１００％，部份或全部受治动物无雌虫，一些与急性血吸虫病有关的指标，如体温、嗜酸性粒细胞数和粪便虫卵等均无异常或阴性。兔每隔天感染血吸虫尾蚴４８－５２条，共５次，并于第１次感染后ｄ７开始，用Ａｒｔ１５ｍｇ／ｋｇ，按上述给药方案预防，总减虫率和减雌虫率为９７．６％－９８．４％。上述感染犬和多次感染的兔用Ａｒｔ预防后，肝组织结构正常，虫卵肉芽肿数亦明显减少。结果认为，Ａｒｔ具有预防血吸虫感染的作用，可明显减低血吸虫感染率、减轻感染度和防止急性血吸虫病。

棉子酚、吡喹酮、蒿甲醚对重组日本血吸虫乳酸脱氢酶的作用

目的检测棉子酚、吡喹酮、蒿甲醚对重组日本血吸虫乳酸脱氢酶(rSjLDH)活性的影响。方法在已建立的rSjLDH标准酶活性测定体系中分别加入不同浓度的棉子酚(0～0.10mmol/L)、吡喹酮(0～0.20mmol/L)及蒿甲醚(0～0.10mmol/L),以相应药物溶剂作对照,分光光度法测定药物对rSjLDH活性的影响。用SPSS13.0软件统计结果,计算药物对酶活性的相对抑制率。结果与对照组比较,0.04mmol/L棉子酚对rSjLDH催化丙酮酸还原为乳酸及乳酸氧化为丙酮酸的相对抑制率分别为59.1%和34.4%(P<0.01),0.10mmol/L棉子酚分别为91.3%和89.1%(P<0.01);0.06mmol/L吡喹酮分别为5.77%和41.4%(P<0.05),0.20mmol/L吡喹酮分别为83.8%和72.2%(P<0.01)。0.10mmol/L蒿甲醚对rSjLDH则无抑制作用(P>0.05)。结论棉子酚及吡喹酮对rSjLDH活性均有显著的抑制作用,SjLDH可能是吡喹酮的分子靶标之一。

蒿甲醚早期治疗小鼠血吸虫病的疗效(英文)

蒿甲醚（Ａｒｔ）系青蒿素的衍生物，不仅有抗疟作用，还有抗血吸虫（特别是ｄ７童虫）作用。本文应用Ａｒｔ的早期治疗方案，观察其控制血吸虫感染的可能性。结果表明小鼠于感染日本血吸虫尾蚴当天（ｄｏ）ｉｇＡｒｔ３００ｍｇ．ｋｇ－１，然后每隔２－３ｗｋｉｇ１次相同剂量的Ａｒｔ时，减虫率和减雌虫率均低。若于感染后ｄ７开始ｉｇ首剂Ａｒｔ，然后每ｗｋｉｇ１次，共给４次时，可使宿主体内的雌虫减少近９０％或９０％以上，且部分鼠的雌虫被完全消灭，肝脏亦无明显变化。此外，ｄ７童虫经Ａｒｔ３００ｍｇ·ｋｇ－１作用后，残留的雌虫发育缓慢，治后３ｗｋ（即感染后２８ｄ），大部分雌虫的生殖腺尚未发育成熟，少数虽已发育，但其子宫内的虫卵数较对照组的减少９１．７％。表明Ａｒｔ用于感染血吸虫尾蚴后早期治疗，可起到保护宿主的作用，不仅可控制血吸虫感染，而且还可减轻感染度。

兔重复感染血吸虫尾蚴的蒿甲醚和吡喹酮早期治疗

兔感染日本血吸虫尾蚴４８－５２条，每ｗｋ１次，共６次，并于第１次感染后ｄ７ｉｇ１次蒿甲醚（Ａｒｔ）１０ｍｇ．ｋｇ－１，然后每１或２ｗｋ重复ｉｇ１次相同剂量的Ａｒｔ，连给８或４次时，减♀虫率各为９７．８％和８８．９％；上述兔于第１次感染后ｄ２１ｉｎｌ次吡喹酮（Ｐｒａ）４０ｍｇ．ｋｇ－１，然后每１或２ｗｋ重复ｉｇ１次相同剂量的Ｐｒａ，连给７或４次的♀虫率减少率均为１００％。兔每隔１ｄ感染１次血吸虫尾锄４８－５２条，共５次，并于第１次感染后ｄ７ｉｇ１次Ａｒｔ１０ｍｇ．ｋｇ－１，然后每ｗｋ重复给药１次，连给５次的减♀虫率为９５．１％，但受治的４只兔仍残留♀虫，而每２ｗｋ重复给药１次，连给３次的减♀虫率为７８．２％。将每次ｉｇ的Ａｒｔ剂量增至１５ｍｇ．ｋｇ－１，则每ｗｋ给药组的６兔中，４兔无♀虫，减♀虫率为９８．４％，每２ｗｋ给药１次的５兔中，２兔无♀虫，减丰虫率为９７．６％。上述兔于第１次感染后ｄ２１ｉｇ１次Ｐｒａ４０ｍｇ·ｋｇ－１，然后每１或２ｗｋ重复ｉｇ１次相同剂量的Ｐｒａ，连给３或２次的减♀虫率各为９９．１％和９８．２％。在各组受治的５兔中，各有４及１兔无♀虫。将每次ｉｇＰｒａ的剂量减至３０ｍｇ．ｋｇ－１，则?

蒿甲醚对日本血吸虫超微结构的影响(英文)

目的：了解蒿甲醚对日本血吸虫超微结构的影响。方法：小鼠于感染日本血吸虫尾蚴后７或３５ｄ灌服蒿甲醚２００ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１，连给２ｄ，并于治后１、３、７、１４和２８ｄ剖检取虫体作透射电镜观察。结果：治后１－７ｄ，在虫的皮层、合体细胞、肌束、实质组织、肠管上皮细胞和卵黄细胞等均发现超微结构变化。主要的损害为皮层基质模糊、疏松、溶解和空泡形成；皮层细胞质突起的外质膜模糊、融合、电子密度增加和破溃，以及感觉结构的变性等。皮层下的肌束、合体细胞和肠管上皮细胞可查见广泛的肿胀、溶解和空泡形成。雌虫的卵黄细胞亦示有核空泡变化、粗面内质网减少和卵黄球溶解等。治后１４－２８ｄ，一些存活虫的超微结构变化已恢复，但有的虫仍示有损害。结论：蒿甲醚对７ｄ童虫和３５ｄ成虫的超微结构均有明显影响。

蒿甲醚与吡喹酮联合治疗急性日本血吸虫病临床研究

目的用蒿甲醚与吡喹酮联合治疗急性日本血吸虫病,评估联合用药的临床疗效和安全性。方法96例急性日本血吸虫病人完全随机分为2组,治疗组45例口服蒿甲醚6mg/kg加吡喹酮120mg/kg联合治疗,对照组51例口服安慰剂加吡喹酮120mg/kg。比较两组治愈率、治后21、45天粪便虫卵阴转率及减卵率、用药后不良反应发生率。试验采用双盲法。结果治疗组与对照组治愈率分别为97.7%和95.7%,治后45天粪便减卵率分别为99.1%和97.7%,治疗后平均发热天数分别为5.1d和4.5d,平均住院天数分别为9.4d和8.9d,差异均无显著性(P均>0.05)。治疗组2例病人口服蒿甲醚后腹部和背部出现荨麻疹,对症处理后症状消失;1例出现呕吐。结论蒿甲醚与吡喹酮联合治疗急性血吸虫病安全,无明显不良反应,治疗效果与单用吡喹酮无明显差异。

蒿甲醚、吡喹酮早期治疗感染血吸虫病病兔的肝脏病理变化

兔于感染日本血吸虫尾蚴后ｄ７灌服（ｉｇ）１次蒿甲醚（Ａｒｔ）３０ｍｇ·ｋｇ－１，并于感染后ｄ１４、ｄ２１、ｄ３５和ｄ４９重复ｉｇ１次相同剂量的Ａｒｔ时，在兔肝的切片中仅查见死虫，未见有虫卵或和虫卵性肉芽肿形成。若于感染后ｄ７、ｄ２１、ｄ３５和ｄ４９ｉｇ上述剂量的Ａｒｔ１次时，肝内偶而查见少量虫卵和虫卵性肉芽肿。若于感染后ｄ２１ｉｇ１次吡喹酮（Ｐｒａ）４０ｍｇ·ｋｇ－１，然后每ｗｋ（ｄ２８和ｄ３５）或每２ｗｋ（ｄ３５和ｄ４９）重复ｉｇ１次相同剂量的Ｐｒａ时，前者肝切片查见的虫卵数和虫卵肉芽肿远较对照组的为少，但较后者为多，后者所查见的为陈旧性虫卵或虫卵性芽肿。结果表明兔于感染血吸虫尾蚴后，用Ａｒｔ或Ｐｒａ早期治疗，因大部分或甚至全部♀虫被杀死，肝脏受虫卵损害轻微或无明显损害。

3种青蒿素衍生物对日本血吸虫吡喹酮抗性株童虫的体内作用效果观察

目的：观察3种青蒿素衍生物双氢青蒿素、青蒿琥酯和蒿甲醚对日本血吸虫吡喹酮抗性株童虫的体内作用效果。方法以经11轮亚治疗剂量吡喹酮筛选的日本血吸虫为吡喹酮抗性株，以未暴露于吡喹酮的日本血吸虫作为吡喹酮敏感株，收集2虫株尾蚴感染小鼠，以300 mg/kg双氢青蒿素、青蒿琥酯和蒿甲醚对感染后7-8 d童虫分别进行2次灌服用药（总剂量600 mg/kg），所有小鼠于感染后45 d解剖，收集小鼠体内成虫并计数，计算减虫率和减雌率。结果300 mg/kg双氢青蒿素、蒿甲醚和青蒿琥酯2日疗法（总剂量600 mg/kg）对日本血吸虫吡喹酮敏感株7-8 d童虫的减虫率为69.8%-71.0%，减雌率为75.4%-79.8%；对日本血吸虫吡喹酮抗性株7-8 d童虫的减虫率为64.6%-66.1%，减雌率为69.3%-71.1%，差异均无统计学意义（均P〉0.05）。结论日本血吸虫吡喹酮抗性株对青蒿素类衍生物双氢青蒿素、青蒿琥酯和蒿甲醚依然敏感，青蒿素衍生物与吡喹酮在日本血吸虫中不存在交叉抗药性。

用蒿甲醚和吡喹酮早期治疗兔的血吸虫感染(英文)

兔于感染血吸虫尾蚴后d 7或d 21分别开始ig 1次蒿甲醚(Art)10mg·kg^(-1)和吡喹酮(Pra)40mg·kg^(-1),然后每隔1wk ig 1次相同剂量的Art或Pra连给3—4次,减♀虫率达98％以上,且部分兔无♀虫,上述兔经Art或Pra早期治疗后,其肝脏与正常兔相仿,或仅有轻度变化,一些与急性血吸虫病有关的指标测定亦为阴性。

吡喹酮治疗后日本血吸虫感染小鼠滤泡辅助性T细胞及其表面分子的研究

目的观察日本血吸虫(Schistosoma japonicum)感染小鼠肝脏、脾脏的病变情况及经吡喹酮治疗后小鼠外周血及脾脏中滤泡辅助性T细胞(Tfh)及其表面分子的变化。方法将15只6~8周龄C57BL/6雌性小鼠随机分为吡喹酮治疗感染组(治疗组)、未治疗感染组(未治疗组)和未感染组,每组5只。治疗组和未治疗组每只小鼠经腹部皮肤感染日本血吸虫尾蚴20条;治疗组小鼠于感染后6周给予200 mg/(kg·d)吡喹酮灌胃治疗,连续3 d;未感染组和未治疗组不治疗。于治疗后4周解剖各组小鼠,观察小鼠肝脏和脾脏病变情况,计算减虫率和肝脏减卵率。采用流式细胞术检测各组小鼠外周血和脾脏Tfh占CD4^+T细胞的比例,检测其表面分子可诱导T细胞共刺激分子(ICOS)和程序性死亡受体1(PD-1)的表达情况。采用ELISA检测小鼠血清中可溶性虫卵抗原(SEA)特异性IgG抗体水平。结果与未治疗组比较,治疗组小鼠的肝脏和脾脏病变明显较轻,减虫率和肝脏减卵率分别为84.1%和69.1%(P<0.01)。治疗组、未治疗组和未感染组外周血和脾脏Tfh细胞的比例分别是14.7%~18.0%和15.6%~25.0%、13.7%~16.7%和12.4%~18.2%、2.5%~6.8%和4.9%~8.0%,治疗组和未治疗组明显高于未感染组(P<0.01),治疗组和未治疗组差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组、未治疗组和未感染组外周血和脾脏中ICOS的表达水平分别为0.7%~1.1%和1.8%~6.8%、1.3%~3.2%和4.1%~7.0%、0.2%~0.3%和0.5%~0.8%,未治疗组高于治疗组和未感染组(P<0.01);治疗组脾脏ICOS的表达水平明显高于未感染组(P<0.01),而外周血的表达水平与未感染组差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组、未治疗组和未感染组外周血和脾脏中Tfh细胞PD-1水平分别为0.5%~1.5%和4.5%~8.9%、0.8%~1.9%和4.1%~10.7%、0.4%~0.8%和1.2%~1.8%,未治疗组明显高于未感染组(P<0.01),治疗组与未治疗组差异无统计学意义(P>0.05)。吡喹酮治疗后4周,治疗组、未治疗组和未感染组的SEA特异性IgG水平(A450值)分别为2.015±0.061、1.969±0.038和0.139±0.128,治疗组与未治疗组差异无统计学意义(P>0.05)。结论吡喹酮治疗后,日本血吸虫感染小鼠肝脏、脾脏组织病变明显减轻,外周血和脾脏Tfh细胞ICOS的表达比未治疗组显著降低。

蒿甲醚或吡喹酮早期治疗感染血吸虫尾蚴兔和犬的肝脏显微镜检查(英文)

目的:观察感染血吸虫尾蚴后早期用蒿甲醚(Art)或吡喹酮(Pra)治疗,对宿主肝组织的影响。方法:犬感染198-202条尾蚴后d7ig Art 10 mg·kg^(-1),Art胶囊(ArtC)15mg·kg^(-1)或感染后d 21ig Pra 30-40 mg·kg^(-1),1—2 wk重复给药1次,共2—4次;兔每隔日感染48—52条尾蚴,共5次,并于第1次感染后d7或d 21 ig上述剂量的Art和Pra,停药后4—5wk剖杀取肝作切片观察。结果:犬与兔经Art或Pra早期治疗后,减♀虫率达92.1％—100％,肝切片中的总虫卵肉芽肿数分别减少70.9％—97.3％和76.5％—97.4％,肝叶结构和肝索排列正常。结论:2种药物早期治疗对宿主肝脏有保护作用。

小鼠日本血吸虫感染及吡喹酮治疗过程中全转录组及关键基因调控网络分析

目的 利用全转录组测序技术研究日本血吸虫感染及吡喹酮治疗过程中长链非编码RNA(lncRNA)-微小RNA(miRNA)-信使RNA(m RNA)的交互作用,分析其中发挥调控作用的关键基因网络。方法 110只C57BL/6小鼠随机分为对照组、感染组和治疗组,感染组和治疗组以腹部贴片法感染日本血吸虫尾蚴后,第3、6、8周分别取10只小鼠肝脏组织;治疗组在第8周后开始吡喹酮治疗,治疗后第2、4、6、8、10周分别取10只小鼠肝脏组织。所有肝脏样本提取总RNA并构建转录组文库,进行全转录组高通量测序,对显著变化的差异表达基因进行功能注释、基因本体(GO)功能富集分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。应用R语言中Corrplot包和Himsc包对肝脏标本进行相关性分析,利用R语言中的MixOmics包和Himsc包对lncRNA-miRNA-mRNA进行多组学交互网络分析。结果 感染组与对照组间共有差异表达miRNA基因1 176个、差异表达m RNA基因5 270个、差异表达lncRNA基因2 682个;治疗组与感染组间共有差异表达miRNA基因1 289个、差异表达mRNA基因7个、差异表达lncRNA基因69个;治疗组与对照组间共有差异表达miRNA基因1 210个、差异表达mRNA基因4 456个、差异表达lncRNA基因2 016个。相关性分析显示,治疗组与对照组基因表达相关性更高。主成分分析显示,感染组与治疗组出现了明显分别聚类。具有显著相关性的基因主要富集在花生四烯酸代谢、异生分解代谢、不饱和脂肪酸代谢、异生代谢、长链脂肪酸代谢等个条目和胆固醇代谢、酪氨酸代谢、亚油酸代谢、雷丁醇代谢、类固醇激素生物代谢等8条KEGG代谢途径。结论 Cyp2b9等23个mRNA和Rmrpr等14个lncRNA处于基因调控网络核心位置,可能在血吸虫感染及吡喹酮治疗过程中发挥关键调控作用;miR-8105等9个miRNA具有作为血吸虫感染诊断分子标志物的潜力。