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Immunization of mice with cells from juvenile worms of Schistosoma japonicum provides immunoprotection against schistosomiasis 被引量:6
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作者 ZENG TieBing1,2, CAI LiTing1, ZENG QingRen1, YANG ShengHui1, YU Rong1, LI YanQin1, FANG HuiLong1, LI BenWen3 & ZHANG ShunKe1 1 Cell & Molecular Biological Experiment Center and Department of Parasitology, Xiangya School of Medicine, Central South Uni- versity, Changsha 410013, China 2 Institute of Pathogenic Biology, Medical College, Nanhua University, Hengyang 420001, China 3 Infectious Diseases Division, Washington University School of Medicine, Washington 63110, USA 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2007年第6期822-830,共9页
To validate the protective efficacy against schistosomiasis by immunization with cells from juvenile Schistosoma japonicum in a murine model; to analyze possible factors related to protection, in this study, two indep... To validate the protective efficacy against schistosomiasis by immunization with cells from juvenile Schistosoma japonicum in a murine model; to analyze possible factors related to protection, in this study, two independent repeated vaccination trials were performed. After three subcutaneous vaccinations, in trial one, in the absence of adjuvant, primary juvenile worm cells (pJCs) from S. japonicum induced remarkable average reductions in worm burden (54.3%), liver eggs per gram (LEPG) load (59.8%) as well as egg granulomas size (66.5%) compared to PBS control group (P【0.01), which were significantly higher than those elicited by fractions of juvenile worm cells (JCFs) or fractions of juvenile worms (JWFs) (P【0.05). Non-cell components of worms (WNCs) showed no significant protection. In trial two, compared to PBS control group, significant protective effect was also observed for cultured juvenile worm cells (cJCs) from S. japonicum with 58.4% worm reduction; 68.1% LEPG reduction (P【0.01). However, cultured adult worms cells (cACs) showed significantly higher worm burden (P【0.05); egg burden (P【0.01) when compared to cJCs. Immunological analysis of trial two revealed that cJCs engendered a Th1-biased mixed Th1/Th2 type of immune response while cACs elicited a Th2-type response. Our data indicated that immunization with both primary; cultured cells from S. japonicum juvenile worms provided high immunoprotection, for which the physical character of immunogens, stage-specific parasite; the type of immune response induced might be responsible, suggesting that vaccination with whole cells from S. japonicum larvae is a promising approach to produce protective immunity against schistosomiasis. 展开更多
关键词 schistosoma japonicum JUVENILE worm cell cultured cell immunoprotection immune response
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日本血吸虫成虫细胞培养条件的初步研究 被引量:16
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作者 董惠芬 蒋明森 +2 位作者 李瑛 倪永晖 陈静卿 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 1995年第5期257-261,共5页
本文报道日本血吸虫成虫细胞培养条件的初步研究.结果表明:日本血吸虫的成虫细胞,在合成培养基RPMI-1640和5%的小牛血清、台成培养基TC-199和10%或20%的小牛血清培养液中,在附加常量抗菌素、pH值为7.2—7.4、培养温度为36℃一37℃条件下... 本文报道日本血吸虫成虫细胞培养条件的初步研究.结果表明:日本血吸虫的成虫细胞,在合成培养基RPMI-1640和5%的小牛血清、台成培养基TC-199和10%或20%的小牛血清培养液中,在附加常量抗菌素、pH值为7.2—7.4、培养温度为36℃一37℃条件下,其存活时间均可超过150d.另外,成虫细胞在未加抗菌素或附加一定量(常量或两倍于常量)抗菌素的培养液中的存活天数,没有明显差别. 展开更多
关键词 日本血吸虫成虫 细胞培养 培养条件
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日本血吸虫成虫培养细胞的超微结构观察 被引量:14
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作者 董惠芬 蒋明森 +3 位作者 杨明义 李瑛 钟沁萍 周述龙 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 1999年第1期1-7,共7页
报告日本血吸虫成虫培养细胞的超微结构。在透射电镜下日本血吸虫成虫培养细胞呈多角形、圆颗粒形、三角扇形和鞭毛形等多种形状 ,其中以多角形为主。细胞表面光滑 ,或有乳头状突起、微绒毛和微饮泡等。胞质内有不同数量的线粒体、内质... 报告日本血吸虫成虫培养细胞的超微结构。在透射电镜下日本血吸虫成虫培养细胞呈多角形、圆颗粒形、三角扇形和鞭毛形等多种形状 ,其中以多角形为主。细胞表面光滑 ,或有乳头状突起、微绒毛和微饮泡等。胞质内有不同数量的线粒体、内质网、核糖体和糖原颗粒等分布 ,高尔基复合体很少或无 ;其中线粒体超微结构的变化可以作为评判培养条件优劣的一个指标。核常呈圆形 ,核膜为一单位膜 ,核孔清晰 ;核内具较丰富的异染色质 ,核膜内缘常有块状异染色质分布 ;核仁圆形。不同来源的细胞具不同的内部特征 ,生殖细胞内核质比例较高 ,胞质内具许多大小不等的囊泡和不同类型的皮质颗粒 ;卵黄细胞的典型特征是胞质中存在由高电子密度颗粒组成的卵黄球、卵黄滴 ;焰细胞的胞质中具纤毛束 ;神经细胞内具丰富的圆形或椭圆形突触小泡。可识别来源的这些培养细胞中卵黄细胞的数量最多 ,神经细胞的数量最少。 展开更多
关键词 日本血吸虫 成虫 培养细胞 超微结构
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日本血吸虫成虫体外传代培养细胞的生物学鉴定 被引量:11
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作者 刘伟 曾铁兵 +6 位作者 曾庆仁 蔡春 张祖萍 龚燕飞 蔡力汀 张顺科 徐锡萍 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期395-397,共3页
本研究结果显示:血吸虫成虫细胞在体外培养中呈半悬浮聚集生长状态,4代内的培养细胞及冻存复苏细胞存活率达90%,并在各代培养中均可见细胞分裂相;传5代细胞的染色体核型为8对16条。超微结构既观察到形态正常细胞,也可见形态异常细胞。表... 本研究结果显示:血吸虫成虫细胞在体外培养中呈半悬浮聚集生长状态,4代内的培养细胞及冻存复苏细胞存活率达90%,并在各代培养中均可见细胞分裂相;传5代细胞的染色体核型为8对16条。超微结构既观察到形态正常细胞,也可见形态异常细胞。表明1640-40特定培养基对血吸虫成虫中的部分细胞体外传代培养获得成功。 展开更多
关键词 日本血吸虫 成虫 细胞 传代培养 超微结构 染色体核型
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日本血吸虫成虫培养液中氨基酸及葡萄糖含量的动态变化 被引量:6
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作者 范虹 董惠芬 +2 位作者 蒋明森 钟沁萍 明珍平 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期45-47,共3页
目的 观察培养过程中日本血吸虫成虫细胞培养液中氨基酸 (AA)、葡萄糖 (Gluc)及甘油三酯 (TG)含量的动态变化。方法 用氨基酸自动分析仪、自动生化分析仪分别测定培养液在培养 0~ 6d过程中AA、Gluc及TG含量变化。结果 精氨酸 (Arg)... 目的 观察培养过程中日本血吸虫成虫细胞培养液中氨基酸 (AA)、葡萄糖 (Gluc)及甘油三酯 (TG)含量的动态变化。方法 用氨基酸自动分析仪、自动生化分析仪分别测定培养液在培养 0~ 6d过程中AA、Gluc及TG含量变化。结果 精氨酸 (Arg)、苏氨酸 (Thr)、蛋氨酸 (Met)、赖氨酸 (Lys)及Gluc含量有不同程度下降 ;天门冬氨酸 (Asp)、丙氨酸 (Ala)及游离氨 (Amm)有明显上升 ;TG变化不明显。结论 在日本血吸虫成虫细胞培养液中适当增加Arg、Thr、Met、Lys和Gluc ,同时减少Asp和Ala的含量 。 展开更多
关键词 日本血吸虫 成虫 细胞培养 氨基酸 葡萄糖 甘油三酯
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日本血吸虫成虫培养细胞糖细胞化学的研究 被引量:5
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作者 刘昌军 董惠芬 +2 位作者 蒋明森 钟沁萍 朱俊勇 《武汉大学学报(医学版)》 CAS 2002年第3期202-204,共3页
目的 :研究日本血吸虫成虫培养细胞内的糖类物质。方法 :将 32d虫龄的日本血吸虫成虫制成细胞悬液 ,接种在小盖玻片上 ,置含 2 0 %小牛血清附加常量抗生素的RPMI 16 4 0培养基中培养 ;至培养第 6d ,用高碘酸雪夫 (PAS)法显示培养细胞中... 目的 :研究日本血吸虫成虫培养细胞内的糖类物质。方法 :将 32d虫龄的日本血吸虫成虫制成细胞悬液 ,接种在小盖玻片上 ,置含 2 0 %小牛血清附加常量抗生素的RPMI 16 4 0培养基中培养 ;至培养第 6d ,用高碘酸雪夫 (PAS)法显示培养细胞中的糖类物质 ;阿新蓝 PAS法显示培养细胞中的酸性粘多糖 ;用淀粉酶处理后的PAS染色以鉴定细胞内的糖原。在Olympus BH2 显微镜下观察 ,统计细胞类型 ,拍照 ;HPIAS 2 0 0 0图像分析仪测定含量 ,统计分析不同细胞类型间的差异。结果 :日本血吸虫成虫培养细胞的类型不同 ,所含的糖类成分有所不同 ,有较多培养细胞内既有糖原 ,也有酸性粘多糖 ,以及中性粘多糖、粘蛋白、糖蛋白、糖脂等其它糖类物质 ;大多数细胞几乎不含糖原和酸性粘多糖 ;另有少数细胞仅含糖原和酸性粘多糖 ,以糖原为主 ,极少数细胞以酸性粘多糖为主。结论 :日本血吸虫成虫培养细胞内既含糖原 ,也含酸性粘多糖 ,以及中性粘多糖、粘蛋白、糖蛋白。 展开更多
关键词 日本血吸虫 成虫 培养细胞 糖类 细胞化学
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甲基硝基亚硝基胍对日本血吸虫成虫培养细胞骨架作用的研究 被引量:7
7
作者 范虹 董惠芬 +2 位作者 蒋明森 明珍平 钟沁萍 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期401-403,共3页
目的 通过观察 N-甲基 - N-硝基 - N-亚硝基胍 (MNNG)诱导日本血吸虫培养细胞后骨架的改变 ,研究 MNNG对培养细胞转化、增殖的作用。方法 将日本血吸虫成虫培养细胞接种于小盖玻片上 ,培养 1周时用浓度为 3mg/ L 的 MNNG处理 48h,然后... 目的 通过观察 N-甲基 - N-硝基 - N-亚硝基胍 (MNNG)诱导日本血吸虫培养细胞后骨架的改变 ,研究 MNNG对培养细胞转化、增殖的作用。方法 将日本血吸虫成虫培养细胞接种于小盖玻片上 ,培养 1周时用浓度为 3mg/ L 的 MNNG处理 48h,然后用 RPMI- 16 40含 2 0 %小牛血清附加常量抗菌素的培养基培养 2周 ,再换用 RPMI- 16 40含 5 %小牛血清的培养基继续培养 ,用考马斯亮兰染色法和鬼笔环肽荧光染色法显示培养细胞骨架。结果  MNNG诱导后 ,在培养第 4、5周时部分培养细胞骨架排列紊乱 ,微丝集聚于细胞边缘。结论  MNNG有一定诱导日本血吸虫成虫培养细胞转化。 展开更多
关键词 日本血吸虫 成虫培养细胞 N-甲基-N-硝基-N亚硝基胍 细胞骨架
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日本血吸虫成虫培养细胞骨架系统的研究 被引量:2
8
作者 范虹 董惠芬 +2 位作者 蒋明森 钟沁萍 明珍平 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2001年第5期280-281,共2页
目的 研究日本血吸虫成虫培养细胞的骨架系统。方法 将日本血吸虫成虫细胞接种于小盖玻片上 ,以 RPMI- 16 40含 2 0 %小牛血清附加常量抗菌素的培养基培养 ,用考马斯亮蓝染色法和鬼笔环肽荧光染色法显示培养细胞骨架。结果 考马斯亮... 目的 研究日本血吸虫成虫培养细胞的骨架系统。方法 将日本血吸虫成虫细胞接种于小盖玻片上 ,以 RPMI- 16 40含 2 0 %小牛血清附加常量抗菌素的培养基培养 ,用考马斯亮蓝染色法和鬼笔环肽荧光染色法显示培养细胞骨架。结果 考马斯亮蓝染色显示日本血吸虫成虫细胞骨架呈网络状结构 ,均匀分布于胞质中 ;用 (NH4) 2 SO4抽提后考马斯亮蓝染色显示细胞骨架无明显改变 ;鬼笔环肽荧光染色后可见细胞内有均匀荧光亮点。结论 日本血吸虫成虫培养细胞骨架呈致密网络状结构 ,以中间纤维为主 ,缺乏粗大的微丝束。 展开更多
关键词 日本血吸虫 成虫培养细胞 细胞骨架
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雄虫抽提物对日本血吸虫卵黄培养细胞最适浓度的筛选 被引量:3
9
作者 李俊琳 蒋明森 +2 位作者 钟沁萍 明珍平 董惠芬 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期482-486,共5页
目的 筛选雄虫抽提物对日本血吸虫卵黄培养细胞影响的最适作用浓度。方法 灌注法获取28d虫龄的日本血吸虫虫体,无菌处理后分离雌雄虫体。将雄虫匀浆,反复冻融3次,离心取上清液,考马斯亮蓝法测定蛋白后置于-20℃下保存备用。切下雌... 目的 筛选雄虫抽提物对日本血吸虫卵黄培养细胞影响的最适作用浓度。方法 灌注法获取28d虫龄的日本血吸虫虫体,无菌处理后分离雌雄虫体。将雄虫匀浆,反复冻融3次,离心取上清液,考马斯亮蓝法测定蛋白后置于-20℃下保存备用。切下雌虫卵黄腺段虫体,冷消化法制备细胞悬液,调整细胞数为1×10^9/L后,将卵黄细胞接种于小盖玻片上,RPMI-1640含20%小牛血清培养,根据加入不同质量浓度雄虫抽提物分为6组(0、10、50、100、150、200mg/L组)。培养第7天,以核仁组织区相关嗜银蛋白(argyrophilic nucleolar organizer region associated proteins,AgNORs)及乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)为评价指标,对卵黄细胞进行AgNORs及LDH染色,Olympus-BH2显微镜观察,输入HPIAS-2000图像分析仪测定培养细胞的灰度值。结果 随着雄虫抽提物质量浓度的增加,培养细胞的AgNORs与LDH着色均逐渐加深,至100mg/L时最深,随后又逐渐变浅。图像分析显示,雄虫抽提物处理的各组细胞AgNORs及LDH均明显高于对照组(q10=14.2189、q50=18.3358、q100=35.6491、q150=13.1849、q200=13.8604,P<0.01;g10=10.3377、q50=11.7532、q100=23.1883、q150=10.2792、q200=9.3052,P<0.01)。雄虫抽提物100mg/L组与其他各组比较,AgNORs及LDH明显升高(q100=21.4302、q50=17.3132、q150=22.4642、q200=21.7887,P<0.01;g10=12.8506、q50=11.4351、q150=12.8896、q200=13.8831,P<0.01)。结论 雄虫抽提物可显著提高日本血吸虫卵黄细胞的增殖能力与代谢活性,其作用的最适质量浓度为100mg/L。 展开更多
关键词 雄虫抽提物 血吸虫日本 卵黄细胞 核仁组织区相关嗜银蛋白 乳酸脱氢酶
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日本血吸虫雄虫抽提物对卵黄培养细胞超微结构的影响
10
作者 钟沁萍 李俊琳 +2 位作者 明珍平 蒋明森 董惠芬 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期424-427,共4页
目的观察日本血吸虫雄虫抽提物对卵黄培养细胞超微结构的影响。方法灌注法获取28d虫龄的日本血吸虫虫体,无菌处理后分离雌、雄虫体。取雌虫卵黄腺段虫体,冷消化法制备细胞悬液,将细胞接种于培养瓶中,随机分为对照组和实验组。对照组以... 目的观察日本血吸虫雄虫抽提物对卵黄培养细胞超微结构的影响。方法灌注法获取28d虫龄的日本血吸虫虫体,无菌处理后分离雌、雄虫体。取雌虫卵黄腺段虫体,冷消化法制备细胞悬液,将细胞接种于培养瓶中,随机分为对照组和实验组。对照组以常规培养基培养,实验组以常规培养基含100μg/ml雄虫抽提物培养。培养第7天,取实验组与对照组细胞制备标本并观察。结果实验组成熟卵黄细胞出现概率较对照组高,核和胞质染色均匀;卵黄滴内的卵黄球之间界限清晰,数目可数;线粒体数目较少,电子密度较低。未成熟卵黄细胞胞质中粗面内质网较丰富。对照组中卵黄细胞的核和胞质电子密度降低,脂滴数目增多,空泡化程度严重,未见线粒体;成熟卵黄细胞中卵黄滴内的卵黄球之间已发生融合,有卵黄球从中释放出来,成为裸露体;未成熟卵黄细胞中卵黄球与外面包绕的膜之间空隙增大,粗面内质网扩大和囊泡变,核糖体脱颗粒。结论日本血吸虫雄虫抽提物对雌虫卵黄细胞在体外的发育与存活具有促进作用。 展开更多
关键词 日本血吸虫 卵黄培养细胞 雄虫抽提物 超微结构
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