日本血吸虫不同抗原检测家兔感染及治疗前后IgG/IgM抗体动态

目的探索特异性抗体检测在日本血吸虫病诊断和疗效考核中的潜在应用价值。方法ELISA方法采用可溶性虫卵抗原(SEA)、成虫抗原(AWA)检测人工感染家兔治疗前后血清中特异性IgGI、gM抗体,评价特异性抗体检测的诊断和疗效考核价值。结果用SEA抗原检测IgM抗体,发现感染后7周不管治疗与否,抗体水平均快速下降。与SEA相比,感染后AWA特异性IgM抗体上升时间早,且治疗后5个月仍为阳性。SEA特异性IgG抗体水平最高,但治疗后5个月仍为阳性。结论采用SEA抗原检测IgG用于血吸虫病诊断效果较好;对早期感染的诊断可以考虑SEA抗原检测IgM抗体作辅助。AWA抗原检测IgM,对急、慢性血吸虫感染均有较好诊断效果。采用这两种抗原检测IgG和IgM,均无考核疗效意义。

白头翁总皂苷对日本血吸虫糖原、蛋白质及酶的作用

目的观察白头翁总皂苷(Pulsatilla chinensis(Bunge)Regel saponins,PRS)对小鼠体内日本血吸虫(Schisto-soma japonicum)的糖原、蛋白质、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)、酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase,GR)的影响。方法小鼠感染日本血吸虫尾蚴后42d,尾静脉一次性注射25mg/kg PRS药液,24h后灌注冲虫收集虫体,检测糖原、蛋白质的含量及AKP、ACP、SOD、GR的活性。结果感染日本血吸虫尾蚴的小鼠给药24h后,体内雌虫和雄虫的糖原含量较对照组减少45.52%、23.2%,蛋白质含量较对照组减少9.84%、10.66%,药物作用后,AKP、ACP、SOD、GR的活力均明显下降,雄虫的抑制率分别为33.89%、29.25%、17.15%、60.77%;雌虫的抑制率各为43.5%、47.78%、36.68%、63.24%。结论 PRS对日本血吸虫的代谢有一定的影响。

日本血吸虫双表膜抗原融合基因原核表达质粒的构建及表达

目的构建编码日本血吸虫表膜蛋白SjTsp2与Sj29融合基因的原核表达质粒,并表达重组蛋白。方法利用基因SOEing PCR技术得到SjTsp2与Sj29融合基因,将其克隆入原核表达载体pET32a中,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot进行鉴定。结果序列分析显示,融合基因与两个目的基因的同源性达100%;SDS-PAGE显示表达的重组蛋白相对分子质量为43000,表达量占菌体总蛋白的20%以上;Western blot显示其分别能与SjTsp2和Sj29蛋白的单克隆抗体结合。结论已成功构建了SjTsp2与Sj29融合基因原核表达质粒,并在大肠杆菌中表达了重组蛋白,为研制血吸虫病疫苗提供了材料。