日本血吸虫童虫保护性单克隆抗体的建株和鉴定

本研究获8株抗日本血吸虫(中国大陆株)童虫的单克隆抗体,从中确定一株具有体内保护性功能的单克隆抗体(编号为N15D9),其保护率范围为14-39％。经间接免疫荧光法和ELISA试验检测,N15D9能与尾蚴、3h龄机械转化童虫和5d龄肺童虫的表膜抗原反应。经3h龄机械童虫可溶性抗原的免疫印迹法分析,N15D9能识别132、96和10kDa抗原分子。

小鼠中性粒细胞在抗体及补体参与下对日本血吸虫童虫杀伤作用的体外实验

用光镜及电镜观察小鼠中性粒细胞及中性粒细胞依赖抗体及补体对体外培养的日本血吸虫童虫 的作用。结果表明：单纯中性粒细胞很少粘附到童虫表面，仅个别十分疏松地粘附在童虫表面，被粘附 的童虫结构正常。提示：单纯中性粒细胞对童虫无明显作用，在抗体及补体协同下，中性粒细胞成群且 紧密地粘附在童虫体表，在细胞集聚的周围，虫体体被出现隧道样及火山口样变化，紧贴童虫的中性 粒细胞伸出伪足，虫体体棘紊乱，皮层变平，体被剥脱，虫体变形，说明中性粒细胞在抗体及补体协同 下，对童虫有杀伤作用、文中对杀伤机制进行了扼要的讨论。

免疫血清及补体对体外培养日本血吸虫童虫的杀伤作用

本文报道抗体、补体、补体加抗体对机械转变日本血吸虫童虫的杀伤作用,并比较其杀伤效率。用光学显微镜及扫描电镜观察形态变化。结果显示杀伤率为补体加抗体>单纯补体>单纯抗体。除去补体血清中的B因子,杀伤率明显下降,说明补体C_3旁路途径参与杀伤童虫的作用。童虫孵育于含有补体及抗体的培养基中72h后,虫体头背部体棘零乱或消失,有些体被破损及脱皮。

血吸虫感染新模型兔血清对童虫的体外杀伤实验

目的 在已建立的一种血吸虫感染伴随免疫新模型的基础上 ,观察该模型兔血清对童虫的体外杀伤作用 ,探讨该血清抗体在抗日本血吸虫感染保护性免疫中的作用。 方法 用倒置显微镜观察并比较不同稀释度的日本血吸虫感染伴随免疫新模型兔血清 (A血清 )与日本血吸虫感染常规模型兔血清 (B血清 )对体外培养童虫的杀伤作用 ,并经甲基蓝染色后计算童虫死亡率。 结果 对体外童虫的杀伤作用 ,新模型兔血清随浓度的降低而逐渐减弱 ,血清浓度越低 ,童虫死亡率亦越低。但常规模型兔血清随浓度的降低则呈现先上升后下降的趋势 ,以 1/ 10左右稀释度时最高。比较A、B两种血清对童虫的杀伤作用 ,前者强于后者 ,1/ 2血清稀释度培养 48h观察到的童虫死亡率分别为 (4 1.2 3±1.0 8) %和 (2 7.2 7± 2 .86) % (P <0 .0 5 ) ;先加入后者 4h后再加入前者能部分抑制前者的杀童虫作用 ,童虫死亡率为(3 7.63± 2 .3 3 ) % ,介于两者之间。常规模型血清组部分童虫体表出现膜状或泡状物质包绕 ,但童虫却未受到明显杀伤。结论 日本血吸虫感染伴随免疫新模型兔血清在体外对童虫的杀伤作用强于常规模型兔血清 ,推测前者可能以杀伤抗体占优势 ;而后者可能以封闭抗体占优势。

抗体和补体依赖嗜酸粒细胞介导的对日本血吸虫童虫作用电镜研究

本文报道了在嗜酸粒细胞(Eos)介导的细胞毒效应过程中童虫形态变化的电镜观察及受损童虫释放乳酸脱氢酶(LDH)的测定。不同配体依赖的 Eos 介导杀伤童虫作用的强度和速度不同,即补体+抗体组和补体组出现较早,且前者所致损伤较重,抗体组童虫损伤出现较晚而轻微。受损童虫的 LDH 释放多寡顺序为抗体+补体>补体>抗体。不同配体依赖的 Eos 介导细胞毒作用的速度和电镜观察相符。

在体外培养系统中中性粒细胞对日本血吸虫童虫的作用

3小时童虫在含病兔血清、补体和中性粒细胞的培养系统(ISCN)中培养48小时后,约60％的童虫体表有中性粒细胞附着,其中50.8％的童虫已死亡,含病兔血清不含补体(ISCN)、含正常小鼠血清及补体(NSCN)或含正常血清不含补体(NSN)的培养系统中,中性粒细胞粘附童虫体表较少,童虫的死亡率亦低。24小时童虫在ISCN中培养48小时后,中性粒细胞对童虫的附着及童虫死亡率均逊于3小时童虫。在ISCN中,中性粒细胞对72小时童虫几不附着。以中性粒细胞介导的杀死3小时童虫的作用依赖于抗体的存在,但不完全依赖于补体。

小鼠中性粒细胞对体外培养日本血吸虫童虫杀伤作用的研究

用体外培养方法,观察了小鼠腹腔中性粒细胞、中性粒细胞与免疫血清、补体等因子对体外机械转变的日本血吸虫童虫的杀份作用。实验结果表明:单纯小鼠中性粒细胞对童虫无杀伤作用;但在抗体及补体参与下,对童虫的杀伤明显增强,提示中性粒细胞与血清免疫因子对童虫的杀伤有协同作用。此外,比较正常小鼠和感染小鼠中性粒细胞对童虫的杀伤能力,比较不同虫龄对中性粒细胞参与的免疫作用的敏感性,证实机械转变童虫孵育24h 后对中性粒细胞参与的免疫杀伤的抵抗力增强(P<0.01)。文中对中性粒细胞依赖抗体、补体对童虫的杀伤机理进行讨论。并提出评价血吸虫细胞免疫标准化问题的意见。