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Effect of Ferulic Sesquiterpene Compounds on Enzyme Activity of Schistosomulum
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作者 Cao Zimeng Zhao Hongmei +2 位作者 Liao Qianhui Wang Jing Xing Lingyu 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2018年第2期131-132,共2页
[Objective] The paper was clear the effects of ferulic sesquiterpene compounds on enzyme activity of schistosomulum.[Method]Mice infected with schistosome cercariae were orally administrated with ferulic sesquiterpene... [Objective] The paper was clear the effects of ferulic sesquiterpene compounds on enzyme activity of schistosomulum.[Method]Mice infected with schistosome cercariae were orally administrated with ferulic sesquiterpene compounds at the dose of 300 mg/kg on the 6 thday post infection once a week for 4 weeks.Schistosomula were collected and ground into homogenate on the 3 rdand 5 thday after every time of administration.Thin layer starch gel electrophoresis was used to observe the activity of enzymes in the homogenate.Control group was also designed(drug free mice).[Result] The activities of malic dehydrogenase,6-phophate mannosease and acid phosphatase were obviously inhibited in the drug group,but the activity of phosphoglucoisomerase was not inhibited.[Conclusion] Ferulic sesquiterpene compounds have inhibitory effect on energy metabolism of schistosomulum and digestion of red blood cells. 展开更多
关键词 Ferulic sesquiterpene compounds schistosomulum ISOENZYME
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正常东方田鼠血清及脾细胞体外杀血吸虫童虫作用的初步观察 被引量:17
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作者 张新跃 何永康 +5 位作者 李毅 罗新松 刘述先 喻鑫玲 林金莲 李岳生 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2001年第4期206-208,共3页
目的 研究野生和繁殖东方田鼠血清和 /或脾细胞在体外对日本血吸虫童虫的杀伤作用。方法 东方田鼠血清和 /或脾细胞与童虫在体外共培养 ,16~ 18h后在倒置显微镜下观察 ,计算童虫死亡率。结果 东方田鼠血清或脾细胞对童虫的校正死亡... 目的 研究野生和繁殖东方田鼠血清和 /或脾细胞在体外对日本血吸虫童虫的杀伤作用。方法 东方田鼠血清和 /或脾细胞与童虫在体外共培养 ,16~ 18h后在倒置显微镜下观察 ,计算童虫死亡率。结果 东方田鼠血清或脾细胞对童虫的校正死亡率分别为 6 7.36 %± 4.0 0 % (野生鼠 )和6 4.39%± 5 .86 % (繁殖鼠 )、6 6 .0 2 %± 1.40 % (野生鼠 )和 6 6 .38%± 2 .18% (繁殖鼠 ) ;东方田鼠血清加脾细胞的童虫校正死亡率为 76 .6 8%± 6 .2 7% (野生鼠 )和 79.0 3%± 8.0 0 % (繁殖鼠 ) ,均显著高于单纯血清或脾细胞的校正死亡率 ;野生鼠和繁殖鼠对童虫的杀伤作用无显著性差异。结论 东方田鼠血清和脾细胞均具有体外杀童虫作用 ,并表现出一定的协同杀伤作用 。 展开更多
关键词 东方田鼠 血清 脾细胞 日本血吸虫 童虫
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口服青蒿琥酯早期治疗预防日本血吸虫病的实验研究 被引量:45
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作者 吴玲娟 徐潘生 +1 位作者 宣尧仙 李思温 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 1995年第3期129-133,共5页
本文介绍了青蒿琥酯早期治疗预防动物血吸虫病的疗效.实验动物于感染血吸虫尾蚴后第7d开始喂服青蒿琥酯,剂量分别为小鼠300mg/kg,兔20—40mg/kg及犬30mg/kg,每wk 1次,服用4—6次,对小鼠、兔和犬的减虫率分别为77.50%—90.66%、99.53%和9... 本文介绍了青蒿琥酯早期治疗预防动物血吸虫病的疗效.实验动物于感染血吸虫尾蚴后第7d开始喂服青蒿琥酯,剂量分别为小鼠300mg/kg,兔20—40mg/kg及犬30mg/kg,每wk 1次,服用4—6次,对小鼠、兔和犬的减虫率分别为77.50%—90.66%、99.53%和97.10%.青蒿琥酯能杀灭宿主体内尚未发育成熟的血吸虫,可保护肝脏免受血吸虫及其虫卵的危害.并适用于不同感染度及反复感染的实验动物.在几种青蒿素衍生物中,采用同剂量、同疗程青蒿琥酯杀童虫作用优于蒿甲醚和还原青蒿素. 展开更多
关键词 青蒿琥酯 血吸虫童虫
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青蒿琥酯对日本血吸虫童虫体内四种酶活性的影响 被引量:10
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作者 吴玲娟 宣尧仙 +2 位作者 郭尧 徐潘生 李思温 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 1996年第5期267-269,共3页
小鼠感染日本血吸虫尾蚴后第7d起灌服青蒿琥酯300mg/kg·次,每周1次,共4次.于每次给药后的第3、第5d收集童虫,制成匀浆,作薄层淀粉胶电泳,胶中有关同工酶经底物显色,作酶活性定性观察.另设相应时间的不给药对照组.观察发现:该药对... 小鼠感染日本血吸虫尾蚴后第7d起灌服青蒿琥酯300mg/kg·次,每周1次,共4次.于每次给药后的第3、第5d收集童虫,制成匀浆,作薄层淀粉胶电泳,胶中有关同工酶经底物显色,作酶活性定性观察.另设相应时间的不给药对照组.观察发现:该药对苹果酸脱氢酶(MDH)、6-磷酸甘露糖酶(MPI)和酸性磷酸酶(ACPH)有明显抑制作用.对磷酸葡萄糖异构酶(PGI)的活性影响不明显.提示青篙琥酯对日本血吸虫童虫的能量代谢和肠壁对红细胞的消化有抑制作用. 展开更多
关键词 青蒿琥酯 血吸虫童虫 代谢 同工酶
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日本血吸虫童虫部分差异表达蛋白的质谱分析 被引量:10
5
作者 赵晓宇 姚利晓 +4 位作者 孙安国 傅志强 刘金明 蔡幼民 林矫矫 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期1-6,共6页
应用蛋白质双向电泳技术和质谱技术对16日龄日本血吸虫童虫的可溶性蛋白进行分离、分析,得到了2 000±69个蛋白斑点,其中500±86个蛋白斑点与血吸虫雌虫和雄虫的蛋白所共有,童虫特异呈现的蛋白斑点有26±1个。对其中20个童... 应用蛋白质双向电泳技术和质谱技术对16日龄日本血吸虫童虫的可溶性蛋白进行分离、分析,得到了2 000±69个蛋白斑点,其中500±86个蛋白斑点与血吸虫雌虫和雄虫的蛋白所共有,童虫特异呈现的蛋白斑点有26±1个。对其中20个童虫特异呈现的蛋白斑点进行质谱和生物信息学分析的结果表明,它们代表了16种蛋白;对这些蛋白进行生物学功能预测的结果表明,它们可能与寄生虫的生物合成、能量代谢、信号传导和细胞构成等相关。 展开更多
关键词 日本血吸虫 童虫 蛋白质组 质谱
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日本血吸虫虫卵、童虫和雌雄成虫膜蛋白的双向电泳 被引量:7
6
作者 程国锋 冯新港 +4 位作者 林矫矫 石耀军 陆柯 周元聪 蔡幼民 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第1期171-177,共7页
Membrane proteins were extracted from eggs, schistosomulum, adult male and female worms of Schistosoma japonicum in order to analyze the differently expressed profile by two dimensional electrophoresis. Schistosomulum... Membrane proteins were extracted from eggs, schistosomulum, adult male and female worms of Schistosoma japonicum in order to analyze the differently expressed profile by two dimensional electrophoresis. Schistosomulum and adult worms were obtained from rabbits infected with 1 500 cercariaes on 14 and 42 days after challenge, respectively. Adult male and female worms on 42 days were manually detached and stored into liquid nitrogen until use. Eggs were collected by Percoll TM from the liver of rabbits. ProteoPrep Membrane Extraction Kit TM was employed to extracted membrane proteins by reducing and alkylating with TBP and iodoacetamide from 200 mg of eggs, schistosomulums, adult male worm and female worms, respectively. Immobilized pH gradient strips with a linear pH range of 3-10 (130 mm) were rehydrated together with membrane proteins (30 μg) in 250 μl solution containing 7 mol urea, 2 mol thiourea, 2% SB3-10, 4% CHAPS, 40 mmol Tris, 30 mmol DTT, then separated on 12.5% SDS polyacrylamide gel for the second dimensional electrophoresis. Gels were stained with silver, scanned by Labscan, and analyzed using ImageMaster TM Analysis software. The 2D maps of egg, schistosomulum, adult female worm and male worm were showed 78±3、67±3、108±4 and 122±4 spots respectively. There were 35±1 spots which showed specific expression in female worm as compared with male worm, but 45±2 spots were in male worms. Most differently expressed spots between male and female worms were located in the area of 40-70 kD and pI 4-7. The large number of unique spots from schistosomulum was located in the area of alkalescence. The 2D map of for adult male worms uniquely showed 5 spots as compared with that of schistosomulum and female worm. The female worm showed 4 unique spots as compared with that of schistosomulum, egg and male worm. The unique spots between male and female worms were identified by the database of SWISS 2D-PAGE according to the molecular weight and isoelectronic point. Calreticulin 1, methyltransferase, outer membrane protein tolc and oxygen-evolving enhancer protein 1-1 were uniquely showed in adult male worm after pairing. On the other hand, enolase, outer membrane protein X, ferrienterobactin receptor and heat shock cognate 70 kD protein 3 were uniquely showed in adult female worm. In conclusion, there are different expressions of membrane proteins from egg, schistosomulum, adult male worm and female worms of Schistosoma japonicum. These proteins, which were uniquely expressed between adult male and female worms after pairing, were involved in signal transduction and metabolism 展开更多
关键词 童虫 TM 日本血吸虫 膜蛋白 虫卵 双向电泳 SDS 成虫 PAGE
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日本血吸虫中国大陆株肝期童虫cDNA文库的构建及鉴定 被引量:14
7
作者 童畅 沈际佳 +1 位作者 蒋作君 汪学龙 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第4期52-54,共3页
目的 构建日本血吸虫肝期童虫的cDNA文库 ,以从中寻找新的抗病疫苗和诊断分子。方法 阳性钉螺逸出尾蚴 ,人工感染家兔 ,15d后剖杀家兔 ,门静脉灌洗收集童虫。提取其总RNA ,并反转录PCR合成cDNA ,将cDNA片段定向重组入噬菌体载体 ,包... 目的 构建日本血吸虫肝期童虫的cDNA文库 ,以从中寻找新的抗病疫苗和诊断分子。方法 阳性钉螺逸出尾蚴 ,人工感染家兔 ,15d后剖杀家兔 ,门静脉灌洗收集童虫。提取其总RNA ,并反转录PCR合成cDNA ,将cDNA片段定向重组入噬菌体载体 ,包装后构建成cDNA文库。结果 反转录PCR产生的cDNA经电泳 ,分子量大小位于 4 0 0~ 35 0 0bp之间 ,经含有IPTG和x -Gal颜色选择平皿测定 ,初步提示重组效率为 90 %以上。随机挑取 6个重组克隆经自身环化成质粒后双酶切鉴定提示插入片段 4 0 0~ 12 0 0 pb不等。 展开更多
关键词 日本血吸虫童虫 CDNA文库 鉴定 λTriplEx2噬菌体
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日本血吸虫童虫文库免疫筛选及其高丰度表达膜蛋白初步鉴定 被引量:4
8
作者 朱绍春 赵志荣 +2 位作者 雷黎 张林杰 沈际佳 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期106-110,共5页
目的获得新的可能具有诊断意义的血吸虫蛋白分子并对其鉴定。方法免疫学方法筛选日本血吸虫童虫cDNA文库,对获得的阳性克隆进行测序分析,设计引物体外扩增目的蛋白基因,将其亚克隆入原核表达载体pET28a中,并转化大肠埃希菌BL21,进行诱... 目的获得新的可能具有诊断意义的血吸虫蛋白分子并对其鉴定。方法免疫学方法筛选日本血吸虫童虫cDNA文库,对获得的阳性克隆进行测序分析,设计引物体外扩增目的蛋白基因,将其亚克隆入原核表达载体pET28a中,并转化大肠埃希菌BL21,进行诱导表达,最后用Westernblotting鉴定。结果获得34个阳性克隆,选择其中24个进行测序,其中13个是日本血吸虫相对分子质量(Mr)为22600膜相关蛋白(Sj22.6)基因。Sj22.6基因在体外被成功扩增,并被亚克隆入pET28a中进行表达。WesternBlotting结果显示,菌体表达的条带可以被感染兔血清以及血吸虫患者血清识别。结论Sj22.6膜相关蛋白基因在童虫cDNA文库中可以被高频率筛出,融合蛋白Sj22.6成功地在BL21中表达并具有免疫反应性。 展开更多
关键词 日本血吸虫 童虫 CDNA文库 免疫筛选 sj22.6
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日本血吸虫童虫表膜结合多肽的亲和筛选与初步鉴定 被引量:4
9
作者 魏琦 刘彦 +8 位作者 曾庆仁 陈欲晓 周军 刘碧源 邹艳 杨胜辉 蔡力汀 李立新 兰玲梅 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期172-175,共4页
目的筛选噬菌体十二肽库中与日本血吸虫(Schistosoma japonicum)童虫表膜特异性结合的多肽并鉴定。方法利用噬菌体十二肽库与日本血吸虫活童虫靶分子之间的亲和力结合,经3轮吸附-洗脱-扩增,从末次回收的结合噬菌体中随机挑取20个克隆进... 目的筛选噬菌体十二肽库中与日本血吸虫(Schistosoma japonicum)童虫表膜特异性结合的多肽并鉴定。方法利用噬菌体十二肽库与日本血吸虫活童虫靶分子之间的亲和力结合,经3轮吸附-洗脱-扩增,从末次回收的结合噬菌体中随机挑取20个克隆进行测序。根据测序结果 ,选取出现次数最多的噬菌体克隆作为目标噬菌体,免疫组化检测目的噬菌体,并回输到已感染日本血吸虫的小鼠体内,2.5h后处死小鼠,回收肝脏和日本血吸虫童虫,分别洗脱与肝脏和童虫结合的噬菌体,进行统计学分析。结果经3轮筛选后,噬菌体回收率从第1轮的0.77×10-8到第3轮的0.75×10-5,说明噬菌体得到了有效富集。DNA测序结果表明,20个噬菌体克隆中的15个克隆呈现QHPRIRKOOOOO序列。免疫组化结果显示,表达该序列的噬菌体能与童虫表膜有效结合;体内回输试验证实,该噬菌体能有效地靶向结合于体内日本血吸虫童虫表膜。结论筛选获得的短肽QHPRIRKOOOOO能有效地靶向结合日本血吸虫童虫表膜。 展开更多
关键词 日本血吸虫 童虫 噬菌体展示技术 表膜 靶向性
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日本血吸虫表膜特异结合肽重组质粒ZLW/pEGFP-C2体外转染日本血吸虫童虫的研究 被引量:2
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作者 刘彦 曾庆仁 +4 位作者 杨胜辉 魏琦 周军 李立新 兰玲梅 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期16-20,共5页
目的观察日本血吸虫表膜特异结合肽合成基因(ZLW)构建的ZLW/pEGFP-C2重组质粒体外转染日本血吸虫童虫的效率,了解其抗虫作用。方法用0.75%二甲基亚砜(DMSO)和高浓度质粒浸泡法,使用重组质粒ZLW/pEGFP-C2转染机械转化的日本血吸虫脱尾童... 目的观察日本血吸虫表膜特异结合肽合成基因(ZLW)构建的ZLW/pEGFP-C2重组质粒体外转染日本血吸虫童虫的效率,了解其抗虫作用。方法用0.75%二甲基亚砜(DMSO)和高浓度质粒浸泡法,使用重组质粒ZLW/pEGFP-C2转染机械转化的日本血吸虫脱尾童虫,以瞬时表达的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因为报告基因,在倒置荧光镜下观察虫体。抽提转染后培养48h虫体的总RNA和全虫蛋白,分别用RT-PCR和蛋白质印迹(Western blotting)检测ZLW基因和EGFP基因在虫体内的表达情况。于转染后培养24、48、72和96h,用美蓝染色法鉴别虫体存活情况,并计数。以上试验均设空质粒组和Tris-HCl缓冲盐溶液(TBS)对照组。结果镜下观察结果显示,转染率约为10%,其EGFP主要分布于虫体皮层,以口、腹吸盘最为明显;空质粒转染组虫体腹吸盘处略带绿色荧光。RT-PCR结果显示,ZLW/pEGFP-C2转染组虫体的扩增产物大小约为259bp,测序结果与ZLW序列一致。Western blotting分析证实EGFP基因在童虫体内表达。抗虫效果显示,转染后24h和48h,ZLW/pEGFP-C2转染组童虫死亡率(14.0%,48.8%)与空质粒组(15.9%,45.7%)和TBS对照组(16.9%,50.3%)间的差异无统计学意义(P>0.05);转染后72h,ZLW/pEGFP-C2转染组死亡率(92.7%)高于空质粒组(73.2%)和TBS对照组(76.8%)(P<0.01);转染后96 h,ZLW/pEGFP-C2转染组童虫死亡率达100%。结论 DMSO作用的高浓度质粒浸泡法可将重组质粒ZLW/pEGFP-C2引入日本血吸虫童虫体内,并获得表达。 展开更多
关键词 日本血吸虫 脱尾童虫 表膜结合肽 转染效率 抗虫效果
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日本血吸虫细胞免疫原模拟表位的筛选及初步鉴定 被引量:3
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作者 李艳琴 蔡力汀 +2 位作者 曾庆仁 余平 喻容 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2008年第4期276-280,共5页
目的从噬菌体随机12肽库中筛选日本血吸虫(Schistosoma japonicum,S.j)具有保护性的细胞免疫原模拟表位,为进一步阐明其免疫保护性分子机制提供依据。方法用具有保护性的S.j12d童虫培养细胞(S.jC-12)免疫鼠血清中的IgG对随机12肽库作亲... 目的从噬菌体随机12肽库中筛选日本血吸虫(Schistosoma japonicum,S.j)具有保护性的细胞免疫原模拟表位,为进一步阐明其免疫保护性分子机制提供依据。方法用具有保护性的S.j12d童虫培养细胞(S.jC-12)免疫鼠血清中的IgG对随机12肽库作亲和筛选,随机挑取20个噬菌体克隆用ELISA检测其特异性;对阳性克隆进行测序,采用ELISA和Western blot检测阳性克隆免疫鼠血清中的特异性抗体及其识别天然抗原的特性。结果经过4轮免疫淘洗,洗脱的噬菌体得到了有效富集(16 250倍)。20个噬菌体克隆经检测有15个能被S.jC-12免疫鼠血清识别,有12个序列不同的噬菌体克隆;ELISA检测显示有11个阳性噬菌体克隆诱导小鼠产生IgG应答,其中含精氨酸的阳性噬菌体克隆免疫血清中IgG水平与不含精氨酸克隆免疫鼠比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论利用噬菌体展示技术可筛选出S.jC-12免疫原的部分模拟表位且能在小鼠模型中诱导免疫应答。 展开更多
关键词 血吸虫 日本 童虫细胞 噬菌体随机12肽库 表位
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SV40LT基因重组腺病毒载体的包装、鉴定及用于转染日本血吸虫童虫细胞的研究 被引量:1
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作者 刘碧源 曾庆仁 +4 位作者 余平 杨胜辉 蔡力汀 周军 张顺科 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1016-1020,共5页
目的构建携带SV40LT基因的重组腺病毒表达载体,制备具有感染力的重组腺病毒,观察其转染日本血吸虫(Schistosoma japonicum,Sj)童虫细胞后的表达情况。方法采用体外连接法构建好的携带SV40LT基因的重组腺病毒质粒(AdHu5-SV40LT)转化Stbl... 目的构建携带SV40LT基因的重组腺病毒表达载体,制备具有感染力的重组腺病毒,观察其转染日本血吸虫(Schistosoma japonicum,Sj)童虫细胞后的表达情况。方法采用体外连接法构建好的携带SV40LT基因的重组腺病毒质粒(AdHu5-SV40LT)转化Stbl2感受态菌,获得重组腺病毒质粒后,经Pac I酶切线性化后转染293A细胞,获得出重组腺病毒(AdHu5-SV40LT)。将重组腺病毒感染Sj童虫细胞,采用RT-PCR和免疫组织化学检测SV40LT基因的表达情况。结果重组腺病毒载体质粒可转染293A细胞并可在293A细胞内进行有效的复制;提取病毒DNA进行PCR检测证实含有SV40LT目的基因。以重组腺病毒能感染Sj童虫细胞,经RT-PCR和免疫组化检测有SV40LT基因在细胞中的表达。结论成功包装了具有感染能力的含SV40LT基因的重组腺病毒,感染Sj童虫细胞后目的基因有表达,为进一步探索日本血吸虫细胞永生化提供了实验依据。 展开更多
关键词 SV40LT基因 腺病毒载体 日本血吸虫 童虫细胞
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日本血吸虫尾蚴钻穿宿主皮肤的方式 被引量:1
13
作者 何毅勋 郁平 +1 位作者 郁琪芳 胡亚青 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 1989年第1期66-72,共7页
本文报道了日本血吸虫尾蚴钻穿宿主皮肤的全过程和早期童虫在8种动物皮肤中动态分布的结果。阐明了血吸虫尾蚴钻穿宿主皮肤是依靠其体内头腺及/或钻腺分泌物的酶促作用、头器伸缩的探查作用及全身肌肉运动的机械作用而协同完成的。指出... 本文报道了日本血吸虫尾蚴钻穿宿主皮肤的全过程和早期童虫在8种动物皮肤中动态分布的结果。阐明了血吸虫尾蚴钻穿宿主皮肤是依靠其体内头腺及/或钻腺分泌物的酶促作用、头器伸缩的探查作用及全身肌肉运动的机械作用而协同完成的。指出了尾蚴入侵皮肤界面和童虫在皮肤内移行常以倾斜角度前进,并非完全呈垂直方向或沿毛囊皮脂腺的通道。观察到童虫钻破皮肤血管壁进入血管腔的情景,这有力地提供了血吸虫童虫从皮肤进入血液循环系统的直接证据。 展开更多
关键词 日本血吸虫 尾蚴 侵肤方式
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日本血吸虫童虫细胞与免疫调节剂联用诱导小鼠免疫保护性效果观察 被引量:1
14
作者 曾铁兵 喻容 +4 位作者 刘碧源 蔡力汀 杨胜辉 方会龙 曾庆仁 《中国现代医药杂志》 2010年第5期12-14,共3页
目的观察单用日本血吸虫(SJ)童虫细胞(SC)和联用免疫调节剂诱生小鼠免疫保护性的效果。方法制备感染后第18dSC;实验昆明小鼠分为8组:A组(PBS)、B组(SC)、C组(IL-2)、D组(IL-2+SC)、E组(IFN-γ)、F组(IFN-γ+SC)、G组(香菇多糖)、H组(香... 目的观察单用日本血吸虫(SJ)童虫细胞(SC)和联用免疫调节剂诱生小鼠免疫保护性的效果。方法制备感染后第18dSC;实验昆明小鼠分为8组:A组(PBS)、B组(SC)、C组(IL-2)、D组(IL-2+SC)、E组(IFN-γ)、F组(IFN-γ+SC)、G组(香菇多糖)、H组(香菇多糖+SC)。腹股沟皮下间隔2w免疫1次,共3次。于末次免疫第4w攻击感染,第35d后剖杀小鼠计数虫荷及每克肝卵数(LEPG),计算减虫率和LEPG减少率。ELISA测定第2、3次免疫后及攻击前小鼠血清中特异性抗童虫可溶性抗原(SWSA)的抗体。结果保护性效果显示:与A组比较,B、C、D、E、F、G和H组的减虫率分别为43.3%、13.5%、36.1%、32.7%、46.2%、18.3%和33.7%,LEPG减少率分别为59.8%、26.6%、52.1%、47.7%、57.7%、34.0%和53.7%。各免疫调节剂与SC联合免疫组与单用SC组比较,特异性抗体水平差异无统计学意义。结论SC能诱生小鼠较明显的免疫保护性,单用IFN-γ也有一定的减虫和减卵效果,但免疫增强剂均未能显著提高SC诱生的免疫保护性效果和体液免疫应答水平。 展开更多
关键词 日本血吸虫 童虫细胞 免疫调节剂 保护性效果
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筛选日本血吸虫童虫早期诊断抗原的研究 被引量:6
15
作者 吴栋才 刘湘 +3 位作者 何立 蒋明森 杨孟祥 易新元 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2006年第2期83-87,共5页
目的筛选日本血吸虫童虫早期诊断抗原及其表位。方法制备日本血吸虫可溶性童虫抗原(SSA),经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及Westernblot后分别与日本血吸虫感染后10、21、42天兔血清进行酶联免疫印迹试验(EITB),筛选出... 目的筛选日本血吸虫童虫早期诊断抗原及其表位。方法制备日本血吸虫可溶性童虫抗原(SSA),经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及Westernblot后分别与日本血吸虫感染后10、21、42天兔血清进行酶联免疫印迹试验(EITB),筛选出能被早期感染血清所识别的抗原组分。用日本血吸虫感染后21天血清从噬菌体12随机肽库中筛选、富集、纯化、扩增与早期感染兔血清有高亲和力的噬菌体克隆,经动物实验初步评估其对日本血吸虫感染的早期诊断效果。结果SDS-PAGE显示SSA的总条带数多于可溶性成虫抗原(SAWA),但大多为共同抗原。EITB结果显示SSA共出现12条早期反应抗原带,其中97kDa和47kDa抗原分子只能被感染后10天兔血清特异性识别;SAWA仅出现7条反应带,未显示只能被感染后10天兔血清识别的期特异性抗原分子。挑选出3个与感染后21天兔血清具有高亲和力的单克隆噬菌体,混合后分别用于检测感染日本血吸虫10、21d鼠血清中IgG特异性抗体,阳性检出率分别为48.8%和64.4%。结论SSA中的97kDa和44kDa抗原分子及3个噬菌体随机12肽抗原模拟表位可能具有日本血吸虫感染早期诊断价值。 展开更多
关键词 日本血吸虫 早期诊断 可溶性成虫抗原 可溶性童虫抗原 表位
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日本血吸虫尾蚴人工方法转变的童虫超微结构的观察 被引量:1
16
作者 王薇 周述龙 《水生生物学报》 CAS 1987年第1期83-87,i005-i006,共7页
本文报道日本血吸虫尾蚴经注射器推压和血清孵育两种人工方法转变的童虫与载体皮肤型童虫的透射及扫描电镜的观察结果。描述了三种童虫在转变后3小时至12小时其糖膜、外质膜、体被内包含体及腺体的超微结构的变化。
关键词 童虫 日本血吸虫尾蚴 观察 超微结构 血清 腺体 注射器 人工方法 皮肤型 质膜
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日本血吸虫可溶性虫卵和童虫抗原刺激RAW264.7巨噬细胞的初步分析
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作者 沈元曦 张祖航 +3 位作者 韩宏晓 傅志强 洪炀 林矫矫 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 北大核心 2017年第1期1-6,共6页
本文采用不同浓度的日本血吸虫虫卵抗原(SEA)、童虫抗原(SSA)刺激小鼠单核巨噬细胞RAW264.7,结果显示SEA抗原能明显刺激巨噬细胞增殖分化(SI〉2),且多数巨噬细胞形态发生了改变并出现细胞死亡。实时定量荧光PCR结果显示,在SEA... 本文采用不同浓度的日本血吸虫虫卵抗原(SEA)、童虫抗原(SSA)刺激小鼠单核巨噬细胞RAW264.7,结果显示SEA抗原能明显刺激巨噬细胞增殖分化(SI〉2),且多数巨噬细胞形态发生了改变并出现细胞死亡。实时定量荧光PCR结果显示,在SEA、SSA抗原刺激下,巨噬细胞TNF-α、IL-6、IL,10和CCL2的mRNA表达量都明显高于对照组。结果提示血吸虫抗原对巨噬细胞的刺激作用可能在宿主抗血吸虫感染的先天免疫应答和虫卵肉芽肿形成免疫调节中发挥了一定的作用。 展开更多
关键词 日本血吸虫 巨噬细胞 虫卵抗原 童虫抗原
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日本血吸虫童虫细胞免疫母鼠的子代抗攻击感染的保护性研究
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作者 刘涛 伍宁 +1 位作者 蔡力汀 胡立平 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期751-758,共8页
目的以2种日本血吸虫易感小鼠为动物模型,探讨日本血吸虫(Schistosoma japonicum,S.j)童虫细胞免疫母鼠的子代鼠抗日本血吸虫攻击感染的应答水平。方法用S.j童虫细胞分别免疫昆明母鼠和Balb/c母鼠,将免疫母鼠或正常母鼠与相应鼠种的正... 目的以2种日本血吸虫易感小鼠为动物模型,探讨日本血吸虫(Schistosoma japonicum,S.j)童虫细胞免疫母鼠的子代鼠抗日本血吸虫攻击感染的应答水平。方法用S.j童虫细胞分别免疫昆明母鼠和Balb/c母鼠,将免疫母鼠或正常母鼠与相应鼠种的正常公鼠进行配对饲养,用其子代鼠建立2个感染模型共4组(A1:免疫昆明子代感染组;B1:正常昆明子代感染对照组;A2:免疫Balb/c子代感染组;B2:正常Balb/c子代感染对照组);计数A1、B1、A2、B2组经日本血吸虫尾蚴攻击感染后从其子代鼠体内收获的虫荷和每克肝卵荷(liver eggs per gram,LEPG);测量上述4组小鼠经HE染色后的肝组织切片内虫卵肉芽肿的大小;间接ELISA检测血清中抗S.j可溶性童虫抗原(soluble juvenile worm antigens,SJWA)IgG(H+L)水平。结果与正常昆明株、Balb/c株子代对照组B1、B2组相比,2组S.j童虫活细胞免疫母鼠子代A1、A2组均表现出不同程度的抗攻击感染的免疫力,尤其抗生殖效果显得尤为突出。其中,A1获得35.6%的减虫率和59.4%的LEPG减卵率;A2获得29.8%的减虫率和47.4%的LEPG减少率。从肝脏外表来看,B1、B2组子代对照鼠肝脏的坏死程度明显高于A1、A2免疫子代鼠。此外,A1组肝脏虫卵肉芽肿平均直径和面积比B1组分别减少23.8%和43.4%,A2组肝脏虫卵肉芽肿平均直径和面积较B2组减少28.4%和50.3%。A1、A2与B1、B2各指标结果的组间差异均具有统计学意义(P<0.05)。间接ELISA结果显示,不同时间点采集的2株免疫子代鼠血清中的抗SJWA-IgG水平高于同期相应对照组血清中的特异性IgG水平。结论用S.j童虫细胞接种母鼠所诱生的保护性免疫能传给子代,进而使子代鼠产生针对后天初次感染的保护性免疫。 展开更多
关键词 日本血吸虫 童虫细胞 昆明鼠 BALB/C鼠 子代鼠
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日本血吸虫童虫期体被蛋白Th细胞表位预测及初步鉴定 被引量:5
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作者 陈雷 杨健美 +4 位作者 陈虹 苑纯秀 邵东华 冯新港 林矫矫 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期87-92,共6页
目的预测并鉴定日本血吸虫童虫体被蛋白分子的Th细胞表位。方法利用在线服务器分别对有关序列进行跨膜区与信号肽的预测分析;采用结合基序扫描与计分矩阵等算法,以及基于多种分子动力学算法的配体受体相互对接的分子建模方法等进行Th细... 目的预测并鉴定日本血吸虫童虫体被蛋白分子的Th细胞表位。方法利用在线服务器分别对有关序列进行跨膜区与信号肽的预测分析;采用结合基序扫描与计分矩阵等算法,以及基于多种分子动力学算法的配体受体相互对接的分子建模方法等进行Th细胞表位预测;人工合成肽采用以多聚赖氨酸为核心的含4个表位肽分支臂的复合抗原多肽;表位肽刺激免疫鼠脾淋巴细胞增殖效果的鉴定采用改良的MTT法。结果从373条日本血吸虫肝期童虫体被蛋白序列中筛得14条具有开放阅读框及信号肽结构的序列;预测得到至少与小鼠的1个MHCⅡ类分子结合的5个15肽表位序列;淋巴细胞增殖试验初步鉴定获得了1个SSLVISYSTVDRLVC(AY815893)候选体被蛋白Th细胞表位。结论初步鉴定了1个潜在的体被蛋白Th细胞表位,为进一步筛选抗血吸虫保护性Th细胞表位提供了理论和实验依据。 展开更多
关键词 日本血吸虫 童虫 体被蛋白 Th细胞表位 筛选
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血吸虫童虫生长发育及其机制的研究进展 被引量:2
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作者 唐春莲 董惠芬 蒋明森 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2012年第5期591-593,606,共4页
血吸虫童虫是宿主免疫系统攻击的重要靶标,包括皮肤型、肺型和肝门型童虫。宿主分子对童虫生长发育具有重要作用。童虫生长发育机制包括免疫调节、信号转导、性别发育及凋亡等。肌动蛋白、组织蛋白酶、烯醇化酶和葡萄糖基转移酶等分子... 血吸虫童虫是宿主免疫系统攻击的重要靶标,包括皮肤型、肺型和肝门型童虫。宿主分子对童虫生长发育具有重要作用。童虫生长发育机制包括免疫调节、信号转导、性别发育及凋亡等。肌动蛋白、组织蛋白酶、烯醇化酶和葡萄糖基转移酶等分子为血吸虫童虫生长发育的重要分子。本文对血吸虫童虫生长发育及其机制的研究进展做一综述。 展开更多
关键词 血吸虫 血吸虫童虫 生长发育 免疫调节 重要分子
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