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向日葵HaFATA基因的生物信息学和表达分析
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作者 周菲 《安徽农业科学》 CAS 2024年第7期96-98,共3页
FATA编码脂酰-酰基载体蛋白硫酯酶A,将质体中以脂酰-ACP形式存在的脂肪酸水解成游离的脂酰-CoA和酰基载体蛋白。为了解向日葵HaFATA基因编码蛋白的结构、功能及基因表达特性,对HaFATA编码蛋白进行生物信息学和基因表达分析。预测HaFATA... FATA编码脂酰-酰基载体蛋白硫酯酶A,将质体中以脂酰-ACP形式存在的脂肪酸水解成游离的脂酰-CoA和酰基载体蛋白。为了解向日葵HaFATA基因编码蛋白的结构、功能及基因表达特性,对HaFATA编码蛋白进行生物信息学和基因表达分析。预测HaFATA为碱性且为亲水性蛋白,二级结构主要是无规则卷曲,预测亚细胞定位于叶绿体。系统进化分析表明,HaFATA与同属菊科的莴苣(Lactuca sativa L.)和水飞蓟(Silybum marianum L.)FATA进化关系近,序列相似性分别为90%、87%。HaFATA表达分析结果显示,HaFATA在向日葵种子中表达最高,其次为在管状花和叶中,在茎、舌状花和根中不表达,在发育的种子中,HaFATA除在开花后12 d表达相对较低,在其他6个发育时期表达均较高,表明其对于种子发育和油脂积累可能具有重要作用。 展开更多
关键词 向日葵 脂酰-酰基载体蛋白硫酯酶 脂肪酸 生物信息学 表达分析
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植物油脂合成途径及酰基载体蛋白基因的特性 被引量:1
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作者 李红军 张党权 谭晓风 《经济林研究》 2007年第2期92-94,共3页
植物油脂作为主要的食用油,其生物合成途径及相关基因的克隆已成为研究热点.就植物油脂生物合成途径和酰基载体蛋白基因特性的研究情况进行了综述.
关键词 植物油脂 脂肪酸 合成途径 酰基载体蛋白基因 综述
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以脂肪酸合成酶FabH为靶标的化合物体外抗结核作用的初步研究
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作者 吴雪琼 张学辉 +5 位作者 张俊仙 龙隆 于红 陆阳 王莉莉 李松 《中国防痨杂志》 CAS 2007年第2期147-150,共4页
目的研究结核分枝杆菌脂肪酸合成酶FabH为靶标的化合物的体外抗结核活性,研制新的高效、安全的抗结核药物。方法以平板滤纸法测定化合物对草分枝杆菌的抑菌圈,以试管抑菌法检测化合物对结核分枝杆菌药物敏感株和耐多药分离株的抑制作... 目的研究结核分枝杆菌脂肪酸合成酶FabH为靶标的化合物的体外抗结核活性,研制新的高效、安全的抗结核药物。方法以平板滤纸法测定化合物对草分枝杆菌的抑菌圈,以试管抑菌法检测化合物对结核分枝杆菌药物敏感株和耐多药分离株的抑制作用。结果18种化合物在500μmol/L浓度时对草分枝杆菌的抑菌圈为1.8~2.4cm,其中7种化合物在250μmol/L和125μmol/L浓度时对草分枝杆菌的抑菌圈为1.5~2.2cm。结核分枝杆菌H37Rv标准株在分别含3mmol/L的18种化合物的培养基上培养2周时,绝大多数含化合物培养基上未见细菌生长;培养4周时,No.115、No.131、No.128、No.129、No.137化合物的抑菌作用较明显。结核分枝杆菌耐多药分离株HB240在分别含3mmol/L的11种化合物的培养基上培养2周和4周时,No.115化合物均显示明显的抑菌作用。结论以脂肪酸合成酶FabH为靶标的大多数化合物在体外都具有不同程度的抗结核活性,尤其是No.115化合物对草分枝杆菌、结核分枝杆菌敏感株和耐药株都具有明显的抑制作用。 展开更多
关键词 FabH 脂肪酸合成酶 β-酮酰基-酰基运载蛋白合成酶Ⅲ 抗结核作用 分枝杆菌 结核
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裂殖壶菌酰基载体蛋白(ACP)基因的克隆与表达 被引量:7
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作者 李志平 江贤章 +2 位作者 田宝玉 舒正玉 黄建忠 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期256-260,共5页
ACP(Acyl carrier protein,酰基载体蛋白)参与高度不饱和脂肪酸的PKS(Polyketide synthase)生物合成途径。从Schizochytrium sp.FJU-512 cDNA文库中获得了ACP基因的cDNA克隆。该序列开放读码框全长429bp,编码142个氨基酸,等电点为5.04,... ACP(Acyl carrier protein,酰基载体蛋白)参与高度不饱和脂肪酸的PKS(Polyketide synthase)生物合成途径。从Schizochytrium sp.FJU-512 cDNA文库中获得了ACP基因的cDNA克隆。该序列开放读码框全长429bp,编码142个氨基酸,等电点为5.04,具有4′-磷酸泛酰巯基乙胺(4′-PP)的结合位点。利用BamHⅠ/HindⅢ双酶切,并连接到原核表达载体pET-30a,构建了pET-30a/acp表达载体,转化宿主菌E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达。SDS-PAGE分析表明该蛋白得到高效表达。 展开更多
关键词 裂殖壶菌 酰基载体蛋白 二十二碳六烯酸
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植物脂肪酸合成及其在基础抗性和生物固氮中的作用研究进展 被引量:10
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作者 徐瑞新 王洁 +7 位作者 任国勇 卢一鹏 王昊 鲁玲 廖婷婷 朱凌清 黄磊 王俊 《湖北农业科学》 2016年第22期5729-5734,共6页
综述了植物脂肪酸合成、酰基载体蛋白在脂肪酸合成中的作用、脂肪酸在基础抗性和生物固氮中的作用,旨在为植物遗传育种及脂肪酸合成及功能相关分子机制研究提供参考。
关键词 酰基载体蛋白 脂肪酸合成 基础抗性 根瘤固氮
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集胞藻酰基载体蛋白基因过量表达对脂肪酸合成的影响 被引量:1
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作者 路晓媛 钟怀荣 +3 位作者 夏志洁 曹月蕾 陈高 戴美学 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第7期1253-1262,共10页
酰基载体蛋白(ACP)是微生物脂肪酸生物合成途径中的一个关键蛋白。为了促进集胞藻脂肪酸的积累,以集胞藻PCC6803为研究对象,成功构建了用于过量表达ACP(ssl 2084)基因的同源重组质粒ssl 2084(+)并在集胞藻PCC6803中进行转化。将ssl 2084... 酰基载体蛋白(ACP)是微生物脂肪酸生物合成途径中的一个关键蛋白。为了促进集胞藻脂肪酸的积累,以集胞藻PCC6803为研究对象,成功构建了用于过量表达ACP(ssl 2084)基因的同源重组质粒ssl 2084(+)并在集胞藻PCC6803中进行转化。将ssl 2084(+)突变株进行DNA水平和蛋白质水平鉴定,结果表明,ssl 2084基因已经得到过量表达。利用气相色谱—质谱联用技术(GC-MS)对突变藻株在不同温度下脂肪酸的含量及组分进行检测,发现在30℃培养条件下ssl 2084(+)突变株中C12:0、C16:0和C18:0的含量显著增加,分别为1.50、8.74和0.60 mg·g^-1,与野生型相比分别增加了54.71%、50.82%和155.86%;在20℃低温胁迫培养条件下,C12:0、C16:0和C18:0的含量分别达到1.70、11.85和2.31 mg·g^-1,与野生型相比分别增加了31.94%、47.35%和39.90%。以上结果表明,在集胞藻PCC6803中过表达ssl 2084基因能提高集胞藻中的中长链脂肪酸的含量,低温条件使得集胞藻中的中长链脂肪酸的含量进一步提高。 展开更多
关键词 集胞藻PCC6803 酰基载体蛋白 同源重组 中长链脂肪酸
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Cloning and characterization of a stearoyl-ACP desaturase gene from Jatropha curcas 被引量:4
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作者 罗通 马丹炜 +4 位作者 徐莺 邓骛远 肖猛 卿人韦 陈放 《Journal of Shanghai University(English Edition)》 CAS 2007年第2期182-188,共7页
Using degenerate primers and RT-PCR, RACE techniques, a 1491 bp cDNA segment of stearoyl-acyl carrier protein desaturase (SAD) is cloned from developing seeds of Jatropha curcas L. The segment contains a 1191 bp of ... Using degenerate primers and RT-PCR, RACE techniques, a 1491 bp cDNA segment of stearoyl-acyl carrier protein desaturase (SAD) is cloned from developing seeds of Jatropha curcas L. The segment contains a 1191 bp of complete open reading frame (ORF). Analysis in the BLAST on NCBI shows that Jatropha curcas SAD (JSAD) gene encodes a protein precursor composed of a signal peptide of 33 amino acids and a mature peptide of 363 amino acids. The homological analysis shows that JSAD has high level of homology both in nucleotide sequence and in amino acid sequence to other plants SADs. The nucleotide and peptide identity of JSAD to Ricinus communis SAD (RSAD) is up to 89% and 96.2% respectively. Molecular modeling of JSAD indicates that its three-dimensional structure strongly resembled the crystal structure of RSAD. 展开更多
关键词 Jatropha curcas stearoyl-acyl carrier protein desaturase fatty acid gene cloning bioinformatics analysis
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裂殖壶菌丙二酸单酰转移酶(MAT)基因的克隆与序列分析
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作者 李志平 黄建忠 《氨基酸和生物资源》 CAS 2014年第3期65-71,共7页
二十二碳六烯酸(DHA)是一种重要的多不饱和脂肪酸,裂殖壶菌(Schizochytrium)因富含DHA成为当前的研究热点。丙二酸单酰转移酶(MAT)是该菌合成DHA的关键酶。以Schizochytriumsp.FJU-512cDNA文库中的EST序列contig417(GenBank accession N... 二十二碳六烯酸(DHA)是一种重要的多不饱和脂肪酸,裂殖壶菌(Schizochytrium)因富含DHA成为当前的研究热点。丙二酸单酰转移酶(MAT)是该菌合成DHA的关键酶。以Schizochytriumsp.FJU-512cDNA文库中的EST序列contig417(GenBank accession No.EF483907)为基础,获得了丙二酸单酰转移酶基因的DNA序列和cDNA序列。序列分析表明,cDNA序列与DNA序列完全一致,开放阅读框全长1 176bp,编码391个氨基酸,且具备该类酶氨基酸序列的两个经典保守区。对该蛋白进行系统发育分析,构建进化树,结果显示,该蛋白同Schizochytriumsp.TIO01的丙二酰辅酶A-ACP转移酶(MCAT)亲缘关系最近。 展开更多
关键词 裂殖壶菌 丙二酸单酰转移酶
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融合酰基载体蛋白可增强大肠杆菌重组蛋白的可溶性和热稳定性 被引量:1
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作者 刘延娟 李旭娟 +4 位作者 袁航 刘娴 高艳秀 龚明 邹竹荣 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期115-123,共9页
目前,蛋白质可溶性和热稳定性已成为重组蛋白高效生产、功能应用和长久保存不可回避的问题,而使用酸性蛋白融合标签可能是其有效解决策略。酰基载体蛋白(ACP)是脂肪酸生物合成途径的必要组分,在大肠杆菌中为一个高度酸性的小分子多肽。... 目前,蛋白质可溶性和热稳定性已成为重组蛋白高效生产、功能应用和长久保存不可回避的问题,而使用酸性蛋白融合标签可能是其有效解决策略。酰基载体蛋白(ACP)是脂肪酸生物合成途径的必要组分,在大肠杆菌中为一个高度酸性的小分子多肽。将大肠杆菌ACP与几个热不稳定的靶蛋白[如小桐子抗坏血酸过氧化物酶1(Jc APX1)、大豆核酮糖-1,5-二磷酸羧化/加氧酶的活化酶2(GmRCA2)、大肠杆菌高丝氨酸O-转琥珀酰酶(EcMetA)]进行基因融合并使其在大肠杆菌中诱导表达,发现ACP融合能显著增强这些重组靶蛋白的可溶性。另外,对重组蛋白的热处理和酶活性分析发现,融合ACP还能极大提高这三个靶蛋白的热稳定性,并有效保护JcAPX1酶活免遭热失活,使其耐热性提高了至少2℃。ACP的这种效果推测可能与其高酸度特性有关,可以作为一个新的功能酸性融合标签。 展开更多
关键词 酰基载体蛋白 酸性融合标签 重组蛋白 可溶性 热稳定性
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Ⅱ型脂肪酸生物合成途径机制和药物发现研究进展 被引量:6
10
作者 周甲申 张琳 张良 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1383-1398,共16页
Ⅱ型脂肪酸合成途径(FAS-Ⅱ)是细菌和植物体内进行饱和/不饱和脂肪酸合成的唯一必需途径.FAS-Ⅱ由一系列单一基因编码的可溶性酶组成,通过依次循环式的识别和催化由酰基载体蛋白(ACP)共价携带的脂肪酸碳链底物来实现特定长度饱和/不饱... Ⅱ型脂肪酸合成途径(FAS-Ⅱ)是细菌和植物体内进行饱和/不饱和脂肪酸合成的唯一必需途径.FAS-Ⅱ由一系列单一基因编码的可溶性酶组成,通过依次循环式的识别和催化由酰基载体蛋白(ACP)共价携带的脂肪酸碳链底物来实现特定长度饱和/不饱和脂肪酸碳链的延长和合成.由于FAS-Ⅱ在细菌生理活动中具有不可或缺的作用,同时与哺乳动物脂肪酸合成途径FAS-Ⅰ存在显著差异, FAS-Ⅱ的酶系长久以来都被公认为是重要的抗菌药物靶标群.因此,阐明该途径酶系的催化调控机制,发展靶向FAS-Ⅱ酶系的抗菌药物是该领域的研究重点.综述FAS-Ⅱ近年的分子机制研究和药物发现进展有助于进一步了解FAS-Ⅱ的生物学功能并推动全新抗菌药物的发现. 展开更多
关键词 Ⅱ型脂肪酸合成途径 酰基载体蛋白(ACP) 底物识别 催化调控 抑制剂发现
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酰基载体蛋白在不同代谢通路中的作用 被引量:1
11
作者 陶永佳 薛永常 《生命的化学》 CAS CSCD 2016年第6期914-917,共4页
酰基载体蛋白属于载体蛋白大家族,其三级结构非常保守。在细胞新陈代谢过程中,酰基载体蛋白关联各种大的蛋白复合体酶系,能够将酰基链从一个酶中心位点转运到另一个酶的中心位点,同时可作为各种天然产物的酰基供体,与脂肪酸合成酶途径... 酰基载体蛋白属于载体蛋白大家族,其三级结构非常保守。在细胞新陈代谢过程中,酰基载体蛋白关联各种大的蛋白复合体酶系,能够将酰基链从一个酶中心位点转运到另一个酶的中心位点,同时可作为各种天然产物的酰基供体,与脂肪酸合成酶途径和聚酮合酶途径息息相关。研究酰基载体蛋白的结构和功能,为指导现有的合成途径和重新设计新的合成途径来合成天然或非天然产物提供依据和基础。 展开更多
关键词 酰基载体蛋白 脂肪酸合成酶 聚酮合酶 代谢通路
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细菌3-酮脂酰ACP还原酶研究进展 被引量:2
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作者 毛雅慧 李峰 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期931-939,共9页
3-酮脂酰ACP还原酶(FabG)在细菌中广泛存在并且十分保守,已经发现的所有FabG及其同系物都具有类似的催化活性中心序列,隶属于短链醇脱氢酶/还原酶(SDRs)超家族成员。它是Ⅱ型脂肪酸合成反应中的关键酶,将3-酮脂酰ACP还原为3-羟脂酰ACP多... 3-酮脂酰ACP还原酶(FabG)在细菌中广泛存在并且十分保守,已经发现的所有FabG及其同系物都具有类似的催化活性中心序列,隶属于短链醇脱氢酶/还原酶(SDRs)超家族成员。它是Ⅱ型脂肪酸合成反应中的关键酶,将3-酮脂酰ACP还原为3-羟脂酰ACP多以NADPH作为辅酶。从搜集的文献来看,国内外针对不同细菌中3-酮脂酰ACP还原酶同系物的研究报道体现了其多样性的特点。但是,近年来,该方面的专题综述十分少见。本文主要对3-酮脂酰ACP还原酶的结构特征、在脂肪酸合成和其他方面的生物学功能,以及以该酶为作用靶点的抑菌剂等方面进行概述,以期为将来3-酮脂酰ACP还原酶的深入研究提供理论参考。 展开更多
关键词 3-酮脂酰ACP还原酶 多样性 Ⅱ型脂肪酸合成系统
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