不同炮制时间的荆芥炭色度值与多项指标的相关性研究

目的:研究不同炮制时间(0~40 min,下同)的荆芥炭色度值与多项指标的相关性,揭示荆芥炭在炮制过程中的质量变化规律,确定炮制终点时间。方法:测定不同炮制时间的荆芥炭饮片中醇溶性浸出物的含量;建立荆芥饮片及不同炮制时间荆芥炭饮片的超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱并进行相似度评价,通过与对照品比对确认色谱峰;采用相同的UPLC条件测定不同炮制时间荆芥炭饮片中指标成分(橙皮苷、迷迭香酸、胡薄荷酮)的含量;运用色差仪测定不同炮制时间荆芥炭饮片的色度值,以炮制0 min样品为对照,计算总色值(E)和总色差值(ΔE)。对荆芥炭饮片中醇溶性浸出物、指标成分含量及色谱峰峰面积与色度值参数进行Pearson相关性分析、聚类分析和正交偏最小二乘法判别分析。确定荆芥炭炮制终点时间并验证。结果:随着炮制时间的延长,荆芥炭饮片中醇溶性浸出物的含量逐渐降低。12批荆芥饮片中共标定17个色谱峰,与对照指纹图谱的相似度均大于0.9。不同炮制时间荆芥炭饮片中共标定21个色谱峰,与炮制0 min样品图谱的相似度随着炮制时间延长而降低,其中炮制18 min后的相似度均低于0.9。确认色谱峰峰9为橙皮苷、峰10为迷迭香酸、峰17为胡薄荷酮。含量和色度值测定结果显示,随着炮制时间的延长,橙皮苷、迷迭香酸、胡薄荷酮含量均逐渐降低,荆芥炭饮片粉末颜色L、b、E值均逐渐减小,a、ΔE值均逐渐增大。Pearson相关性分析显示,荆芥炭饮片中醇溶性浸出物含量、橙皮苷含量、迷迭香酸含量、胡薄荷酮含量以及15个色谱峰(峰2、7~15、17~21)的峰面积与E值成显著正相关(P<0.01),5个色谱峰(峰1、3~6)的峰面积与E值成显著负相关(P<0.01),而峰16的峰面积与E值无关(P>0.05)。聚类分析结果显示,不同炮制时间的荆芥炭饮片被分成2类,炮制0~16 min为第1类、18~40 min为第2类。正交偏最小二乘法判别分析结果显示,荆芥炭饮片的峰6峰面积(2.800 75)、L值(2.327 54)、峰3峰面积(1.793 39)、b值(1.735 78)、峰5峰面积(1.244 04)的变量投影重要性(VIP值)均大于1。荆芥炭炮制终点时间为18 min;3次验证实验结果显示,荆芥炭饮片的L、a、b值分别为20.22~22.00、4.44~7.67、9.78~13.00,ΔE为13.50~14.12。结论:不同炮制时间荆芥炭饮片的色度值与其醇溶性浸出物含量、橙皮苷含量、迷迭香酸含量、胡薄荷酮含量以及20个色谱峰的峰面积密切相关。建议荆芥炭炮制终点时间为18 min。