体外培养的大鼠Schwann细胞神经生长因子和脑源性神经营养因子的表达

目的:研究体外培养的Schwann细胞神经生长因子(NGF)和脑源性神经营养因子(BDNF)的表达。方法:用细胞培养技术,培养新生SD大鼠Schwann细胞,传代后用ABC免疫细胞化学法检测Schwann细胞的NGF、BDNF反应。结果:体外培养的Schwann细胞立体感强、折光性好,细胞为梭形、椭圆形或三角形,NGF、BDNF免疫反应为阳性。结论:体外培养的Schwann细胞能表达NGF、BDNF。

过表达肝细胞生长因子的内皮祖细胞移植促进坐骨神经挤压伤修复的研究

目的探讨过表达肝细胞生长因子(HGF)慢病毒转染的内皮祖细胞对大鼠坐骨神经损伤的修复作用。方法体外实验方面,提取大鼠骨髓的内皮祖细胞(EPC)并利用DiI-acLDL和FITC-UEA-1双染法进行鉴定。EPC转染慢病毒后采用qRT-PCR实验检测HGF基因表达水平。采用CCK-8实验、Transwell实验以及血管形成实验对转基因EPC的体外功能进行评估。体内实验方面,随机将25只SD大鼠平均分为5组,即对照组(Con组)、正常EPC组(N-EPC组)、空载病毒转染EPC组(LV-NC组)、过表达HGF病毒转染EPC组(LV-HGF组)和假手术组(Sham组)。各组大鼠暴露出右侧坐骨神经后,在坐骨神经分叉处上方10 mm处使用止血钳形成2 mm宽的坐骨神经挤压伤,假手术组在暴露神经后不做处理;分别将转染空载慢病毒EPC、转染过表达HGF慢病毒EPC或正常EPC与基质胶按1∶1体积比混合后注入伤处神经外膜下,而对照组不注入EPC。术后4周,运用Catwalk检测大鼠运动功能的恢复情况,电生理实验检测神经传导功能的恢复情况,透射电镜观察髓鞘厚度,甲苯胺蓝染色观察神经纤维密度,腓肠肌湿重称重检测肌肉萎缩程度,马松染色检测各组手术侧的腓肠肌肌纤维面积。结果体外实验结果显示,与正常EPC组相比,LV-HGF组EPC在CCK8实验中细胞增殖速度更快(P<0.05),Transwell实验中细胞迁移速率更高(P<0.01),在血管形成实验中形成更多血管状结构(P<0.01)。动物实验结果显示,LV-HGF组的坐骨神经功能指数值显著高于其他3组(Con组,P<0.01;N-EPC组,P<0.01;LV-NC组,P<0.01);复合肌肉动作电位波幅更高(Con组,P<0.01;N-EPC组,P<0.05;LV-NC组,P<0.05);再生坐骨神经的髓鞘较厚(Con组,P<0.01;N-EPC组,P<0.01;LV-NC组,P<0.01);有髓神经纤维密度更高(Con组,P<0.01;N-EPC组,P<0.05;LV-NC组,P<0.05);腓肠肌湿重比值更高(Con组,P<0.01;N-EPC组,P<0.01;LV-NC组,P<0.01);肌纤维平均面积较大(Con组,P<0.01;N-EPC组,P<0.05;LV-NC组,P<0.05);LV-HGF组以上实验结果与Sham组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。结论过表达HGF基因可以增强EPC的增殖、迁移及分化功能。在坐骨神经挤压伤后,HGF基因转染的EPC相较于正常EPC,能更明显地促进了受损周围神经结构和功能的恢复,其机制与促进受损周围神经的轴突再生及髓鞘形成有关。

鼠神经生长因子联合低剂量重组人促红细胞生成素对早产儿脑损伤后神经发育的影响

目的:探讨鼠神经生长因子(mNGF)联合低剂量重组人促红细胞生成素(rh Epo)对早产儿脑损伤后神经发育的影响。方法:选取2021年3月~2022年3月期间某院收治的200例脑损伤早产儿作为研究对象,依据随机数字表法分为对照组和观察组,每组100例。两组患儿均给予营养支持、水电解质纠正、血糖、血压维持等常规治疗,对照组在常规治疗基础上给予注射用鼠神经生长因子,观察组在对照组治疗基础上静脉注射低剂量重组人促红素注射液(CHO细胞)。比较两组患儿脑损伤相关因子[神经元特异性烯醇化酶(NSE)、S100钙结合蛋白β(S100β)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)、8-异前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)]、炎症因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-18(IL-18)、Toll样受体4(TLR4)]水平、神经发育异常情况、智能等级及不良反应发生情况。结果:治疗后,两组患儿NSE、S100β、8-OHdG、8-iso-PGF2α水平均降低(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05);两组患儿TNF-α、IL-18、TLR4水平均降低(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05);观察组患儿神经发育异常项目≥3项及异常项目≥1项的发生率均低于对照组(P<0.05);两组患儿智能等级均呈升高趋势(P<0.05),且观察组升高趋势更明显(P<0.05);两组患儿不良反应总发生率比较无统计学差异(P>0.05)。结论:在常规治疗基础上联用m NGF、低剂量rhEpo可有效降低患儿脑损伤相关因子水平及神经发育异常率,提高智能等级,且未增加不良反应的发生风险。

3.0T超导磁共振成像和单核细胞与高密度脂蛋白比值、成纤维细胞生长因子与糖尿病周围神经病变的关系

目的:探究3.0T超导磁共振成像(MRI)及成纤维细胞生长因子(FGF21)、单核细胞/高密度脂蛋白比值(MHR)与糖尿病周围神经病变(DPN)的相关性。方法:选取2021年1月至2022年12月新疆医科大学附属中医医院诊治的80例2型糖尿病(T2DM)患者,根据是否合并DPN将其分为DPN组(44例)和非DPN(NDPN)组(36例)。两组均采用3.0T超导MRI行磁共振(MR)扩散张量成像技术检查,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清FGF21、MHR水平。比较两组MR扩散张量成像检查参数中视神经各向异性分数(FA)、平均弥散系数(MD)、平行扩散系数(λ_(∥))及垂直扩散系数(λ_(⊥))值,以及血清FGF21、MHR水平差异。采用Spearman秩相关分析探究MR弥散张量成像参数及FGF21、MHR与DPN的相关性。结果:两组患者的性别、体质量指数(BMI)比较,差异无统计学意义(P>0.05),DPN组患者的年龄、病程均显著高于NDPN组,差异有统计学意义(t=5.039、7.852,P<0.05),FA值显著低于NDPN组,MD、λ_(∥)及λ_(⊥)值显著高于NDPN组,差异有统计学意义(t=8.934、10.459、12.233、4.640,P<0.05);DPN组血清FGF21、MHR水平显著高于NDPN组,差异有统计学意义(t=3.286、24.509,P<0.05)。Spearman秩相关性结果显示,患者的年龄、病程、MD、λ_(∥)、λ_(⊥)值、FGF21及MHR水平与DPN呈显著正相关(r=0.458、0.666、0.836、0.799、0.445、0.282、0.864,P<0.05),FA与DPN呈显著负相关(r=-0.753,P<0.05)。结论:MR弥散张量成像相关参数及FGF21、MHR水平均与DPN存在显著相关性,且患者的年龄、病程也与DPN的发生有关,需引起临床的重视。

血清转化生长因子β1与白细胞介素6水平对原发性干燥综合征并发神经系统病变的评估作用

分析白细胞介素6、血清转化生长因子β1在原发性干燥综合征同时合并神经系统病变中的预测价值。方法 采集我院接纳的原发性干燥综合征病例中的86例参与研究,时间段为2021年7月到2023年6月,按照患者是否出现并发神经系统病变进行分组,即研究组(26例)和对照组(60例),针对两组患者自身抗体、生化指标、病理特征以及基础资料展开比较和分析。结果 较之于对照组而言,研究组补体C4指标下降更为显著,而IL6、TGFβ1以及ESSDAI得分等指标显著提升,组间差异经过分析存在统计学意义(P<0.05),IL6以及TGFβ1在并发神经系统病变中的预测价值较高,且两者进行联合检验可以提升整体预测效果,组间差异经过分析存在统计学意义(P<0.05),和对照组相比较,研究组生化指标高密度脂蛋白、间接胆红素显著更低,而肾小球滤过率水平却显著更高,组间差异经过分析存在统计学意义(P<0.05)。结论 IL6以及TGFβ1可以当作原发性干燥综合征并发神经系统病变预测评估的关键生物标志物之一,可以给早期的治疗和诊断提供科学依据,值得进行推广。

神经生长因子促进兔骨髓间充质干细胞软骨分化并抑制肥大分化

背景:神经生长因子是一种诱导神经生长的蛋白质,能调节间充质干细胞的增殖、分化等生物学行为。目的:探讨神经生长因子对骨髓间充质干细胞成软骨分化的促进作用。方法:分离培养兔骨髓间充质干细胞,将神经生长因子通过慢病毒转染的方式转染到骨髓间充质干细胞,以转染空载病毒为对照,CCK-8法、细胞划痕实验、茜素红染色、Western blot检测神经生长因子对骨髓间充质干细胞增殖、迁移、肥大分化、成软骨分化的影响。为进一步探讨神经生长因子对骨髓间充质干细胞成软骨分化的促进作用,转染空载病毒和转染神经生长因子的骨髓间充质干细胞分别加入白细胞介素1β诱导培养14 d,Western blot检测成软骨分化、肥大分化相关蛋白的表达。结果与结论:(1)CCK-8检测结果表明神经生长因子对骨髓间充质干细胞增殖没有明显影响;(2)与对照组相比,过表达神经生长因子后细胞迁移能力增强,成软骨相关蛋白Ⅱ型胶原、SOX9的表达上调(P<0.05),肥大相关蛋白Ⅹ型胶原、RUNX2的表达下调(P<0.05);(3)与空载病毒+白细胞介素1β组相比,过表达神经生长因子+白细胞介素1β组成软骨相关蛋白Ⅱ型胶原、SOX9的表达上调(P<0.05),肥大相关蛋白Ⅹ型胶原、RUNX2的表达下调(P<0.05);(4)结果表明,神经生长因子可促进骨髓间充质干细胞成软骨分化。

左乙拉西坦联合鼠神经生长因子治疗脑卒中后癫痫对患者神经细胞因子和认知功能的影响

目的探讨脑卒中后癫痫患者应用左乙拉西坦联合鼠神经生长因子治疗对其神经细胞因子和认知功能的影响。方法将2021年2月至2023年5月河南省南阳市第一人民医院收治的脑卒中后癫痫90例,依据治疗方法不同分为对照组(30例)、干预组(30例)、试验组(30例)。对照组实施左乙拉西坦治疗,干预组实施鼠神经生长因子治疗,试验组实施左乙拉西坦联合鼠神经生长因子治疗,治疗时间为1个月。对比3组患者临床疗效,治疗前后左大脑中动脉血流、右大脑中动脉血流、基底动脉血流、神经细胞因子[胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、脑源性神经营养因子(BDNF)、S-100β蛋白(S-100β)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)]水平,治疗前及治疗2、4周后炎症因子[微小核糖核酸-222(miR-222)、白细胞介素-6(IL-6)]水平、认知功能[蒙特利尔认知评估量表(MoCA)、简易智力状态检查量表(MMSE)]评分。结果经过临床治疗试验组总有效率高于对照组、干预组(χ^(2)=7.081,P<0.05),3组治疗后左大脑中动脉血流、右大脑中动脉血流、基底动脉血流相较于治疗前升高,试验组相较于对照组、干预组更高(F=42.600、23.662、21.116,P<0.05),3组治疗后GFAP、S-100β、NSE相较于治疗前降低,试验组比对照组更低;BDNF相较于治疗前升高,试验组相较于对照组、干预组更高(F=29.842、97.544、13.495、78.796,P<0.05),3组治疗2、4周后miR-222、IL-6水平相较于治疗前降低,试验组相较于对照组、干预组更高(F=12.572、15.907,12.286、26.380,P<0.05),3组治疗2、4周后MoCA、MMSE评分相较于治疗前升高,试验组相较于对照组、干预组更高(F=12.572、15.907,12.286、26.380,P<0.05)。结论左乙拉西坦联合鼠神经生长因子治疗应用于脑卒中后癫痫患者中,可提高疗效,促进脑部血液代谢,改善神经功能,减轻机体的炎症程度,缓解认知损伤。

神经生长因子通过促进少突胶质前体细胞分化改善脑组织缺血低氧的实验研究

目的探讨神经生长因子(NGF)改善脑组织低氧缺血状态作用机制。方法本研究通过培养混合神经干细胞(NSC)衍生的少突胶质细胞前体细胞(OPC)/星形胶质细胞培养来阐明神经生长因子在整个少突胶质细胞(OL)分化过程中的作用,并探讨其在缺血低氧状态条件下对OPC的保护作用。结果共聚焦显微镜检查结果显示,GW-44175610μM处理组细胞凝聚核百分比显著高于0.1μM、1μM及NGF抗体组(P<0.05)。抗NGF抗体处理组及GW-4417561μM处理组分化末期OPC百分比显著高于其他组(P<0.05)。抗NGF抗体处理组及GW-44175610μM处理组成熟OL及成髓鞘OPC百分比显著低于其他组(P<0.05)。抗NGF抗体处理组及GW-44175处理组NG2-阳性细胞比例显著高于其他组(P<0.05);抗NGF抗体处理组及GW-44175处理组CNPase/MBP染色细胞比例显著低于其他组(P<0.05);GW-441756处理组GFAP染色细胞比例显著高于其他组(P<0.05)。共聚焦显微镜检查结果显示,OGD处理组星形胶质细胞NGF mRNA表达水平显著高于无OGD处理组(P<0.05);NGF处理组细胞核内蛋白激酶B(AKT)荧光强度水平显著高于无NGF处理组(P<0.05);NGF处理组细胞核中磷酸化AKT荧光强度显著高于无NGF处理组、神经生长因子抗体(Ab-NGF)处理组及原肌球蛋白受体激酶A(TRKA)拮抗剂组(P<0.05)。结论NGF在体外细胞培养中与星形胶质细胞的相互作用可调节OPC生理分化;同时在缺血低氧状态下其对于OPC存活及OL成熟具有明确保护作用。

血清成纤维细胞生长因子2、脑源性神经营养因子水平变化与产后抑郁症的关系

目的探究产后抑郁症(PPD)患者血清成纤维细胞生长因子2(FGF2)和脑源性神经营养因子(BDNF)水平的变化,并分析其与病情严重程度的关系。方法选取2020年10月至2022年10月丽水市第二人民医院收治的96例PPD患者作为研究对象,设为PPD组。另随机选取同期96例正常产妇设为对照组。记录两组的基线资料。采用酶联免疫吸附试验法检测血清FGF2和BDNF水平,采用爱丁堡产后抑郁量表(EPDS)评价PPD病情严重程度。采用Pearson法分析PPD患者血清FGF2、BDNF水平与EPDS评分的相关性;采用多因素Logistic回归分析影响PPD发生的可能因素。结果PPD组产前抑郁比例、妊娠期抑郁比例、EPDS评分、焦虑自评量表(SAS)评分及抑郁自评量表(SDS)评分均高于对照组(P<0.05);PPD组血清FGF2和BDNF水平均低于对照组(P<0.05)。PPD患者血清FGF2水平与EPDS评分呈负相关(r=-0.564,P<0.05),血清BDNF水平与EPDS评分呈负相关(r=-0.493,P<0.05);FGF2、BDNF是产妇发生PPD的保护因素(P<0.05),产前抑郁及妊娠期抑郁是产妇发生PPD的危险因素(P<0.05)。结论FGF2、BDNF在PPD患者血清中低表达,二者均与EPDS评分呈负相关,在PPD的病情缓解方面可能具有一定临床应用价值。

桥本甲状腺炎病儿血清肿瘤坏死因子受体相关因子6和神经生长因子受体水平与免疫水平及甲状腺功能的相关性

目的探究桥本甲状腺炎(HT)病儿血清肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)和神经生长因子受体(NGFR)水平与免疫水平及甲状腺功能的相关性。方法选取2021年3月至2022年3月在承德市妇幼保健院就诊的HT病儿104例作为HT组,根据甲状腺功能分为HT亢进组30例,HT正常组38例,HT减退组36例。采用随机数字表法选取同期在儿科门诊体检健康的儿童95例作为对照组。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清辅助型T细胞1(Th1)因子中的白细胞介素2(IL-2)、γ-干扰素(IFN-γ)、辅助型T细胞2(Th2)因子中的白细胞介素4(IL-4)以及TRAF6、NGFR水平;采用Pearson法分析血清TRAF6、NGFR表达以及二者与甲状腺功能指标、炎症因子的相关性。结果HT正常组、HT减退组和HT亢进组TRAF6的表达水平显著高于对照组[(25.12±3.36)µg/L、(28.16±3.48)µg/L、(22.65±3.27)µg/L比(19.25±2.42)µg/L],HT正常组和HT减退组表达水平显著高于HT亢进组,HT减退组显著高于HT正常组(P<0.05);HT正常组、HT减退组和HT亢进组NGFR的表达水平显著低于对照组[(27.36±3.48)µg/L、(25.02±3.42)µg/L、(29.74±3.56)µg/L比(32.04±3.71)µg/L],HT正常组和HT减退组表达水平显著低于HT亢进组,HT减退组显著低于HT正常组(P<0.05);Pearson相关性分析结果显示,HT病人血清中TRAF6和NGFR表达水平呈负相关(P<0.05);与对照组相比,HT组血清中IL-2、IFN-γ、TPOAb、TGAb、游离三碘甲状原氨酸、血清三碘甲状原氨酸、甲状腺素、甲状腺球蛋白水平显著升高,IL-4、游离甲状腺素水平显著降低(P<0.05);Pearson法分析显示,TRAF6水平与IL-2、IFN-γ、TPOAb、TGAb、游离三碘甲状原氨酸、血清三碘甲状原氨酸、甲状腺素、甲状腺球蛋白水平呈正相关,与IL-4、游离甲状腺素水平呈负相关(P<0.05),NGFR水平与IL-4、游离甲状腺素水平呈正相关,与IL-2、IFN-γ、TPOAb、TGAb、游离三碘甲状原氨酸、血清三碘甲状原氨酸、甲状腺素、甲状腺球蛋白水平呈负相关(P<0.05)。结论HT病人血清TRAF6表达水平异常升高,NGFR水平异常降低,均与免疫水平及甲状腺功能相关。

抑郁症患者血清胶质细胞源性神经营养因子、胰岛素样生长因子1水平变化及其与睡眠障碍关系研究

目的:探究抑郁症患者血清胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、胰岛素样生长因子1(IGF-1)水平变化及其与睡眠障碍的关系。方法:选取抑郁症患者120例为抑郁症组,选取体检健康者120例为对照组。采用酶联免疫吸附法测定所有受试者血清GDNF、IGF-1水平。对所有受试者进行匹茨堡睡眠质量指数量表(PSQI)评分,根据PSQI评分结果将抑郁症患者分为无睡眠障碍组(22例)和有睡眠障碍组(98例),其中轻度、中度、重度睡眠障碍组分别为28例、43例、27例。比较抑郁症组与对照组血清GDNF、IGF-1水平及PSQI评分,以及不同临床特征抑郁症患者血清GDNF、IGF-1水平。比较无睡眠障碍组与有睡眠障碍组抑郁症患者以及不同严重程度睡眠障碍抑郁症患者血清GDNF、IGF-1水平及PSQI评分。分析抑郁症伴睡眠障碍患者血清GDNF、IGF-1水平与PSQI评分的相关性,抑郁症患者血清GDNF、IGF-1水平对睡眠障碍发生的预测价值,以及抑郁症患者睡眠障碍发生的影响因素。结果:抑郁症组血清GDNF、IGF-1水平低于对照组,PSQI评分高于对照组(均P<0.05)。抑郁症患者血清GDNF、IGF-1水平与自杀行为、发病次数、家族史无关(均P>0.05)。有睡眠障碍组血清GDNF、IGF-1水平低于无睡眠障碍组,PSQI评分高于无睡眠障碍组(均P<0.05)。轻度睡眠障碍组、中度睡眠障碍组和重度睡眠障碍组血清GDNF、IGF-1水平依次降低,PSQI评分依次升高(均P<0.05)。有睡眠障碍抑郁症患者血清GDNF与IGF-1水平呈正相关,血清GDNF、IGF-1水平均与PSQI评分呈负相关(均P<0.05)。抑郁症患者血清GDNF、IGF-1单项及两者联合预测睡眠障碍发生的曲线下面积(AUC)分别为0.767、0.754、0.854,其中血清GDNF、IGF-1各自单独预测的AUC低于两者联合预测的AUC(均P<0.05)。GDNF低水平、IGF-1低水平均是抑郁症患者发生睡眠障碍的独立危险因素(均P<0.05)。结论:有睡眠障碍抑郁症患者血清GDNF、IGF-1呈低水平,且两者与睡眠障碍严重程度有关。血清GDNF、IGF-1对抑郁症患者睡眠障碍的发生有较高预测价值。

大鼠周围神经损伤后外周血内皮祖细胞动员及相关因子含量变化

目的探讨大鼠周围神经损伤(PNI)后外周血内皮祖细胞(EPCs)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血管内皮生长因子(VEGF)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平变化及EPCs与其他指标的相关性。方法42只SD大鼠按随机数字表法分为对照组、PNI 1 d组、PNI 3 d组、PNI 5 d组、PNI 7 d组及PNI 14 d组,每组7只,除对照组外其余组均采用钳夹法建立坐骨神经损伤模型。对每组在预定时间点采用活体心脏穿刺法采血;采用Ficoll密度梯度离心法提取单个核细胞,CD34和CD133双阳性细胞标记EPCs,应用流式细胞仪检测各组EPCs数量。采用酶联免疫吸附试验检测各组外周血bFGF、VEGF及MMP-9含量,分析EPCs数量与bFGF、VEGF、MMP-9水平的相关性。结果与对照组相比,PNI 3 d组、PNI 5 d组、PNI 7 d组外周血EPCs数量升高,PNI 3 d组、PNI 5 d组、PNI 7 d组及PNI 14 d组外周血bFGF含量升高,其余各组外周血VEGF含量升高,PNI 5 d组、PNI 7 d组及PNI 14 d组外周血MMP-9含量升高(P<0.05)。PNI 5 d组和PNI 7 d组外周血EPCs数量与血清bFGF水平呈正相关(r分别为0.784和0.788,P<0.05),与血清VEGF水平呈正相关(r分别为0.889和0.852,P<0.05);PNI 5 d组、PNI 7 d组和PNI 14 d组外周血EPCs数量与血清MMP-9水平呈正相关(r分别为0.788、0.852和0.873,P<0.05)。结论EPCs与bFGF、VEGF和MMP-9共同参与了PNI后血供修复的病理生理过程。

神经生长因子对小鼠颌骨骨髓间充质干细胞增殖、迁移、分化及凋亡的影响

背景神经生长因子(nerve growth factor,NGF)是神经营养因子中的一类,能够促进中枢及外周神经元加速生长,修复损伤的神经系统,有研究证实NGF能促进中胚层来源的长骨骨髓间充质干细胞的成骨分化及骨形成,而NGF对外胚层来源的颌骨骨髓间充质干细胞(jaw bone marrow mesenchymal stem cells,JBMMSCs)生物学特性的影响尚不明确。目的探讨NGF对JBMMSCs增殖、迁移、分化及凋亡特性的影响。方法原代培养小鼠JBMMSCs并鉴定。取第二代JBMMSCs加入含50 ng/mL NGF培养液孵育72h后,通过CCK-8、qRT-PCR、Western blot及免疫荧光(immunofluorescence,IF)等方法检测细胞增殖及其相关标志物MCM-2、Ki67的表达;qRT-PCR、Western blot检测凋亡相关标志物Bcl-3、Bax的表达;划痕实验检测JBMMSCs迁移能力;碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色、qRT-PCR、Western blot及IF检测成骨相关标志物表达。结果CCK-8结果显示,50 ng/mL NGF可显著增强JBMMSCs第3天及第5天的OD值,Western blot及IF结果显示,50 ng/mL NGF可显著增强JBMMSCs中增殖标志物Ki67、MCM-2的蛋白水平;划痕实验结果显示,50 ng/mL NGF可显著提高JBMMSCs的迁移率,有效缩小各个时间点的划痕面积;50 ng/mL NGF可有效增强JBMMSCs的碱性磷酸酶活性,上调ALP、OCN、RUNX2、BMP2的mRNA表达水平及ALP、OCN、BMP2、OPN、RUNX2的蛋白水平;此外,50 ng/mL NGF还可上调Bcl-2的mRNA及蛋白表达水平,下调Bax的mRNA及蛋白表达水平。结论50 ng/mL NGF能有效提高JBMMSCs增殖、迁移及成骨分化能力,同时抑制其凋亡。

神经生长因子对脂多糖引起的奶山羊支持细胞毒性抵抗研究

为探究神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)对奶山羊支持细胞(Sertoli cells,SCs)的保护作用及机制,提取原代奶山羊SCs后用NGF处理,CCK-8检测发现,100~400 ng/mL的NGF能够显著提高细胞活力(P<0.05);此外,1000 ng/mL脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)处理SCs 24 h后细胞活力达到半数抑制效果。乳酸脱氢酶检测结果显示,NGF能够抑制LPS对SCs的毒性,其中,200 ng/mL NGF与LPS共处理6、12、24 h后,细胞毒性显著低于对照组(P<0.05),且200 ng/mL NGF对LPS的细胞毒性抵抗效果最佳。Western blot结果表明,NGF能够抑制LPS激活的PI3K/AKT/NFκB信号通路。综合以上研究,NGF能够通过PI3K/AKT/NFκB信号通路抑制LPS对SCs的细胞毒性。

外源性神经生长因子对肱骨骨折大鼠破骨细胞活性、血管形成及iRhom2/TACE信号通路的作用

目的:探究外源性神经生长因子(NGF)对肱骨骨折大鼠破骨细胞活性、血管形成及iRhom2/TACE信号通路的作用机制。方法:SD雄性大鼠,随机分为正常组、模型组、NGF低剂量组、中剂量组、高剂量组,除正常组外,其他4组采用骨钳截断加克氏针髓内固定法建立肱骨骨折模型,低、中、高剂量组分别于骨折部位注射2、4、8μg/kg的NGF,正常组、模型组同期于骨折部位注射同体积生理盐水,X线摄片检测大鼠骨折愈合程度,TRAP染色法及鬼笔环肽染色法检测破骨细胞活性,ELISA法检测大鼠血清中NGF及血管形成相关因子含量,免疫印迹检测大鼠骨组织中肿瘤坏死因子-α转化酶(TACE)/非活性菱形蛋白2(iRhom2)信号通路蛋白表达。结果:与正常组相比,模型组可见明显骨折线,仅有少量骨痂生长且排列疏松;与模型组相比,低、中、高剂量组骨折线逐渐消失,骨痂明显增多且排列规则紧密,骨密度明显升高,且NGF剂量越高,愈合越明显。与正常组比较,模型组可见大量TRAP阳性表达的典型多核破骨细胞;与模型组相比,低、中、高剂量组破骨细胞体积及数目明显减少,且NGF剂量越高减少越明显。与正常组比较,模型组可见明显纤维肌动蛋白环形成;与模型组相比,低、中、高剂量组纤维肌动蛋白环面积明显缩小,且NGF剂量越高缩小越明显。与正常组比较,模型组血清中NGF、血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血管生成素-1(ANG-1)含量显著降低;与模型组相比,低、中、高剂量组血清中NGF、VEGF、bFGF、ANG-1含量明显升高,且NGF剂量越高,升高越明显。与正常组比较,模型组肱骨组织中iRhom2、TACE蛋白表达明显升高;与模型组相比,低、中、高剂量组肱骨组织中iRhom2、TACE蛋白表达均明显降低,且NGF剂量越高,降低越明显。结论:外源性NGF对肱骨骨折大鼠具有显著疗效,可显著改善破骨细胞活性、促进血管形成,并抑制iRhom2/TACE信号通路。

成纤维细胞生长因子9:治疗精神神经疾病药物新靶点

成纤维细胞生长因子9(FGF9)是一种能调节细胞增殖、分化和凋亡的生长因子,为成纤维细胞生长因子家族的重要一员。FGF9在人体的细胞和组织中广泛分布,在骨骼、胚胎的发育、血管形成、神经再生、肿瘤生长过程中发挥作用。近年来,随着其在抑郁症、帕金森病、阿尔茨海默病、癫痫、焦虑症等精神神经疾病发病机制中的关键作用不断被认识,FGF9被认为是一个潜在的治疗精神神经疾病药物开发的新靶点。

重组人神经生长因子通过抑制小胶质细胞炎症反应发挥神经保护作用

目的探讨重组人神经生长因子(rhNGF)的神经保护作用及其机制。方法BV2小胶质细胞分为细胞对照组、脂多糖(LPS)组及LPS+rhNGF 50和500μg·L^(-1)组。除细胞对照组外,其余3组用LPS 1 mg·L^(-1)刺激BV2细胞24 h诱导BV2细胞炎症反应,随后LPS+rhNGF组加rhNGF继续孵育48 h。孵育结束后收集BV2细胞,并收集各组培养上清即条件培养基(MCM),各组BV2细胞和MCM分别与小鼠脑神经瘤细胞Neuro-2a(N2a)共培养12或24 h。CCK-8法检测BV2细胞存活率,实时荧光定量PCR检测BV2细胞中促炎因子白细胞介素(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和IL-1β及抗炎因子IL-4和IL-10 mRNA表达水平,CBA法检测BV2细胞培养上清中IL-6,TNF-α,IL-4和IL-10浓度,免疫荧光法检测BV2细胞M1表型标志物CD16和M2表型标志物CD206表达,NeuN/TUNEL共染法和AnnexinⅤ/7-AAD法检测N2a细胞凋亡率。结果与细胞对照组相比,LPS组BV2细胞存活率显著下降(P<0.01),细胞变圆且胞体变大;促炎因子IL-1β,IL-6和TNF-α及抗炎因子IL-10 mRNA水平显著升高(P<0.01),抗炎因子IL-4 mRNA水平下降(P<0.01);IL-6和TNF-α蛋白水平显著升高(P<0.01),IL-4蛋白水平无显著差异;CD16和CD206阳性细胞百分比明显升高(P<0.01),CD16阳性细胞升高更加明显;与BV2细胞或其MCM共培养的N2a细胞存活率显著降低且凋亡率显著升高(P<0.05,P<0.01)。与LPS组相比,LPS+rhNGF 50和500μg·L^(-1)组BV2细胞存活率显著提高(P<0.01);IL-1β,IL-6和TNF-αmRNA水平显著降低(P<0.05),IL-4和IL-10 mRNA水平显著提高(P<0.05,P<0.01);IL-6和TNF-α蛋白水平显著降低(P<0.05,P<0.01),IL-4蛋白水平无显著差异,IL-10浓度低于检测限;CD206阳性细胞百分比显著升高(P<0.01),CD16阳性细胞百分比显著降低(P<0.05)。与LPS处理的BV2细胞或MCM-LPS组相比,与rhNGF 50和500μg·L^(-1)处理的BV2细胞共培养组及与MCM-rhNGF 50和500μg·L^(-1)共培养组N2a细胞存活率显著升高且凋亡率显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论rhNGF可通过抑制BV2细胞炎症反应诱导BV2细胞向M2表型转化,抑制N2a细胞凋亡,从而发挥神经保护作用。

血清转化生长因子β1与白细胞介素6水平对原发性干燥综合征并发神经系统病变的预测价值

目的:探讨血清转化生长因子β1(TGF-β1)、白细胞介素6(IL-6)水平对原发性干燥综合征(pSS)并发神经系统病变的预测价值。方法:选取80例pSS患者为研究对象,根据是否并发神经系统病变分为观察组(n=26)和对照组(n=54)。比较两组患者一般资料、病理特征、相关生化指标及自身抗体;多因素Logistic回归分析影响pSS并发神经系统病变的因素,ROC曲线分析TGF-β1和IL-6对pSS并发神经系统病变的预测价值。结果:与对照组相比,观察组患者病程更短、口干症与干眼症发生率更低、ESSDAI评分更高、TGF-β1与IL-6水平更高、补体C_4水平更低(P<0.05)。回归分析显示,TGF-β1和IL-6是pSS并发神经系统病变的独立危险因素(OR=1.759、1.791,P<0.05)。ROC曲线分析显示,TGF-β1、IL-6及二者联合预测pSS并发神经系统病变的曲线下面积(AUC)分别为0.882、0.868、0.946,二者联合预测价值更高(P<0.05)。结论:血清TGF-β1、IL-6与神经系统病变的发生密切相关,可以作为pSS并发神经系统病变的潜在生物标志物,为早期诊断和治疗提供重要依据。

粒细胞巨噬细胞集落刺激因子、神经生长因子、白介素-17在自身免疫性前列腺炎中的作用

目的探讨粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、神经生长因子(NGF)、白介素-17(IL-17)在实验性自身免疫性前列腺炎(EAP)大鼠前列腺组织中表达的意义。方法建立实验性自身免疫性前列腺炎大鼠模型并分为对照组、EAP组、抗GM-CSF对照组(阻断对照组)、抗GM-CSFEAP组(阻断EAP组),予痛觉行为测试。取各组大鼠前列腺组织,免疫组化观察GM-CSF在前列腺组织中表达;通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法检测GM-CSF、NGF、IL-17的mRNA及蛋白表达。结果痛觉测试:抗GM-CSF组在EAP中显示出比EAP组更轻的慢性盆腔疼痛。HE染色:抗GM-CSF组在EAP诱导后组织炎症反应较少。对照组EAP炎症重于抗GM-CSF组。免疫组化:EAP组大鼠前列腺组织在免疫组化检测中,GM-CSF呈阳性表达(主要在细胞核表达)。RT-PCR:抗GM-CSF组EAP后50 d用RT-PCR检测IL-17和NGF,抗GM-CSF显著降低了EAP诱导的前列腺组织中IL-17和NGFmRNA表达的增加。Western blot:抗GM-CSF组EAP后50 d用WB检测IL-17和NGF蛋白表达量,抗GM-CSF显著降低了EAP诱导的前列腺组织中IL-17和NGF蛋白的表达。结论GM-CSF、NGF、IL-17在EAP大鼠前列腺组织中表达增加,它们可能是慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征(CP/CPPS)的重要炎症介质;且在抗GM-CSF后NGF、IL-17的表达下降,说明GM-CSF很有可能成为CP/CPPS的潜在治疗靶点。

鼠神经生长因子联合左乙拉西坦对局灶性发作型癫痫患儿疾病发作情况及神经细胞因子水平的影响

目的探讨鼠神经生长因子联合左乙拉西坦治疗局灶性发作型癫痫的临床效果。方法选取2019年1月至2021年5月我院收治的300例局灶性发作型癫痫患儿为研究对象,依据随机数字表法将其分为研究组(n=150,鼠神经生长因子联合左乙拉西坦治疗)与对照组(n=150,左乙拉西坦治疗)。比较两组的治疗效果。结果研究组的治疗总有效率高于对照组(P<0.05)。治疗后,研究组的癫痫发作频率低于对照组,癫痫持续时长短于对照组(P<0.05)。治疗后,研究组的脑源性神经营养因子(BDNF)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平高于对照组,胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、中枢神经特异蛋白(S100β)水平低于对照组(P<0.05)。治疗后,研究组的痫样放电、累及导联数少于对照组(P<0.05)。两组的不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论鼠神经生长因子联合左乙拉西坦治疗局灶性发作型癫痫的效果显著,可抑制脑电活动及癫痫发作,调节神经细胞因子水平,且安全性较高。