利用黄粉甲繁育管氏肿腿蜂:不同蜂虫比对繁育效果的影响

利用黄粉甲Tenebriomolitor的蛹作为中间寄主繁育管氏肿腿蜂Sclerodermaguani,测定了不同蜂虫比对发育历期、寄生率等几项评价繁育效果的重要指标。结果显示接蜂时不同蜂虫比对雌蜂产卵量和育出的子代蜂数量有较明显的影响,当蜂虫比为2∶1时这2项重要指标较为理想。综合比较了寄生率、寄生成功率、子代蜂的发育历期、出蜂数、性比等各项指标后认为,人工扩繁时采用2∶1的蜂虫比较为适宜。

管氏肿腿蜂对黄粉甲的寄生行为

在人工扩繁条件下观察管氏肿腿蜂Scleroderma guani对中间寄主黄粉甲Tenebrio molitor的寄生行为,其过程可分为：搜寻-识别-螯刺-清理和取食-产卵-护幼.雌蜂在寄生黄粉甲蛹时上蜂速度和螯刺率变异大,上蜂前时间为1.4～7.0天,螯刺率为8.7%～91.7%,影响两者的因素包括：雌蜂的交配状况、寄主状况及繁育温度等.蜂毒螯入寄主后可使其组织不腐烂而适于被寄生,被螯刺后的蛹可表现为“保鲜”状态,平均“保鲜”时间为12.6天.蜂在蛹体的平均产卵量为30粒,最多为91粒.蜂卵在蛹体上分布合理,有利于幼虫有效利用寄主营养并避免拥挤和取食竞争.母蜂对幼虫期的发育具保护行为,包括护卵和保护幼虫正常发育并能搬运老熟幼虫集中结茧化蛹.

黄粉甲低温贮存对管氏肿腿蜂发育和繁殖的影响

寄主的活动能力和营养状况是影响寄生蜂繁育效果的主要因素。以黄粉甲蛹为寄主,筛选其最佳贮存温度和时间,达到短时间内降低寄主活动能力的同时,保证其有充足营养满足寄生蜂发育所需,对于管氏肿腿蜂的规模化生产有重要意义。在9,3,-3,-9℃条件下,分别贮存黄粉甲TenebriomolitorL.蛹5,15,25,35和45d对管氏肿腿蜂Scleroderma guaniXiaoetWu发育、存活以及增殖的影响。结果表明,寄主活动能力随贮存温度的降低而减弱,有利于管氏肿腿蜂的寄生,寄生率和蜂种存活率不断升高;寄主的不同贮存对寄生蜂卵孵化率影响小于对幼虫存活率影响,而对蛹羽化率则无任何影响。管氏肿腿蜂各阶段历期与寄主贮存温度和时间有着一定关系,-3和-9℃条件下,寄主贮存时间越长,所接寄生蜂产卵前期越短;不同贮存温度和时间的寄主间,寄生蜂卵期、幼虫期和蛹期的持续时间存在一定差异,最短分别为3.39,6.27和15.15d,而对预蛹期无显著差异;幼期的变化趋势同产卵前期。寄主经不同温度和时间贮存后,所繁育的管氏肿腿蜂最高产卵量为33.19粒/雌、最高出蜂量为20.07头/雌、雌雄最高性比可达17.53∶1,分别是CK的2.21,3.17和1.26倍。总体而言,寄主经-9℃贮存15-25d后最有利于繁蜂,其中-9℃贮存15d出蜂量最高。单雌出蜂量较现有报道提高3倍。

不同温度条件对利用黄粉甲繁育管氏肿腿蜂的影响

在恒温 2 0 ,2 2 ,2 4,2 6,2 8和 3 0℃的实验条件下 ,利用黄粉甲TenebriomolitorL .做中间寄主繁育管氏肿腿蜂SclerodermaguaniXiaoetWu ,测定了其发育历期和寄生率等生物学参数。结果显示 ,在被测温度范围内 ,管氏肿腿蜂的发育速率与温度呈正比关系 ,即随着温度的升高 ,发育历期逐渐缩短。卵至羽化的发育起点温度为 1 3 60℃ ,有效积温为 3 2 0 0 7日·度。温度对管氏肿腿蜂的寄生率、寄生成功率、产卵量、子代蜂的数量和性比都有较显著影响。结合发育历期的结果 ,认为适于人工大量繁蜂的温度范围为 2 4～ 2 8℃ ,2 6℃为最适温度。

低温处理黄粉虫蛹对管氏肿腿蜂寄生效能的影响

中间寄主的营养状况是影响寄生蜂繁育效果的主要因素。对中间寄主进行处理以抑制其发育,保证其有充足的营养满足子代寄生蜂发育所需。本文研究了在0℃和2℃条件下中间寄主黄粉虫蛹体内营养物质蛋白质、总糖、海藻糖、糖原含量等随处理时间的先升高后下降的变化趋势,表皮硬化程度以及肿腿蜂的寄生率之间的关系。结果表明:寄生蜂寄生率与中间寄主体内营养物质含量呈正相关变化,与表皮硬化程度呈负相关变化。推荐2℃作为中间寄主处理的适宜温度,处理时间为24 h。

黄粉虫蛹不同处理对人工繁育管氏肿腿蜂的影响

以黄粉虫蛹为寄主,开展人工繁育管氏肿腿蜂技术研究。结果表明:在28℃、相对湿度70%的条件下,黄粉虫1日龄蛹经过酒精浸泡或冷藏不同处理后再接蜂,可显著提高出蜂率及子代蜂产量。用75%酒精浸泡黄粉虫1日龄蛹2 h后接蜂,平均出蜂率达47.37%,出蜂管子代蜂平均产量达44.56头,其2∶3的虫蜂比为接蜂最佳组合;冷藏黄粉虫1日龄蛹3个月,平均出蜂率达48%,出蜂管子代蜂平均产量达45.92头。未经处理的黄粉虫1日龄蛹,肿腿蜂无法成功寄生。因此在适宜条件下,利用处理过的黄粉虫1日龄蛹人工繁育管氏肿腿蜂是可行的。

低温贮存黄粉虫蛹对管氏硬皮肿腿蜂繁育的影响

研究了低温贮存黄粉虫蛹对繁育管氏硬皮肿腿蜂的影响。结果表明，不同日龄黄粉虫蛹在-4℃贮存20d，以1～2日龄繁育的肿腿蜂寄生率、产卵量、出蜂量为最高。1．2日龄蛹在-4℃贮存1、5、10、20、30、45、60d时，上述各项生物学指标以贮存20、30d的最高；在4℃、0℃、-4℃、-8℃分别贮存20d后接蜂，上述各项生物学指标以-4℃下贮存为最优。

黄粉虫蛹不同处理对繁育管氏肿腿蜂的影响

研究了麻醉、低温处理黄粉虫蛹对繁育管氏肿腿蜂的影响。肿腿蜂寄生率、产卵量、出蜂量等随麻醉时间的增加而减少;在-4℃贮存1,5,10,20,30,45,60 d后,上述各项生物学指标以20 d和30 d为最优;在4,0,-4,-8℃分别低温贮存20 d后接蜂,生物学指标以-4℃最高。

不同蜂虫比对管氏肿腿蜂繁育效果的影响

在室内利用玻璃双通管由中间寄主黄粉甲的初蛹直接接蜂繁育管氏肿腿蜂,比较不同蜂虫比对繁蜂效果的影响。结果表明,不同蜂虫比对管氏肿腿蜂单位虫重繁蜂量、子代蜂数量和雌雄比有较明显的影响,蜂虫比8:4时这几项指标达到最佳。蜂虫比对管氏肿腿蜂的发育历期有显著影响,且寄主数量相同时,管氏肿腿蜂子代蜂产卵前期随着蜂虫比的提高而缩短,发育总历期随着单管接种肿腿蜂数量的增多而缩短。综合以上各项指标,人工扩繁时采用8:4的蜂虫比最佳。

中间寄主贮存温度和时间对管氏肿腿蜂繁殖的影响

在室内9、3、-3、-9℃条件下,分别将玉米螟老熟幼虫、大蜡螟老熟幼虫和黄粉甲蛹贮存5、15、25、35和45d,观察对繁育管氏肿腿蜂的影响。结果表明,中间寄主玉米螟和大蜡螟老熟幼虫的最佳贮存条件为3℃贮存45d,黄粉甲蛹的最佳贮存条件为-9℃贮存25d。

黄粉甲蛹低温贮存时间对管氏硬皮肿腿蜂母代和子代寄生与繁育的影响

研究繁蜂替代寄主黄粉甲蛹经-9℃贮存5、15、25、35和45d后所繁育出的管氏硬皮肿腿蜂对青杨天牛寄生的影响。母代蜂在产卵前期、幼虫期、寄生率、幼虫存活率以及产卵量、出蜂量间与对照存在显著差异。但子代蜂各阶段发育历期、存活率、产卵量、出蜂量等各方面与对照则均无显著差异。

管氏肿腿蜂替代寄主黄粉甲培育条件标准化探讨

从饲料种类、培育密度及其对繁育商品蜂效果的影响等方面,探讨了管氏肿腿蜂Scleroderma guani替代寄主黄粉甲Tenebrio molitor标准化培育技术以期稳量供应适寄生的黄粉甲蛹用于肿腿蜂大规模的工厂化生产.结果表明：在4头/cm2密度下,采用麦麸＋白菜组合培育的黄粉甲存活率、总化蛹率和可用蛹率最高,幼虫历期最短,蛹体的适寄生性较好,能获得最适繁蜂效果,最有利于工厂化生产;生产中须在黄粉甲分级培育得到9龄左右幼虫后的16d内以足量麦麸＋白菜饲料组合饲喂,之后可适减;在分级培育后的1 ～16 d,20～23 d这两个时间段将黄粉甲连同培育盒置于10℃储藏可延缓其生长和发育进度,以满足工厂化生产商品蜂的需要.

管氏肿腿蜂寄生对黄粉甲硫氧还蛋白基因转录的影响

硫氧还蛋白参与体内必要的抗氧化作用和氧化还原调控过程,在昆虫体内能维持稳定的氧化还原状态,为初步了解硫氧还蛋白在黄粉甲体内的作用以及管氏肿腿蜂寄生对该蛋白基因转录的影响,采用RACE技术,克隆获得黄粉甲硫氧还蛋白基因,并进行多序列比对及荧光定量PCR分析。结果表明:cDNA序列长531 bp,开放阅读框318 bp,其推导的氨基酸序列编码106个氨基酸,3'端非编码区序列为95 bp,5'端非编码区序列为119 bp;预测理论分子量为11.97 kDa,等电点为4.22,含有一个保守的氧化还原活性位点CGPC。黄粉甲硫氧还蛋白基因编码的蛋白序列与其他昆虫的硫氧还蛋白相似性高于60%;硫氧还蛋白基因在黄粉甲各发育阶段中,在蛹期的表达水平最高,在成虫期表达水平最低,在蛹期时的脂肪体中高度表达。被管氏肿腿蜂寄生后,黄粉甲硫氧还蛋白基因转录水平明显受到上调诱导。

利用黄粉甲繁殖管氏肿腿蜂的研究

[目的]筛选人工繁殖管氏肿腿蜂的替代寄主。[方法]研究了管氏肿腿蜂对黄粉甲、家蚕、蜜蜂、玉米螟的寄生特性,并优化了管氏肿腿蜂对黄粉甲蛹的寄生条件。[结果]管氏肿腿蜂对不同供试昆虫的麻痹率和寄生率不同,其中对黄粉虫蛹的寄生率较高;以黄粉虫蛹为寄主,只有湿度在70%以上时管氏肿腿蜂才能顺利羽化,当蜂虫比为8∶2时寄生成功率最高。[结论]黄粉虫蛹可作为寄主繁蜂。

黄粉甲肌动蛋白解聚因子基因的克隆及表达分析

[目的]克隆黄粉甲Tenebrio molitor肌动蛋白解聚因子基因,研究该基因在黄粉甲不同组织、不同发育阶段及被管氏肿腿蜂Scleroderma guani寄生后的表达情况。[方法]采用RACE技术、克隆该基因、实时荧光定量PCR检测其表达情况。[结果]该基因全长758 bp,分子量为16.96 k Da,无信号肽,与赤拟谷盗Tribolium castaneum肌动蛋白解聚因子的相似性达97%。荧光定量PCR分析表明,该基因在黄粉甲各发育阶段均有表达,成虫中表达量最高,在脂肪体中的表达量高于血细胞。被管氏肿腿蜂寄生6 h后,肌动蛋白解聚因子基因在寄生与未寄生黄粉甲蛹内的相对表达量无差异;寄生12 h后,该基因在寄生蛹中的表达量降低了1.96倍;寄生24 h和48 h后,该基因在寄生蛹中的表达量分别升高3.16倍和5.6倍。[结论]管氏肿腿蜂寄生能影响黄粉甲肌动蛋白解聚因子基因的转录水平。