相同立地条件下向日葵核盘菌、小核盘菌生物学特性及致病力的比较

以同一地块中采集的向日葵核盘菌和小核盘菌各10株菌株作为供试材料,对其生物学特性及致病力进行了比较研究。结果表明:23℃培养3 d后,核盘菌平均直径达到8.34 cm,而小核盘菌的平均直径仅为5.38 cm。草酸含量和PG酶活力的测定结果表明:核盘菌草酸含量的平均值为27.67μg/mg,PG酶活力平均值为26.87 U/mg,而小核盘菌上述两个指标的平均值分别为18.91μg/mg和21.58 U/mg。在菌核形成方面,小核盘菌不仅菌核形成速度明显快于核盘菌,而且其形成菌核颗粒的数量明显多于核盘菌。致病力的测定结果表明:接种2 d后,核盘菌在向日葵离体叶片上形成病斑的平均直径为3.11 cm,在0.05水平上显著高于接种相同时间点小核盘菌形成的病斑直径的平均值1.71 cm。因此,除了菌核的形成时间和数量外,同一地块中向日葵核盘菌菌株生物学特性各项指标以及致病力均高于小核盘菌菌株。

菌核病不同发病率的菜田土壤中真菌多样性分析

以菌核病不同发病率的菜田土壤为材料,采用Illumina MiSeq测序技术分析土壤真菌群落结构组成和多样性变化,探讨土壤真菌与小核盘菌的互作关系。结果表明:菌核病发病率不同的菜田土壤中,小核盘菌使土壤真菌丰富度Sobs指数显著下降、土壤中真菌群落组成以及Beta多样性产生显著变化,其中重度组中特有蛙粪霉门(Basidiobolomycota)、芽枝霉门(Blastocladiomycota)和Calcarisporiellomycota,轻度病害组中特有蛙粪霉门(Basidiobolomycota)和芽枝霉门(Blastocladiomycota)。土壤中的小被孢霉属(Mortierella)和丝孢酵母属(Trichosporon)对病原菌均具有拮抗作用,具有分离出高抑制性的菌株的潜力,同时丝孢酵母属也可作为核盘菌侵染时的指示真菌。

蔬菜菌核病两种病原菌双重PCR检测方法的建立

核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)和小核盘菌(Sclerotinia minor)是引起蔬菜菌核病的两种主要病原菌。为了建立针对这两种病原菌的快速分子检测体系,本研究基于漆酶2编码基因(laccase 2)分别设计了针对S.sclerotiorum和S.minor的特异性引物对Sslcc2-F/R和Smlcc2-F/R,在此基础上建立了双重PCR检测体系。通过对该体系的灵敏度以及蔬菜菌核病模拟侵染样品进行检测,证实了双重PCR技术的可行性。研究结果表明:能通过扩增片段的大小区分S.sclerotiorum和S.minor,引物Sslcc2-F/R可扩增出大小为410 bp的S.sclerotiorum特异性条带,其检测灵敏度可达3.11×10^(-2) ng·μL^(-1);引物Smlcc2-F/R可扩增出大小为609 bp的S.minor特异性条带,其检测灵敏度为3.42×10^(-2) ng·μL^(-1)。在混合两对引物的体系中,检测灵敏度为3.0×10^(-1) ng·μL^(-1)。本研究建立的双重PCR体系能同时对引起蔬菜菌核病的两种主要病原菌进行准确、快速和灵敏的检测。