响应面优化提取玄参碱溶性多糖及对高眼压小鼠视网膜的影响

采用单因素及响应面优化微波提取玄参碱溶性多糖(简称多糖)工艺,并对高眼压症小鼠进行21天灌胃不同剂量多糖后测定小鼠眼压变化和通过研究其视网膜结构变化、氧化反应和炎症反应初步探索其机制。结果表明多糖的最佳提取条件为:微波功率400 W,微波时间16 min,微波温度72℃,NaOH浓度5.5%,并在料液比1/25(g/mL),在此条件下多糖提取率为18.75 mg/g。多糖可以降低小鼠的眼压和有效保护视网膜结构,其机制是通过提高SOD、GSH-px抗氧化酶类活性来提高视网膜抗氧化能力和抑制TNF-α、IL-1β和IL-6炎症因子的表达,是一种潜在的功能性食品添加剂。

正交试验优选黔产玄参的发汗工艺

优选黔产玄参的发汗工艺。在单因素考察基础上,对煮沸时间、发汗次数、单次发汗时间、发汗温度进行考察,以肉桂酸、哈巴苷和哈巴俄苷含量为评价指标,采用L 9(34)正交试验为实验设计,综合评分优选黔产玄参的发汗工艺。最佳发汗工艺为半干燥的玄参于蒸锅中蒸制30 min后发汗7次,每次36 h,温度15℃;此工艺制备的样品中肉桂酸、哈巴苷、哈巴俄苷的平均含量分别为1.79 mg/g、1.19 mg/g、0.81 mg/g,RSD值均小于3%。优选的发汗工艺稳定可行,可为黔产玄参的发汗工艺提供参考。

贝莱斯芽孢杆菌对玄参根腐病的田间防效

为研究玄参根腐病的生物防治措施,以贝莱斯芽孢杆菌为供试材料,通过在定植期、苗期和营养生长前期使用,研究不同处理方式对玄参根腐病的防治效果。结果表明,贝莱斯芽孢杆菌对玄参根腐病防治效果较好,其防治效果受使用时间影响较大,定植期使用效果优于苗期和营养生长前期。使用次数对防治效果影响较大,同在定植期使用,追施2次效果优于1次。在连续使用3次的情况下,其田间防效最高可达77%。该研究可为玄参根腐病的有效防控提供指导依据。

玄参水提取物对高糖暴露条件下INS-1细胞AMPK的激活作用

目的研究玄参水提取物(AESN)对高糖(HG)条件下INS-1细胞腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)活性的影响。方法将INS-1细胞培养于HG培养基中,并给予不同浓度AESN共孵育处理;利用细胞计数试剂-8(CCK-8)法检测AESN干预对细胞增殖/活力和焦亡小体形成的影响,使用Western blotting法观察AESN对细胞内AMPK表达及磷酸化水平的影响;利用时间分辨-荧光共振能量转移(TR-FRET)实验检测AESN对AMPK激酶活性的影响。结果CCK-8检测结果显示同正常培养条件相比,HG暴露显著降低INS-1细胞增殖/活力并增加焦亡小体形成数量,Western blotting检测结果表明HG暴露可导致细胞内AMPK磷酸化水平下降;而AESN共孵育可呈浓度依赖性地增加INS-1细胞增殖/活力、抑制焦亡小体形成并激活AMPK。TR-FRET实验结果表明,AESN可浓度依赖性增加AMPK激酶活性。结论AESN对HG暴露条件下INS-1细胞AMPK具有激活作用。

Cocktail探针药物法评价玄参对大鼠细胞色素P450酶的影响

采用Cocktail探针药物法研究玄参对大鼠4种细胞色素P450(CYP3A4、CYP2D6、CYP2C9和CYP1A2)活性的影响.24只健康雄性SD大鼠(Sprague-Dawley rat)随机分为三组:A组为多剂量组,连续7 d给予150 mg/kg玄参.B组为单剂量组,第7 d给予150 mg/kg玄参.C组为对照组.第7 d,各组在给予玄参30 min后,再给予4种探针药物的混合溶液,其中咪达唑仑3 mg/kg、美托洛尔20 mg/kg、氯沙坦5 mg/kg、非那西汀5 mg/kg,分别用以评价CYP3A4、CYP2D6、CYP2C9和CYP1A2的活性.根据设定的时间点收集大鼠血浆样品,处理后的样品采用超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)法测定样品中4种探针药物的浓度.结果可见,玄参对大鼠体内氯沙坦和非那西汀的药代动力学参数无显著影响.单剂量的玄参导致咪达唑仑代谢减慢,多剂量给予的玄参显著诱导美托洛尔代谢.玄参对CYP2C9和CYP1A2的酶活性无明显影响,可以抑制CYP3A4或诱导CYP2D6的酶活性.

产地加工与炮制一体化工艺对玄参质量的影响

目的比较产地加工与炮制一体化加工工艺和传统加工方法对玄参质量的影响。方法用硅胶G薄层板对不同玄参进行定性鉴别;对不同玄参浸出物、灰分、水分以及多糖、哈巴苷、哈巴俄苷、桃叶珊瑚苷、安格洛苷C、毛蕊花糖苷、肉桂酸的含量进行测定;用二甲苯诱导小鼠进行耳廓肿胀和醋酸扭体实验,研究不同玄参的镇痛抗炎作用。结果2种玄参的鉴别项和检查项均符合2020年版《中华人民共和国药典》相关规定;一体化玄参的多糖、桃叶珊瑚苷、肉桂酸含量高于传统玄参;与空白组比较,2种玄参饮片均具有镇痛抗炎的效果,药效间的差异无统计学意义。结论一体化玄参的质量评价和功效均与传统玄参相似,值得推广应用。

Studies on the Physicochemical Properties, Structure and Antitumor Activity of an Oligosaccharide Homologue SnS-2 from the Root of Scrophularia ningpoensis Hemsl.

An oligosaccharide homologue named SnS-2 was isolated from the root of Scrophularia ningpoensis Hemsl. SnS-2 was purified by means of gel-permeation chromatography and ion-exchange chromatography. Its physico-chemical properties, including carbohydrate content and molecular weight were determined. The structure of SnS-2 was elucidated by chemical methods along with 1H and 13C NMR spectroscopy, including two-dimensional DQCOSY and H-detected 1H, 13C HMQC experiments. These results show that SnS-2 possesses a backbone con-sisting of terminal a-Galp-(1, a-Galp-(16), a-Glcp-(16) and nonreducing end -Fruf-(2. The bioactive as-say showed that it could inhibit the growth of Lewis pulmonary carcinoma implanted in mice.

Iridoid glycosides from the roots of Scrophularia ningpoensis Hemsl

Two new iridoid glycosides,named scrophularianoids A（1） and B（2）,were isolated from the roots of Scrophularia ningpoensis.The chemical structures were established on the basis of extensive analyses of spectroscopic data.Compounds 1 and 2 were inactive in our preliminary in vitro myocardial protective bioassay.

施肥对玄参生长及品质的影响

以玄参(Scrophularia ningpoensis Hemsl.)、微生物菌肥、氨基酸硼锌肥为试验材料,对玄参分别施用氨基酸硼锌肥、微生物菌肥,统计分析玄参地上部分、地下部分生长情况,病虫害发生率,药材有效成分含量等指标,研究了不同肥料对玄参生长、产量和质量的影响,以期为科学种植玄参提供参考。结果表明,微生物菌肥、氨基酸硼锌肥对玄参植株、药茎、子芽生长有促进作用,对斑枯病等病害具有抑制作用,微生物菌肥对地下部分生长和病害抑制效果比氨基酸硼锌肥更好,但对地上部分的促进作用不及氨基酸硼锌肥,微生物菌肥、氨基酸硼锌肥对玄参药材中有效成分哈巴苷含量具有明显的提高作用,微生物菌肥、氨基酸硼锌肥处理分别可提升至对照的2.46、2.10倍。综合植株生长、产量、抗病性等因素,可配施微生物菌肥、氨基酸硼锌肥和化肥,达到高产、高抗、高质的目的,生产出道地好药材。

玄参提取物的抗炎和抗氧活性

目的：研究玄参提取液和玄参中 ４ 种单体成分的抗炎和抗氧活性。方法：应用（ｌ）角叉菜胶及眼镜蛇毒致大鼠脚趾肿胀实验；（２） Ｆｅ２＋ ／半胱氨酸诱导肝微粒体脂质过氧化；（３） Ａ Ａ Ｐ Ｈ 诱导红细胞氧化性溶血实验，观察玄参提取液以及玄参中环烯醚萜甙类成分哈帕酯甙、哈帕甙和苯丙素甙类成分安格洛甙 Ｃ、阿格托甙的作用。结果：玄参提取液具有较好的抗肿胀作用。在相应剂量，其苯丙素甙类成分具有较强的抗氧活性，环烯醚萜甙类成分作用较弱。结论：玄参的抗炎、抗氧化作用可能主要与其苯丙素甙类成分有关。

玄参化学成分研究

目的：研究玄参的化学成分。方法：采用硅胶、凝胶Sephadex LH-20等色谱技术进行分离纯化,通过理化方法和波谱数据进行分析和结构鉴定。结果：从玄参中分离鉴定了11个化合物,分别为：香草醛（1）、丁香酚（2）、异丁香酚甲醚（3）、阿魏酸（4）、苯甲酸（5）、丁香酸（6）、rhamnopyranosyl vanilloyl（7）、syringic acid-4-O-α-L-rhamnopyranoside（8）、β-谷甾醇（9）、腺苷（10）、邻苯二甲酸二丁酯（11）。结论：其中,化合物1-3、6-8为首次从该植物中分离得到。

中草药玄参化学成分的研究

从中草药玄参Scrophularia ningpoensis Hemsl.的乙醇溶液中分离得到14个化合物,根据理化性质和光谱数据分析分别鉴定为柳杉酚(1)、β-谷甾醇(2)、羽扇豆醇(3)、熊果酸(4)、鼠李糖(5)、胡萝卜苷(6)、蔗糖(7)、咖啡酸(8)、油酸(9)、3-O-(6'-O-palmitoyl-β-D-glucosyl)-spinasta-7,22-diene(10)、clematomanshurica saponin E(11)、α-caryphy(12)、雪松醇(13)和Scrophuloside A4(14)。其中化合物3,58,～14均为首次从玄参中分离得到。

几种药剂防治玄参斑枯病药效试验

[目的]研究几种药剂防治玄参(Scrophularia ningpoensis Hemsl.)斑枯病的药效。[方法]玄参在栽种前以4种杀菌剂进行子芽浸种处理,田间发病后调查不同处理的防治效果;在玄参斑枯病发病初期,以5种杀菌剂进行田间药剂防效试验。[结果]用4种杀菌剂浸种后均能有效的防治玄参斑枯病,且能显著提高保苗率;5种杀菌剂的田间药剂防效以80%多菌灵800倍液(67.1%)和70%甲托1 000倍液(65.6%)的防效最好,在斑枯病发病初期,能达到较理想的控制效果。[结论]采用药剂处理玄参子芽,结合田间施药防治可有效的防治玄参斑枯病,使损失降到最低。

玄参多糖成分抗疲劳活性的研究

研究了玄参（Scrophularia ningpoensis Hemsl．）多糖类成分对小鼠抗疲劳的药理作用。取雄性（♂）昆明种小鼠，体重22—27g，随机分为空白对照组、香菇多糖阳性对照组、玄参多糖（低、中、高）剂量3组，经灌胃分别给予小鼠生理盐水、香菇多糖及玄参多糖类成分100、200、400mg·kg^-1·d^-1，连续灌胃21d。分别观察小鼠的体重变化情况，负重游泳力竭时间，血清尿素氮、肝糖原和血乳酸的含量。结果表明，玄参多糖类成分可降低运动后小鼠血清尿素氮、血乳酸含量，增加小鼠肝糖原含量，具有抗疲劳的活性作用。

玄参提取物对大鼠局灶性脑缺血的保护作用(英文)

目的 :探讨玄参提取物 (SnPs)对局灶性缺血后脑组织的保护作用及对脑血流量的影响。方法 :雄性SD大鼠 (2 4 2±s 7)g 4 0只随机分 5组 (均n =8) :假手术组、模型对照组、3个不同剂量SnPs治疗组 (1,5 ,10mg·kg- 1尾静脉注射 )。大脑中动脉线栓法建立局灶性脑缺血模型 (MCAO) ,缺血 2 4h后 ,用神经功能评分和梗死体积改变来评价SnPs对脑缺血的治疗作用。另将MCAO模型缺血SD大鼠分成 4组 (模型对照组n =8,3个不同剂量 1,5 ,10mg·kg- 1SnPs治疗组均n =6 )用于测脑血流量 ,用激光多普勒仪分别在 6个时间点 (缺血前 ,缺血即刻 ,缺血后 30min和 2h ,以及缺血 2h再灌 30min ,2h)记录双侧的皮层血流量。结果 :脑缺血 2 4h后 ,各SnPs治疗组与模型对照组相比 ,脑梗死体积明显减少 (P <0 .0 5 ) ,神经功能均明显改善 (P <0 .0 1) ;但在此剂量范围内无明显的剂量依赖性。各SnPs治疗组与模型组相比 ,缺血 2h后皮层CBF明显改善 (P <0 .0 5 ) ,其中 5mg·kg- 1剂量组对于缺血各时间点的血流改善均有显著作用 (P <0 .0 5 )。结论 :SnPs对于脑缺血损伤具有保护作用 ,此作用可能与提高脑血流量有关。

玄参总色素提取物抗炎镇痛活性的研究

目的:研究人工栽培玄参中色素提取物的抗炎镇痛作用。方法:采用热板法、冰醋酸刺激致痛法测定小鼠痛阈;利用二甲苯造小鼠耳廓炎症模型,测定小鼠耳片质量;采用腹腔染料渗出法,测定小鼠腹腔毛细血管通透性。结果:玄参色素提取物能提高热板致痛小鼠的痛阈值及减少冰醋酸刺激致痛小鼠的扭体次数;对二甲苯致小鼠耳廓肿胀、冰醋酸致腹腔毛细血管通透性增高均有明显的抑制作用。结论:玄参色素提取物有抗炎镇痛的活性。

玄参中环烯醚萜甙和苯丙素甙对LTB_4产生及血小板聚集的影响

目的：探讨玄参化学成分和药理活性关系。方法：应用大孔树脂、葡聚糖凝胶和正、反相硅胶等层析方法，摸索多种溶剂系统对玄参中含量高的水溶性成分进行分离，应用化学和光谱方法鉴定结构。观察分离得到的主要单体成分对大鼠腹腔中性白细胞中花生四烯酸（ＡＡ）代谢产物白三烯Ｂ４（ＬＴＢ４）的影响，及对阈剂量的二磷酸腺苷，ＡＡ和２０ｎｍｏｌ／ＬＰＡＦ诱导的血小板聚集的抑制作用。结果：共分得１１种玄参水溶性成分，发现它们属于环烯醚萜甙和苯丙素甙类型。药理实验中苯丙素甙ＸＳ－８，ＸＳ－１０在０．５ｍｍｏｌ／Ｌ时对ＬＴＢ４产生较强抑制作用；环烯醚萜甙ＸＳ－６，ＸＳ－７在相同条件下作用较弱。苯丙素甙和环烯醚萜甙在０．５ｍｍｏｌ／Ｌ时，对体外诱导的血小板聚集都有不同程度的作用，但苯丙素甙的作用强于环烯醚萜甙。结论：玄参中的苯丙素甙和环烯醚萜甙成分与玄参的抗炎和抗血小板聚集作用有关。

连作对玄参产量和根际土壤肥力及酶活性的影响

目的:研究连作对玄参产量、根际土壤肥力及土壤酶活性的影响。方法:采用单因素随机区组试验设计方法。结果:连作对玄参病情指数、烂根率、药材及子芽产量有显著影响,连作年限越长影响越严重;连作可降低玄参根际土多酚氧化酶和酸性磷酸酶活性,对过氧化氢酶、蔗糖酶、脲酶、酸性蛋白酶和纤维素酶的活性没有显著影响;连作也没有对玄参根际土的全氮、全磷、全钾、碱解氮、速效磷、速效钾、pH值和有机质有显著影响。结论:连作会严重影响玄参的生长,造成死苗、烂根等,但是没有影响到玄参根际土的营养平衡,多酚氧化酶和酸性磷酸酶可能是影响玄参产生连作障碍的关键性酶,连作对其他土壤酶活性影响不显著。

色谱指纹图谱分析技术用于鉴别中药玄参产地的研究

目的采用高效液相色谱(HPLC)色谱指纹图谱分析技术鉴别中药玄参产地。方法采用HPLC法测定了重庆市武隆县玄参等14个不同产地玄参样品。色谱条件C18柱,甲醇-1%冰醋酸为流动相进行梯度洗脱,检测波长290 nm,体积流量1.0 ml/min,柱温30℃。结果对重庆市武隆县10批次玄参样品的多个活性成分进行综合评价,筛选出重庆市道地药材玄参为建模对象,合成出玄参的标准HPLC色谱指纹图谱模型;并用此模型和特征成分的相对峰面积比值准确地区分浙江省磐安县等不同产地玄参。结论研究将有助于玄参药材的标准化种植及质量控制。

基于不同Caspase凋亡通路的玄参环烯醚萜总苷抑制心肌梗死模型大鼠心肌细胞凋亡的作用机制研究

目的:研究玄参环烯醚萜总苷抑制心肌梗死模型大鼠心肌细胞凋亡的作用机制。方法:将雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组和玄参环烯醚萜总苷低、中、高剂量给药组,每组10只。采用结扎大鼠左冠状动脉前降支的方法建立心肌梗死模型,假手术组只穿线不结扎。各剂量药物组大鼠在造模成功后分别灌胃玄参环烯醚萜总苷混悬液,每次剂量为50、100、200 mg/kg(以总苷提取物质量计),灌胃体积为10 m L/次,每天2次,连续给药7 d;假手术组和模型组大鼠同法灌胃等体积生理盐水。记录大鼠术前、术后及给药7 d过程中的Ⅱ导联心电图S-T段变化情况;检查大鼠心功能指标;采用比色法、免疫抑制法或酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组大鼠血清中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白Ⅰ(c TnⅠ)、N末端钠尿肽原(NT-pro BNP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;采用TUNEL法观察心肌细胞凋亡情况;采用比色法检测心肌细胞中超氧化物歧化酶(SOD)的活性和丙二醛(MDA)的含量;采用ELISA法、酶解比色法或酶解荧光法检测心肌细胞中Bcl-2、Bax、细胞色素C(Cyt C)、胱天蛋白酶8(Caspase-8)、Caspase-9、Caspase-12、Caspase-3、Calpain的蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠心电图S-T段显著抬高,左室舒张末期内径、左室收缩末期内径均显著增加,左室射血分数、短轴缩短率均显著降低;血清中LDH、CK-MB、cTnⅠ、NT-pro BNP、TNF-α水平均显著升高;心肌组织中有大量黄褐色凋亡细胞;心肌组织中SOD活性显著降低,MDA含量显著升高;心肌细胞中Bcl-2蛋白表达水平及Bcl-2/Bax比值均显著降低,Bax、Cyt C、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、Caspase-12、Calpain的蛋白表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,各剂量药物组大鼠的上述指标及心肌组织病理学变化均有显著改善;心肌细胞中Bcl-2蛋白表达水平及Bcl-2/Bax比值均显著升高,Bax、Cyt C、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、Caspase-12、Calpain的蛋白表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:玄参环烯醚萜苷可同时通过抑制Caspase-8、Caspase-9、Caspase-12相关的3条凋亡通路,继而抑制Caspase-3的激活,从而起到抗心肌细胞凋亡作用。