腹股沟区皮下埋藏睾丸对兔精子发生的影响

目的探讨采用腹股沟区皮下埋藏睾丸的方式修复阴囊皮肤缺损对睾丸精子发生的影响。方法普通级健康6～8月龄新西兰大白兔60只,雄性36只,雌性24只,体重2.5～2.7kg。将雄兔随机分为实验组及对照组,每组各18只。实验组动物将双侧睾丸分别移位埋藏至双侧腹股沟区皮下,以制备睾丸埋藏修复阴囊皮肤缺损模型;对照组未作处理。两组于造模后8周末时采集精液进行常规分析,每组随机取6只兔测量睾丸表面温度,另随机每组取6只兔的睾丸进行活检,应用TUNEL法检测生精细胞凋亡情况。同时将两组未采集活检的雄兔分别与雌兔一一配对喂养,观察生育情况。结果对照组精液密度为(237.3±39.7)×109/L,精子活动率为76.9%±3.8%;实验组精液密度为(4.7±2.7)×109/L,精子活动率为0;两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。对照组的睾丸表面温度为(36.15±0.64)℃,实验组为(38.02±0.36)℃,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。TUNEL检测示:实验组生精上皮变薄,仅存的精原细胞和初级精母见明显凋亡,凋亡指数(apoptotic index,AI)为89.69%±3.76%;对照组可见散在精母细胞和精子细胞凋亡,AI为7.73%±4.95%;两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。实验组配对后对应的母兔均未受孕生崽;对照组配对后对应母兔均受孕生崽,平均生崽数为6只;两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论与皮瓣重建阴囊一样,腹股沟区埋藏睾丸修复阴囊皮肤缺损将导致兔生殖功能障碍,主要因睾丸局部环境温度升高诱导生精细胞过度凋亡所致。

腹股沟区皮下埋藏睾丸对生精细胞凋亡及Bcl-2/Bax蛋白表达的影响

目的:通过观察腹股沟区皮下埋藏睾丸生精细胞的凋亡及Bcl-2/Bax蛋白表达,探讨二者的关系。方法:以健康育龄期36只雄性新西兰大白兔为实验动物,随机分成实验组18只、对照组18只。实验组动物将双侧睾丸分别移位埋藏至双侧腹股沟区皮下,以制备睾丸埋藏修复阴囊皮肤缺损模型;对照组未作处理。动物模型建立后第8周末,每组随机取6只大白兔测量睾丸表面温度后进行睾丸活检。睾丸组织行原位末端标记(TUNEL)法检测生精细胞凋亡、免疫组化法结合图像分析仪检测睾丸生精细胞Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果:对照组的睾丸表面温度为(36.15±0.64)℃,实验组为(38.02±0.36)℃,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。模型建立后第8周末实验组睾丸生精小管中生精细胞的凋亡指数(AI)为(89.69士3.76)%,对照组为(7.73±4.95)%,两者比较有显著差异(P<0.05)。实验组Bax表达显著升高(P<0.05),Bcl-2表达显著降低(P<0.05),凋亡细胞主要为初级精母细胞和圆形精子细胞。结论:腹股沟区皮下埋藏睾丸局部温度升高诱导睾丸的生精细胞凋亡增加,生精细胞凋亡增加与Bcl-2蛋白表达降低、Bax蛋白表达升高密切相关。Bcl-2/Bax的改变是高温引起生精细胞凋亡的机制之一。

Bcl-2/Bax蛋白表达对皮瓣重建兔阴囊生精细胞凋亡的影响

目的:探讨皮瓣重建兔阴囊生精细胞的凋亡与Bcl-2/Bax蛋白表达的关系。方法:将12只育龄期健康雄性新西兰大白兔随机分成实验组和对照组,每组6只。采用温度计埋藏法测量实验组皮瓣重建前阴囊内睾丸表面温度,手术切除实验组动物阴囊,建立皮瓣重建阴囊动物模型,对照组不作处理。动物模型建立后第8周末,实验组动物测量睾丸表面温度后行睾丸活检;对照组直接进行睾丸活检。采用原位末端标记(TUNEL)法检测睾丸生精细胞凋亡指数,免疫组织化学法结合图象分析仪检测睾丸生精细胞Bcl-2/Bax蛋白的表达。结果:实验组模型建立前睾丸表面温度为36.0±0.3℃,模型建立后第8周末睾丸表面温度为38.1±0.6℃(P<0.05)。模型建立后第8周末实验组睾丸生精小管中生精细胞的凋亡指数(AI)为71.85±2.69%,对照组AI为7.73±4.95%(P<0.05)。手术使Bax表达显著升高(P<0.05),Bcl-2表达显著降低(P<0.05);凋亡细胞主要为初级精母细胞和圆形精子细胞。结论:皮瓣重建兔阴囊后睾丸局部温度升高,诱导睾丸生精细胞凋亡增加;生精细胞凋亡增加与Bcl-2基因表达降低、Bax基因表达升高密切相关。细胞内Bcl-2/Bax比值是影响生精细胞凋亡的重要因素之一。