HPLC测定滇黄芩中黄芩苷的含量

目的建立高效液相色谱法测定滇黄芩药材中黄芩苷的含量.方法色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),甲醇-0.2%磷酸(45∶55)为流动相,柱温25℃,流速1 ml·min-1,紫外检测波长280 nm.结果线性范围0.2336～1.1680 μg(r=0.9999),平均回收率为99.13%,RSD=1.13%(n=9).结论所用方法简便、准确、重复性好,可作为滇黄芩药材质量控制的有效方法.

滇黄芩毛状根的诱导及其黄芩苷含量测定

本文利用发根农杆菌A grobacterizum rhizogenes1.2556感染滇黄芩再生苗的茎段和叶片,建立了毛状根培养及其植株再生体系。毛状根可直接从受伤的茎、叶外植体表面产生,在无外源激素的MS固体和液体培养基上自主生长,表现出典型的发根特征。毛状根茎段的诱导率较叶片高,最高可达到14.44%;经rolB基因PCR分析和甘露碱纸电泳检测,证明Ri质粒T-DNA已整合到滇黄芩基因组中并表达;毛状根在附加6-BA2mg/L和NAA0.2mg/L的MS固体培养基上直接诱导不定芽,并在MS培养基上生根,形成再生植株。获得的毛状根系经MS液体培养基培养30d后通过HPLC都能检测到黄芩苷,其中1个转化系黄芩苷含量为2.59%,是药材黄芩的0.20倍,而从3年单位时间黄芩苷生成量计算,毛状根是药材黄芩的7.18倍。本研究建立的毛状根培养体系,将对滇黄芩转基因技术的完善和利用毛状根生产黄芩苷的生物转化提供了实验基础。

滇黄芩中5种重金属残留量的测定

目的建立滇黄芩中5种重金属(铅、镉、砷、汞、铜)的测定方法。方法样品经微波消解,采用石墨炉原子吸收法测定铅、镉、铜;采用原子荧光法测定砷、汞。结果 5种重金属的回收率为98.23%～105.98%。结论该方法简便、准确、可较好的用于滇黄芩中重金属的测定。

滇黄芩幼苗对增强UV-B辐射与干旱胁迫的生理响应

以滇黄芩（Scutellaria amoena C.H.Wright）幼苗为材料,采用盆栽试验,研究了模拟紫外线B波段（UV-B）增强辐射（280-320 nm）和干旱胁迫对滇黄芩幼苗叶片中的丙二醛（MDA）含量、抗氧化酶（SOD、CAT、APX、GR）活性、游离脯氨酸和可溶性糖及类黄酮含量的影响;应用隶属函数值法,对单一胁迫与复合胁迫下的滇黄芩幼苗抗逆性进行综合评价。结果表明,增强UV-B辐射后植株体内的类黄酮含量、抗氧化酶活性、可溶性糖与游离脯氨酸含量均显著增加,MDA含量呈先升后降的变化趋势;干旱胁迫下植株体内SOD和CAT活性始终低于对照,MDA含量显著增加,SOD、APX、GR活性以及游离脯氨酸、可溶性糖、类黄酮含量呈先升后降的变化趋势。增强UV-B辐射与干旱复合胁迫对滇黄芩幼苗的影响,一方面表现为增强UV-B辐射与干旱协同促进了游离脯氨酸和可溶性糖含量的提高（处理20-30 d）;另一方面表现为增强UV-B辐射削弱了干旱对滇黄芩幼苗造成的伤害,植株体内的抗氧化酶活性逐渐恢复或超过正常水平,类黄酮含量显著升高,使胁迫后期（30-40 d）的MDA含量下降。经隶属函数值法分析,得出滇黄芩幼苗的抗逆能力在4个处理里由高到低的顺序依次为增强UV-B辐射、增强UV-B辐射与干旱复合胁迫、对照、干旱胁迫。

滇黄芩不同炮制品中黄芩苷的含量测定研究

目的测定滇黄芩不同炮制品中黄芩苷的含量。方法采用高效液相色谱法,色谱条件为:十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,甲醇-0.2%磷酸(45∶55)为流动相,柱温为25℃,流速为1 ml.min-1,紫外检测波长为280 nm。结果滇黄芩不同炮制品中黄芩苷的含量差异很大,含量依次为生药5.98%,生片4.96%,酒片4.03%。结论该法简便易行,灵敏度高,重现性好,可用于滇黄芩药材及其制剂的质量控制。