广西产半枝莲中黄酮类化学成分研究

目的:对广西产半枝莲的黄酮类成分进行研究。方法:综合利用正反相柱层析、MCI柱层析、HPLC等色谱分离技术对半枝莲全草进行提取分离,并通过波谱数据进行结构鉴定。结果:从半枝莲中共分离和鉴定了5个化合物,分别为白杨素(1)、芹菜素(2)、木犀草素(3)、千层纸素(4)、柚皮素(5)。结论:分离得到的化合物类型均为黄酮类化合物,可为广西半枝莲的黄酮成分分析提供一定的参考。

半枝莲抑制胃癌SGC-7901细胞浸润转移作用及机理

目的研究半枝莲提取物抑制人胃癌SGC-7901细胞浸润转移的作用及机理。方法采用MTT比色法检测半枝莲提取物对人胃癌SGC-7901细胞的抑制作用;采用不同浓度梯度半枝莲提取物干预细胞,应用AnnexinV-FITC/PI双染色凋亡试剂盒,通过流式细胞仪观察细胞的凋亡情况。结果半枝莲提取物能显著地抑制SGC-7901细胞的增殖,并具有浓度依赖性;作用16 h后,细胞生长密度变疏,细胞皱缩,其中95%氯仿半枝莲提取物高浓度组大部分细胞破碎;细胞有明显的凋亡改变。半枝莲黄酮类化合物B作用肿瘤细胞后uPA的表达与阴性对照组相比显著减弱,并呈现统计学意义(P<0.01)。结论半枝莲提取物具有抗胃癌SGC-7901细胞增殖和诱导胃癌细胞凋亡的作用,并能降低uPA的表达。

白花蛇舌草、半枝莲药对及其不同提取部位抗肿瘤作用的实验研究

目的探讨白花蛇舌草、半枝莲药对及其不同提取部位的抗肿瘤作用。方法将接种S180肉瘤细胞的小鼠分为阴性组、阳性(环磷酰胺,CTX)组、白:半配对组,白半水提醇溶组以及白半水提醇沉组。给药12 d后,称重,取材,记录瘤重,计算抑瘤率、生长抑制率,记录肝脏、脾脏质量并计算指数。HE染色方法观察肿瘤组织细胞的形态学特征,ELISA法检测血清IL-2、IFN-γ、TNF-α含量,细胞免疫荧光标记法检测细胞凋亡。结果CTX组、不同给药组抑瘤率分别为83.46%、50.82%、32.79%、36.61%。与阴性对照组相比,CTX组肝指数、脾指数明显降低(P<0.05,P<0.01);给药各组肝指数和脾指数,明显升高(P<0.05,P<0.01)。HE染色显微镜观察,瘤组织出现大面积坏死区,但提取物组细胞坏死较少。用ELISA法测得,各中药给药组能提高机体IL-2、IFN-γ、TNF-α表达水平。体外细胞凋亡实验初步证明白花蛇舌草、半枝莲药对具有细胞毒作用,其提取物细胞毒作用减弱。结论白花蛇舌草、半枝莲药对及其不同提取部位均具有抗肿瘤作用,提取分离后各部分作用均有所减弱,说明中药配伍作用的合理性以及综合性。

半枝莲多糖提取工艺及其免疫活性初步研究

目的:优选半枝莲多糖水提取工艺,并对半枝莲多糖进行免疫活性研究。方法:采用苯酚-硫酸法测定多糖含量,以多糖得率为考察指标,选定温度、时间、提取次数和固液比四因素进行L9(34)正交试验。采用环磷酰胺复制方法构建免疫抑制小鼠动物模型,通过腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验以及血清溶血素抗体生成实验,考察半枝莲粗多糖对免疫抑制小鼠免疫功能的影响。结果:在实验设计水平范围内,水提取最佳工艺条件为温度100℃、提取次数3次、时间3 h、固液比1∶14。该工艺条件下半枝莲多糖得率为1.46%,多糖含量为53.25%。在实验浓度范围内,半枝莲多糖对免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能未见明显增强效果;大剂量(300 mg/kg)半枝莲多糖能显著提高血清溶血素抗体水平,与是否脱蛋白无关。结论:该优化工艺可用于半枝莲多糖的提取,大剂量半枝莲多糖具有一定的免疫活性。

黄金分割法优选半枝莲提取工艺

目的:探讨在半枝莲提取工艺过程将黄金分割法作为筛选方法的可行性。方法:以野黄芩苷和总黄酮含量为考察指标,用黄金分割法和等距法筛选提取半枝莲的乙醇浓度的水平范围,以正交试验验证。结果:半枝莲的最佳提取工艺为15倍70%乙醇回流提取,提取3次,每次1 h。结论:将黄金分割法用于半枝莲提取工艺研究基本可行,可作为中药提取工艺的预筛选方法。

复方白花蛇舌草和半枝莲总黄酮提取工艺的研究

本研究采用正交试验设计法优选复方白花蛇舌草和半枝莲(质量比为1∶1)总黄酮的提取工艺,得到的最佳提取工艺为:用药材30倍量的70%乙醇加热回流提取3次,每次2 h。实验表明本研究所优选的提取工艺方法简便,工艺可行性强。

半枝莲中黄酮成分的提取纯化及LC-MS检测

提取纯化半枝莲中的黄酮成分.方法:采用醇提法提取半枝莲中的黄酮成分,利用大孔树脂法分离纯化,运用液相色谱-质谱联用法(LC-MS)进行检测.结果:半枝莲黄酮成分主要存在于20%乙醇洗脱部分和40%乙醇洗脱部分.结论:结果说明此提取纯化方法具有可行性.

半枝莲粗多糖提取工艺及单糖组分的研究

目的:优化半枝莲粗多糖的提取工艺并测定其单糖的组成。方法:通过单因素实验及正交实验得出不同因素对半枝莲粗多糖提取率的影响,并用气相色谱法测定粗多糖的单糖组成。结果:半枝莲粗多糖提取的最佳工艺为:提取温度60℃,料液比1∶20,提取时间2h,提取次数4次,提取率为2.823%。气相色谱分析结果表明,半枝莲粗多糖主要由7种单糖组成。结论:采用优选的最佳工艺提取半枝莲粗多糖,提取率显著提高,优选的最佳工艺稳定可行,分析得到粗多糖的组分为阿拉伯糖、鼠李糖、核糖、甘露糖、果糖、半乳糖和葡萄糖等。

半枝莲的化学成分研究(Ⅱ)

目的研究半枝莲的化学成分。方法利用多种分离方法,从半枝莲全草的乙醇提取液中分离得到7个化合物,利用理化性质和波谱学分析,鉴定它们的化学结构。结果分离鉴定了7个已知化合物,分别是对羟基苯甲醛(1)、反式-1-(4′-羟基苯基)-丁-1-烯-3-酮(2)、对羟基苯甲酸乙酯(3)、对羟基苯乙酮(4)、松脂素(5)、杜仲树脂酚(6)、豆甾醇(7)。结论化合物5、6为首次从该属植物中分得的已知化合物。

白花蛇舌草-半枝莲药对提取物抑菌活性部位研究

目的通过测定白花蛇舌草-半枝莲药对醋酸乙酯/95%乙醇(1∶1)提取上清液F0、析出浸膏F1、析出浸膏经AB-8大孔树脂富集后组分F2及F2经聚酰胺分离得到的各组分的抑菌活性,寻找药对提取物抑菌活性的活性部位或活性成分。方法采用一剂量法和二倍稀释法测定各提取对5种微生物(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、毛霉、酵母菌)的抑菌活性。结果与结论 F0抑制金黄色葡萄球菌活性最强;F1没有抑菌活性;F1经过大孔树脂富集后组分F2抑菌活性得到显著增强,其抑制枯草芽孢杆菌活性强于F0,抑菌效价值达8.37μg.ml-1;F2经聚酰胺分离得到的F2-10组分是抑制枯草芽孢杆菌的活性部位;各提取物对霉菌和酵母菌均无抑制活性。

半枝莲醇提物抗肿瘤活性的研究

目的 研究中药半枝莲醇提物的抗肿瘤活性。方法 采用小鼠腋下接种肿瘤细胞法测定了半枝莲醇提物的抗肿瘤活性 ;采用MTT法测定了半枝莲醇提物对小鼠脾细胞的增殖活性。结果 半枝莲醇提物对移植性肿瘤 (肉瘤S180 和肝癌H2 2 )具有显著的抑制作用 ,而对小鼠脾细胞的增殖具有促进作用 ,并有较好的剂量依赖关系。

半枝莲抗氧化活性成分的提取

以甲醇、95%乙醇、乙酸乙酯、丙酮、三氯甲烷等不同极性的溶剂对半枝莲进行初步提取,以亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠法、福林-酚法、二苯代苦味酰基自由基法(DPPH法)、铁离子还原法(FRAP法)分别测定粗提物的总黄酮含量、总酚含量、自由基清除能力、总还原力大小。结果显示,以甲醇为溶剂的超声提取物总酚含量最高,为104.39mg/g提取物。采用多种溶剂对半枝莲甲醇超声粗提物进行顺序萃取,其中乙醚萃取物的抗氧化活性较高,总黄酮、总酚含量分别为11.210、105.392mg/g萃取物,DPPH自由基清除能力(EC50)为0.15mg(以甲醇粗提物质量计),总抗氧化值0.468、2.072mmol。结合HPLC分析可知,采用不同极性溶剂对甲醇超声粗提物进行萃取,可对其抗氧化活性物质进行初步分离纯化。

半枝莲水提液和去纳米颗粒水提液在体内外抗肝肿瘤作用的对比研究

目的:探讨半枝莲水提液(SEB)和去纳米颗粒水提液(SEB-RN)体内外的抗肝肿瘤作用。方法:采用体外抑瘤实验培养人肝癌细胞SMMC-772,通过噻唑蓝(MTT)法检测其体外肿瘤抑制率;体内实验采用肝癌H22移植瘤法,以给药前后体质量、肿瘤抑制率、脾脏指数和胸腺指数为指标,对比SEB和SEB-RN的肿瘤抑制作用。结果:体外试验结果表明,环磷酰胺(CTX)组、SEB组和SEB-RN组均对SMMC-7721细胞的增殖有显著抑制作用;与SEB-RN组比较,SEB组对SMMC-7721细胞的增殖抑制率明显更高。体内试验结果表明,与模型组比较,CTX组、SEB组和SEB-RN组均能显著抑制实体瘤生长,与SEB-RN组比较,SEB组肿瘤抑制率明显更高;与模型组比较,CTX组胸腺、脾脏指数明显更低,SEB组、SEB-RN组明显更高,差异均有极显著统计学意义(P<0.01);SEB组胸腺、脾脏指数明显高于SEB-RN组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:SEB和SEB-RN均有一定的抗肿瘤和增强免疫功能的作用,但SEB优于SEB-RN。

半枝莲对结直肠癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用及其机制

目的观察半枝莲提取物对人结直肠癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用,并探讨其作用机制。方法建立人结直肠癌裸鼠皮下移植瘤模型,将24只小鼠随机分为模型组、5-Fu组(阳性对照)、半枝莲低剂量组和半枝莲高剂量组,观察并记录各组裸鼠移植瘤的生长情况,计算肿瘤抑制率。Western blot和免疫组织化学法检测各组裸鼠皮下移植瘤中TWIST和MMP-2表达水平,并分析其相关性。结果半枝莲高剂量组移植瘤瘤重和体积均较模型组明显减轻或缩小,高剂量组抑瘤率与5-Fu组差异无统计学意义(P>0.05);半枝莲高剂量组移植瘤TWIST和MMP-2的表达较模型组均明显降低(P<0.05),与阳性药5-Fu相当。结论一定剂量的半枝莲对人结直肠癌移植瘤具有明显的抑制作用,其机制可能与抑制TWIST和MMP-2的协同表达有关。

半枝莲中总黄酮和多糖的微波提取与含量测定

目的:从半枝莲中提取总黄酮和多糖,并测定其含量。方法:运用微波技术提取半枝莲总黄酮和多糖,用比色法测定总黄酮和多糖含量。结果:测得半枝莲中总黄酮含量为3.74%,平均回收率为98.91%,相对标准偏差(RSD)为2.01%(n=5);多糖含量为5.79%,平均回收率为101.3%,相对标准偏差(RSD)为3.0%(n=5)。结论:运用微波技术从半枝莲中联合提取总黄酮和多糖,反应速度加快,提高了提取效率。

紫外光谱在线监控动态微波辅助萃取半枝莲中的野黄芩苷

建立一种动态微波辅助萃取方法,用于萃取半枝莲中的野黄芩苷.应用紫外光谱对整个过程在线监控,实现了整个萃取过程的可视化.用正交实验优化微波萃取条件.实验结果表明,所建立的方法可以防止被测物的分解,减少萃取时间和溶剂的消耗.野黄芩苷的质量浓度采用高效液相色谱进行离线测定,得到的检出限和定量测定下限分别为0.28 mg/L和0.93 mg/L,日内和日间精密度(RSD)分别为1.7%和3.6%,平均加标回收率为98.3%.

响应面试验优化超临界法萃取半枝莲黄酮工艺

采用超临界法萃取半枝莲黄酮工艺,在单因素基础上,考察各个因素对半枝莲黄酮萃取率的影响。结果表明:最佳萃取工艺参数为超临界压力35 MPa、超临界温度52℃、萃取时间59 min、乙醇浓度78%,在此工艺参数下做3次平行试验,3次试验的半枝莲黄酮萃取率为94.84%。方差分析结果表明,影响半枝莲黄酮萃取率因素大小依次为超临界压力>超临界温度>乙醇浓度>萃取时间。

不同产地半枝莲中浸出物含量的比较研究

依据《中华人民共和国药典》附录中记载的浸出物含量测定方法,对不同产地的半枝莲进行了水溶性和醇溶性浸出物含量测定,为建立半枝莲药材质量标准提供了依据。

半枝莲醇提取物调控circ_0092283/miR-198对结直肠癌细胞克隆形成和凋亡的影响

目的:探讨半枝莲醇提取物(EESB)对结直肠癌细胞HCT-116克隆形成和凋亡的影响及可能机制。方法:HCT-116细胞分为不同剂量(0,200,400,800μg·ml-1)EESB组、circ0092283小干扰RNA(si-circ0092283)组、小干扰RNA阴性对照(si-NC)组、400μg·ml-1 EESB+circ0092283过表达载体(pcDNA-circ0092283)组、400μg·ml-1EESB+miR-198抑制剂(anti-miR-198)组,克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹(Western Blot)法检测细胞中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)蛋白表达,实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测circ0092283和miR-198表达。收集30例结直肠癌患者的癌组织和癌旁组织,培养HCT-116和肠上皮细胞HIEC-6,RT-qPCR法检测组织和细胞中circ0092283和miR-198表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证circ0092283和miR-198调控关系。结果:不同剂量(200,400,800μg·ml-1)的EESB作用于HCT-116细胞或干扰circ0092283表达后,HCT-116细胞克隆形成数和细胞中Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05),细胞凋亡率和细胞内Bax蛋白表达升高(P<0.05)。结直肠癌组织和HCT-116细胞中circ0092283呈高表达,而miR-198呈低表达。circ0092283靶向负调控miR-198。EESB抑制circ0092283表达,而促进miR-198表达;过表达circ0092283或抑制miR-198表达可降低EESB对HCT-116细胞克隆形成、细胞凋亡和Bal、Bax蛋白表达的影响。结论:EESB可能通过调控circ0092283/miR-198轴降低结直肠癌HCT-116细胞的克隆形成能力,并促进HCT-116细胞凋亡。

糖尿病小鼠免疫指数、胰腺线粒体自由基的变化及半枝莲黄酮的干预作用

目的观察糖尿病小鼠免疫指数、胰腺线粒体自由基的变化及半枝莲黄酮(SBF)对这些变化的干预作用。方法利用四氧嘧啶诱导糖尿病小鼠模型,观察SBF对糖尿病小鼠血糖、体质量、胸腺指数、脾脏指数以及胰腺线粒体超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH-Px)活力和丙二醛(MDA)含量的影响。结果与正常组相比,四氧嘧啶诱导糖尿病小鼠血糖明显升高,体质量、胸腺指数、脾脏指数明显降低,胰腺线粒体SOD、GSH-Px活力均显著降低,MDA含量明显升高。而SBF 17.5、35、70 mg/kg对四氧嘧啶诱导糖尿病小鼠上述异常变化均有不同程度的改善。结论 SBF对糖尿病小鼠有显著的降血糖作用,作用机制可能与其提高免疫力和抗氧化作用密切相关。