半枝莲抑制肿瘤血管生成的作用及其机制研究

背景与目的:以血管再生作为靶点的诸多化学合成药物在有效抑制血管生成的同时具有不可抵抗的副作用,近年来国内外都在致力于从天然药物中开发肿瘤血管生成阻断剂。作为传统抗癌有效药物半枝莲,其阻断血管生成的作用研究少见报道。本实验拟探讨其对肿瘤血管生成的抑制作用及其可能的机制。方法:采用Matrigel栓、原代人脐静脉内皮细胞(humanumbilicalvascularendotheialcell,HUVEC)建立体内外血管生成模型,观察半枝莲对血管生成的影响;通过Transwell小室趋化实验检测半枝莲对宫颈癌细胞HeLa培养上清诱导内皮细胞迁移能力的影响;采用酶联免疫吸附法(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)检测半枝莲对HeLa细胞血管内皮细胞生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)蛋白水平的影响。结果:半枝莲能明显抑制Matrigel栓内微血管的形成;体外小管形成实验发现,20%、40%半枝莲含药血清组小管形成数为(5.6±1.1)、(1.0±0.7),与同浓度空白血清组(9.8±1.3和13.4±1.1)相比有显著性差异(P值分别为0.001、0.000)。经20%、40%半枝莲含药血清处理后内皮细胞迁移数分别为(19.75±2.63)、(14.00±2.58),明显少于同浓度空白血清组(24.25±2.06和26.50±4.65)(P值分别为0.038、0.006)。40%含药血清作用24、48h后HeLa细胞VEGF表达量分别为(138.67±9.50)、(93.84±41.11),与空白血清组(195.82±2.43和193.68±18.37)相比具有显著性差异(P值分别为0.006、0.036)。结论:半枝莲能有效抑制肿瘤血管生成,其机制可能与阻断内皮细胞迁移、下调VEGF蛋白表达有关。

半枝莲提取物诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及其对凋亡相关蛋白表达的影响

目的探讨半枝莲提取物(Scutellaria barbata D.Don extract,SBE)对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bcl-2,Survivin和Caspase-3表达的影响。方法体外培养SMMC-7721细胞,以2.5,5和10 mg.L-1SBE处理48 h,并以2.5 mg.L-1顺铂(DDP)作为阳性对照。用MTT法检测细胞抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,二步法免疫组化检测Bcl-2,Survivin和Caspase-3蛋白表达。结果与正常对照组相比,SBE各浓度组细胞抑制率显著升高(P(0.001),细胞凋亡率明显上升(P(0.01),Caspase-3蛋白表达显著上升(P<0.01或P<0.05),Bcl-2和Survivin蛋白表达明显下降(P<0.01或P<0.05)。结论SBE具有诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡的作用,其分子机制可能与上调Caspase-3蛋白表达以及下调Bcl-2和Survivin蛋白表达有关。

半枝莲对宫颈癌细胞钙信号系统的影响

为探讨半枝莲对Hela细胞胞内游离钙浓度的影响及其抗癌作用机理。利用荧光染料Fura 2在细胞内能与游离钙结合 ,在一定波长光的激发下可发出荧光的特性 ,根据荧光的强度来检测游离钙的变化 ,结果显示半枝莲对Hela细胞增殖的抑制作用不明显 ,但可通过促进细胞内储藏钙的释放和胞外钙离子的内流 。

半枝莲化学成分研究

研究了半枝莲Scutellaria barbata D.Don的化学成分。利用硅胶色谱、Sephadex LH-20凝胶色谱、HPLC等手段对化学成分进行分离纯化;通过理化性质、波谱分析方法结合文献对照,鉴定了化合物的结构。从半枝莲甲醇提取物中,共分离鉴定了10个单体化合物:齐墩果酸(1)、熊果酸(2)、反式-4-甲基肉桂酸(3)、金色酰胺醇酯(4)、对羟基苯甲醛(5)、对羟基苯乙酮(6)、5-羟基-7,3′,4′,5′-四甲氧基黄酮(7)、芹菜素(8)、5,7,4′-三羟基-8-甲氧基黄酮(9)、5,7,4′-三羟基-6-甲氧基黄酮(10)。化合物1、3、7为首次从该植物中分离得到。

中药半枝莲黄酮类成分的分离与结构鉴定

目的对中药半枝莲(Scutellaria barbata D.Don)全草的化学成分进行研究。方法应用大孔树脂、正相硅胶、反相ODS、Sephadex LH-20以及制备型高效液相等色谱法对中药半枝莲的化学成分进行了分离;并通过理化性质和光谱数据对化合物的结构进行了鉴定。结果分离鉴定了7个黄酮类化合物,分别为芹菜素(apigenin1,)、木犀草素(luteolin,2)、5,7,4'-三羟基-8-甲氧基黄酮(5,7,4'-trihydroxy-8-methoxyflvone,3)、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(apigenin-7-O-β-D-glucuronide,4)、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯(apigenin-7-O-β-D-glucuronide methyl ester,5)、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷(apigenin-5-O-β-D-glucopyranoside,6)、山奈酚-3-O-β-D-芦丁糖苷(kaempferol-3-O-β-D-rutino-side,7)。结论化合物4-7为半枝莲植物中首次分离得到。

半枝莲醇提物抗肿瘤活性的研究

目的 研究中药半枝莲醇提物的抗肿瘤活性。方法 采用小鼠腋下接种肿瘤细胞法测定了半枝莲醇提物的抗肿瘤活性 ;采用MTT法测定了半枝莲醇提物对小鼠脾细胞的增殖活性。结果 半枝莲醇提物对移植性肿瘤 (肉瘤S180 和肝癌H2 2 )具有显著的抑制作用 ,而对小鼠脾细胞的增殖具有促进作用 ,并有较好的剂量依赖关系。

半枝莲的化学成分研究(Ⅱ)

目的研究半枝莲的化学成分。方法利用多种分离方法,从半枝莲全草的乙醇提取液中分离得到7个化合物,利用理化性质和波谱学分析,鉴定它们的化学结构。结果分离鉴定了7个已知化合物,分别是对羟基苯甲醛(1)、反式-1-(4′-羟基苯基)-丁-1-烯-3-酮(2)、对羟基苯甲酸乙酯(3)、对羟基苯乙酮(4)、松脂素(5)、杜仲树脂酚(6)、豆甾醇(7)。结论化合物5、6为首次从该属植物中分得的已知化合物。

HPLC／ESI-MS法鉴定半枝莲乙酸乙酯组分中黄酮苷元类化合物

利用正离子模式电喷雾质谱研究了包括正黄酮、异黄酮、二氢黄酮、异二氢黄酮和黄酮醇在内的5个黄酮亚类苷元的质谱断裂碎片,并得到了能够区别鉴定这5类黄酮苷元的特征碎片离子。其中,2个CO的连续丢失可以看作异黄酮的特征断裂,[0,4B-H2O+H]+是二氢黄酮的特征碎片离子,黄酮醇和异二氢黄酮则主要发生0,2键和2,3键的断裂,分别形成特征的0,2A+和2,3B+碎片离子。在此基础上,利用高效液相色谱与电喷雾质谱联用技术对半枝莲乙酸乙酯组分中的化合物进行研究,确定了异红花素(isocarthamidin)、印黄芩素(scutellarin)、木樨草素(luteolin)、柚皮素(naringenin)、4’-羟基汉黄芩素(4-’hydroxy-wogonin)和芹菜素(apigenin)6个黄酮苷元,并结合紫外光谱信息和质谱碎片信息,对另外6个黄酮苷元类化合物进行初步的结构推断。

氨磺灵离体诱导半枝莲多倍体的研究

目的:获得半枝莲多倍体植株。方法:离体条件下应用氨磺灵对半枝莲茎段外植体进行了不同浓度和时间的处理。结果:获得了半枝莲变异株,与二倍体植株相比,变异植株形态特征变化明显,植株株型紧凑,叶片颜色深绿,叶型指数变小,茎段变粗,气孔、保卫细胞明显增大,保卫细胞叶绿体数明显增多,气孔密度明显减小。经染色体计数和流式细胞仪检测,获得的变异株为二倍体和四倍体的嵌合体。结论:该方法可以作为半枝莲多倍体的诱导方法。

半枝莲的化学成分

目的对黄芩属植物半枝莲(Scutellaria barbataD.Don)的抗肿瘤活性部位(氯仿萃取物和正丁醇萃取物)的化学成分进行分离、鉴定。方法用体积分数为70%的乙醇加热回流提取干燥药材,经石油醚、氯仿、正丁醇分步萃取,利用反复硅胶柱色谱、聚酰胺柱色谱、Sephadex LH 20凝胶柱色谱进行分离、纯化,根据理化性质和核磁共振氢谱、碳谱数据对所得化合物进行结构鉴定。结果得到8个化合物,分别鉴定为对羟基苯甲醛(1)、3,4二羟基苯甲酸(2)、对羟基苯乙酮(3)、5,7,4′三羟基8甲氧基黄酮(4)、5,7,4′三羟基6甲氧基黄酮(5)、5,7,4′三羟基黄酮(6)、5,4′二羟基6,7,3′,5′四甲氧基黄酮(7)、5羟基4′甲氧基黄酮7OαL鼠李糖基(1→6)βD吡喃葡萄糖苷(8)。结论化合物7、8为半枝莲中首次分离得到。

半枝莲中总黄酮和多糖的微波提取与含量测定

目的:从半枝莲中提取总黄酮和多糖,并测定其含量。方法:运用微波技术提取半枝莲总黄酮和多糖,用比色法测定总黄酮和多糖含量。结果:测得半枝莲中总黄酮含量为3.74%,平均回收率为98.91%,相对标准偏差(RSD)为2.01%(n=5);多糖含量为5.79%,平均回收率为101.3%,相对标准偏差(RSD)为3.0%(n=5)。结论:运用微波技术从半枝莲中联合提取总黄酮和多糖,反应速度加快,提高了提取效率。

半枝莲提取物诱导人肺癌SPC-A-1细胞凋亡及对凋亡相关基因表达的影响

目的:探讨半枝莲提取物(Scutellaria barbataextract,SBE)对人肺癌SPC-A-1细胞凋亡及凋亡相关基因survivin和caspase-3表达的影响。方法:体外培养肺癌SPC-A-1细胞,以2.5、5、10 mg/L SBE处理SPC-A-1细胞48h,并以2.5 mg/L顺铂(DDP)作为阳性对照。用MTT法检测细胞抑制率,TUNEL法检测凋亡率,半定量RT-PCR检测survivin和caspase-3 mRNA表达。结果:与正常对照组相比,SBE各组细胞抑制率显著上升(P<0.001),细胞凋亡率明显升高(P<0.01),Caspase-3 mRNA表达显著上升(P<0.05或P<0.01),Survivin mRNA表达明显下降(P<0.05或P<0.01)。结论:SBE具有诱导肺癌SPC-A-1细胞凋亡的作用,其分子机制可能与上调caspase-3及下调survivin基因表达有关。

几种传统中药中多糖的提取及抗肿瘤活性研究

采用超声提取黄药子、黄药子+当归(质量比3∶2)、白花蛇舌草+半枝莲(质量比3∶2)三味传统中药的单复方药中的多糖成分,并应用比色法原理对提取的多糖含量进行测定,其中黄药子+当归(质量比3∶2)的粗多糖含量最大,为16.509%。经测定3种多糖都有一定的抗肿瘤活性,其活性次序为黄药子+当归(3∶2)>白花蛇舌草+半枝莲(3∶2)>黄药子。

半枝莲提取物对DEN诱发大鼠肝癌的抑制作用

目的:探讨半枝莲提取物(Scutellaria barbateextracts,ESB)对二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)诱发大鼠肝癌形成的抑制作用。方法:采用低剂量DEN间断给药诱发大鼠肝癌模型。60只清洁级雄性SD大鼠随机分为4组:正常对照组,模型组,ESB高、低剂量组,每组15只。实验16周后停止给药,实验第18周处死所有大鼠,观察各组大鼠肝表面癌结节数、大鼠体质量、肝质量、肝/体质量比,比较各组大鼠体质量的改变,检测血清肝功指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、α-L-岩藻糖苷酶(AFU),并进行肝脏病理组织学检查。结果:造模各组大鼠的ALT、AST、TBIL、ALP、γ-GT、AFU均显著升高(P<0.05),ESB治疗可以减轻肝脏损害。与肝癌模型组比较,ESB各剂量组血清各项肝功指标水平显著下降。病理组织学显示,ESB各剂量组肝脏表面癌结节数较肝癌模型组明显减少,且癌细胞分化程度高。结论:ESB对大鼠实验性肝癌形成具有一定的抑制作用,并能改善肝功能的各项指标。

半枝莲的化学成分

目的对唇形科黄芩属植物半枝莲(Scutellaria barbataD.Don)的化学成分进行分离、鉴定。方法采用反复硅胶柱色谱、制备薄层色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱和重结晶等多种分离方法对半枝莲的乙醇提取物进行分离。利用理化性质和波谱学分析鉴定了所得化合物的化学结构。结果分离鉴定了7个化合物,分别是:大黄素甲醚(physcion,1)、d-丁香脂素(d-syringaresinol,2)、5,4′-二羟基-6,7,3′,5′-四甲氧基黄酮(5,4-′dihydroxy-6,7,3′,5-′tetramethoxyflavone,3)、4′-羟基汉黄芩素(4-′hydroxywogonin,4)、6-甲氧基柚皮素(6-methoxynaringenin,5)、芹菜素(apigenin,6)、柚皮素(naringenin,7)。结论化合物1和2为首次从该属植物中分得的已知化合物。

半枝莲多糖的提取纯化及抗氧化活性研究

目的研究半枝莲多糖的分离纯化及抗氧化作用。方法采用正交试验L9(34)对半枝莲多糖提取工艺进行优化,并利用DEAE-Cellulose-52和Sepharose 4B柱色谱进一步纯化多糖组分;分光光度法测定半枝莲多糖对小鼠红细胞溶血、小鼠血清、肝组织中的超氧化物岐化酶(SOD)活力以及过氧化产物丙二醛(MDA)生成的影响。结果半枝莲多糖提取工艺的最佳条件为温度70℃,提取6 h,料水比1∶30,温度是提取多糖的关键影响因素。抗氧化活性实验表明半枝莲多糖的两个组分SBPW、SBPS在一定浓度范围内均能降低化学法诱导的红细胞溶血和肝组织过氧化物损伤;能剂量依赖性提高小鼠血清、肝组织中的SOD活力,降低小鼠血清、肝组织中MDA的水平。结论SBPW和SBPS具有较好的抗氧化作用。

半枝莲多糖对小鼠S_(180)肉瘤抑制作用的研究

探讨半枝莲多糖对体内S180肉瘤肿瘤抑制作用及相关机制.采用动物移植性肿瘤实验观察半枝莲多糖对小鼠体内肿瘤细胞生长的影响,ELISA法检测对荷瘤小鼠外周血血清中白细胞介素-2和干扰素-α质量浓度的影响.结果显示,半枝莲多糖对S180肉瘤生长的抑制率以中剂量为佳;各剂量组均对脾脏指数有显著性差异,能够提高S180荷瘤小鼠外周血血清中白细胞介素-2及干扰素-α的质量浓度,但中剂量最为显著,表明半枝莲多糖在小鼠体内具有抑制S180肉瘤的作用.

半枝莲提取物及黄酮成分抗肿瘤药理研究进展

半枝莲为民间常用抗肿瘤药,随着中药现代技术的应用,对其产生作用的物质基础作了深入的研究,发现其主要含有黄酮类化合物。对黄芩属植物半枝莲提取物及黄酮成分的抗肿瘤药理研究和应用前景进行综述,为进一步对半枝莲进行新药研究和开发工作提供依据。

半枝莲的化学成分

目的:对黄芩属植物半枝莲Scutellaria barbata D.Don全草的抗肿瘤活性部位(三氯甲烷萃取物)的化学成分进行分离、鉴定。方法:采用反复硅胶、LH-20葡聚糖凝胶等柱色谱方法进行分离纯化,并通过理化常数测定与谱学分析鉴定其化学结构。结果:得到7个化合物,分别鉴定为木犀草素(1),柚皮素(2)、半枝莲酸(3),2,4-二羟基苯甲酸(4),香豆酸乙酯(5),β-谷甾醇(6),胡萝卜苷(7)。结论:化合物4、5为首次从半枝莲中分离得到。

半枝莲挥发性化学成分分析

通过分析半枝莲挥发性化学成分,为半枝莲的开发利用提供实验依据。采用同时蒸馏-萃取法提取半枝莲挥发性化学成分,用气相色谱法分离,质谱法鉴定其结构。结果表明,半枝莲挥发油的含量为1.84%,鉴定出35种化学成分,其中呋喃甲醛、麝香草酚和十六烷酸含量较高。