基于“芍药甘草基”重探《伤寒论》黄芩汤

《伤寒论》黄芩汤中的“芍药甘草基”有育阴解痉止痛和育阴清热利水两大功用,基于“芍药甘草基”可以更好地解释《伤寒论》黄芩汤条文和方证的内涵。黄芩汤所涉的两条条文,一为正治,一为误治:误治是由于医家问诊未问及先前之“厥”,脉诊未按及刻下之“迟”,未能够将“发热下利”准确地辨证为“虚寒厥利”,或“相对斯须,便处汤药”,而犯“虚虚、寒寒”之戒;正治则是能够充分认识到太阳内陷之热或少阳胆腑郁热迫三焦津液,借阳明谷道合出利下的病机,而处以“芍药甘草基”加黄芩、大枣而成的黄芩汤,共奏清热育阴利小便、缓急解痉止痛之功。以“芍药甘草基”利小便,不仅能够育阴以恢复阴营之滋润,尚可以补虚损、存津液,而无渗利、通利等攻伐之品损伤正气的弊端,足以显现张仲景组方时“顾护胃气”的思想。黄芩汤为治热泻、热痢之方,只能说“发热下利”之热泻、热痢可用黄芩汤,但并不是见“发热下利”就用黄芩汤。另外,虽然黄芩汤方证之外症可能有“腹痛”,但只有“热利”的腹痛才能用黄芩,“中寒”的腹痛则不能用。

双辛颗粒质量标准的研究

目的 :建立双辛颗粒 (苍耳子、辛夷、白芷、细辛 ,金银花 ,忍冬藤、蒲公英、甘草 ,桔梗、菊花、黄芩、赤芍、薏苡仁 ,生地 )的质量标准。方法 :采用TLC法为处方中的黄芩、赤芍、白芷、蒲公英、甘草制定了定性鉴别方法 ;用高效液相色谱法制定了制剂中黄芩苷含量的测定方法。结果 :在TLC图谱中可检出黄芩、赤芍、白芷、蒲公英、甘草的特征斑点 ;黄芩苷在 0 .0 590 4～ 0 .3542 4 μg间线性关系良好 ,r =0 .9999。 结论 :所建立的方法准确可靠 ,可用于该制剂的质量控制。

赤芍黄芩配伍微波提取工艺研究

以乙醇溶液为溶剂,采用微波法提取赤芍黄芩配伍中的主要成分芍药苷和黄芩苷,用高效液相色谱法测定芍药苷和黄芩苷含量。采用正交设计和单因素试验考察了微波功率、进料泵频率、提取溶剂体积分数、料液比、浸泡时间等因素对有效成分提取率的影响。结果显示优化的提取工艺条件为原料提取前浸泡9 h,微波提取功率36 kW,进料泵频率为9 Hz,体积分数50%的乙醇作为提取溶剂,料液比为1∶12(m∶V,g/mL),此时芍药苷和黄芩苷的提取率分别为1.84%和2.91%。优化的微波提取法所得有效成分提取率高于超声提取法和回流提取法。

美诺平胶囊的质量标准研究

目的:建立美诺平胶囊的质量标准。方法:以TLC法对美诺平胶囊中的黄芩、赤芍、白花蛇舌草3味药进行定性鉴别;以HPLC测定美诺平胶囊中丹参素的含量。结果:定性鉴别分离度好,专属性强;以HPLC测定该胶囊剂中丹参素的含量,方法精密度、稳定性、重复性良好,平均回收率101.88%,RSD为1.71%。结论:本试验所确定的质量分析方法稳定可靠,能作为美诺平胶囊剂的质控标准。

愈伤接骨丹薄层色谱定性鉴别研究

目的建立愈伤接骨丹的薄层色谱定性鉴别方法。方法采用薄层色谱法对愈伤接骨丹中的黄芩、大黄、苏木、赤芍、乳香进行定性鉴别。结果薄层色谱斑点清晰,阴性对照无干扰。结论所建立方法可用于愈伤接骨丹的质量控制。

黄芩-赤芍药对不同比例配伍抗大鼠肝纤维化模型作用机制探讨

目的:本研究旨在通过观察不同配伍比例的黄芩-赤芍对肝纤维化模型大鼠肝脏组织中Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核转录因子-κB(NF-κB)和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路表达水平的影响,探讨其干预肝纤维化的作用机制。方法:将60只SPF级雄性SD大鼠随机分正常、模型、水飞蓟素、黄芩-赤芍(1∶1)、黄芩-赤芍(1∶2)、黄芩-赤芍(1∶4)6组,每组10只。除正常组外,其余各组大鼠腹腔注射40%四氯化碳橄榄油溶液3 mL·kg^(-1)造模,首次5 mL·kg^(-1),每周2次,共计8周。后4周分别给予各组大鼠10 mL·kg^(-1)相应药物灌胃,并连续8周称量各组大鼠体质量。给药结束后,观察肝组织病理学变化,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、透明质酸(HA)和层黏蛋白(LN)、白蛋白(ALB)、碱性磷酸酶(AKP)及肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性,丙二醛(MDA)、羟脯氨酸(HYP)水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠肝脏中TLR4、MyD88、NF-κB、PI3K、Akt、mTOR mRNA的表达水平。结果:与模型组比较,不同比例黄芩-赤芍均能回调各组大鼠体质量、改善肝脏病理损伤程度。酶联免疫吸附测定法(ELISA)结果显示,与正常组比较,模型组ALT、AST、HA、LN、AKP、MDA、HYP水平均有不同程度升高(P<0.05);与模型组比较,各给药组可明显降低ALT、AST、HA、LN、AKP、MDA、HYP含量及明显升高肝SOD活性、ALB水平(P<0.05)。Real-time PCR结果显示,与正常组比较,模型组TLR4、MyD88、NF-κB、PI3K、Akt、mTOR mRNA表达明显升高(P<0.05);与模型组比较,各给药组均能降低大鼠肝脏中TLR4、MyD88、NF-κB、PI3K、Akt、mTOR mRNA表达(P<0.05)。结论:不同比例黄芩-赤芍均可改善四氯化碳引起的肝组织病理学损伤,以黄芩-赤芍(1∶4)组疗效最佳。黄芩-赤芍可能通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB和PI3K/Akt/mTOR信号通路的表达而抑制肝纤维化的发展,从而缓解化学药物引起的肝损伤。

基于HPLC指纹图谱、多指标成分含量测定及化学计量学的槐芩软膏质量评价

目的:建立指纹图谱和多指标定量与化学计量学相结合的槐芩软膏质量评价方法。方法:采用Agilent Extend C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温25℃,流动相为乙腈-0.2%磷酸水溶液,梯度洗脱,体积流量为1.0 mL·min^(-1),检测波长230 nm。利用中药色谱指纹图谱相似度评价软件(2012A版)对10批槐芩软膏建立指纹图谱,确定共有峰并进行相似度评价,并对芍药苷、芦丁、染料木苷、槐角苷、柚皮苷、新橙皮苷、黄芩苷、汉黄芩苷和丹皮酚的含量测定方法进行方法学验证。基于指纹图谱共有峰峰面积测定结果,采用聚类分析和主成分分析等化学计量学方法对不同批次的槐芩软膏进行质量评价。结果:在指纹图谱研究中,标定了21个共有峰,通过与对照品比较指认其中9个色谱峰,并对指认共有峰进行了含量测定。10批槐芩软膏与对照图谱的相似度均在0.90以上。9个成分在各自的质量浓度范围内线性关系良好,平均加样回收率为97.4%~99.2%,RSD为0.86%~1.4%;10批次样品中芍药苷、芦丁、染料木苷、槐角苷、柚皮苷、新橙皮苷、黄芩苷、汉黄芩苷和丹皮酚的含量分别为5.34~6.31、3.67~4.81、0.76~1.27、10.95~12.70、6.70~7.14、6.78~7.15、17.45~18.92、4.08~4.36、0.57~0.69 mg·g^(-1)。共聚为3类,样品1和2聚为1类,样品6聚为1类,其余样品聚为1类;主成分1~4是影响槐芩软膏质量评价的主要因子。结论:所建立的槐芩软膏质量评价方法准确、高效、重复性和稳定性好,特征性强,可用于槐芩软膏的质量控制。

基于全方特征图谱质量表征的芩连制剂质量评价研究

目的建立芩连制剂特征图谱质量表征方法,以全面表征芩连制剂质量,并应用于芩连制剂的质量评价。方法采用UHPLC-DAD多波长分析方法,Waters Cortecs T3(100 mm×2.1 mm,1.6μm)色谱柱,以乙腈(含0.02%甲酸)-(10 mol/L乙酸铵-0.09%甲酸缓冲液)为流动相,梯度洗脱,体积流量0.3 mL/min,柱温30℃,检测波长230、330 nm。结果建立了芩连制剂特征图谱质量表征方法,指认了38个特征峰,且检测了12个指标性成分的含量,平均加样回收率为83.58%~106.76%;测得11批芩连制剂中12个指标性成分质量分数分别为连翘酯苷A 0.21~9.08 mg/g、盐酸黄柏碱0.39~1.91 mg/g、芍药内酯苷0.13~9.28 mg/g、芍药苷3.02~20.24 mg/g、甘草苷0.19~0.51 mg/g、黄芩苷12.36~27.64 mg/g、1,2,3,4,6-五-O-倍酰-D-葡萄糖(PGG)0.22~3.63 mg/g、汉黄芩苷1.92~6.12 mg/g、连翘苷0.22~4.10 mg/g、盐酸小檗碱5.37~16.85 mg/g、盐酸巴马汀0.53~2.26mg/g、甘草酸0.45~2.06mg/g。不同厂家及其不同批次芩连制剂中成药的质量表征差异主要来源于黄芩(峰22、38、27)、赤芍[峰2、21(PGG)、7(芍药内酯苷)]、连翘[峰36(连翘酯素)、30]、黄连(峰24)、黄连-川黄柏(峰8、4)、连翘-赤芍(峰3)。结论建立的特征图谱质量表征方法可全面地表征与评价芩连制剂中成药,为该类品种的质量控制提供了科学依据,亦为中成药的质量控制提供方法学借鉴。