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嗜热革节孢内切葡聚糖酶EGⅠ中精氨酸Arg7的功能分析
1
作者
于伟帅
李多川
《山东农业科学》
2020年第2期19-26,共8页
本研究将嗜热革节孢GH45家族内切葡聚糖酶EGⅠ中的底物结合位点精氨酸Arg7进行饱和突变,测定其性质、动力学参数的变化,以期分析精氨酸Arg7的功能。结果表明,与原酶相比,突变酶R7A的Km有所下降,R7P的kcat显著性提高,但突变酶的kcat/Km...
本研究将嗜热革节孢GH45家族内切葡聚糖酶EGⅠ中的底物结合位点精氨酸Arg7进行饱和突变,测定其性质、动力学参数的变化,以期分析精氨酸Arg7的功能。结果表明,与原酶相比,突变酶R7A的Km有所下降,R7P的kcat显著性提高,但突变酶的kcat/Km均显著性降低。原酶的最适反应温度为50℃,突变酶R7C、R7P和R7V的则为40℃,其余突变酶的均为50℃。原酶于70℃下处理2 h具有61%的活性,相同处理条件下,突变酶R7F、R7H仍具有70%以上的活性,说明其热稳定性明显提高,R7A仅有20%的活性,剩余突变酶均有40%左右的活性。原酶的反应最适pH值为5. 0,而突变酶R7C的为6. 0,剩余突变酶的均为5. 0。本试验探究了精氨酸Arg7饱和突变后嗜热革节孢GH45家族内切葡聚糖酶的性质变化,可为GH45家族进一步的分子改造和功能研究提供参考。
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关键词
嗜热革节孢
内切葡聚糖酶
饱和突变
酶学性质
热稳定性
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职称材料
题名
嗜热革节孢内切葡聚糖酶EGⅠ中精氨酸Arg7的功能分析
1
作者
于伟帅
李多川
机构
山东农业大学植物保护学院
出处
《山东农业科学》
2020年第2期19-26,共8页
基金
国家科技支撑计划项目(2015BAD15B05)
国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA10180402)
国家自然科学基金项目(31571949)
文摘
本研究将嗜热革节孢GH45家族内切葡聚糖酶EGⅠ中的底物结合位点精氨酸Arg7进行饱和突变,测定其性质、动力学参数的变化,以期分析精氨酸Arg7的功能。结果表明,与原酶相比,突变酶R7A的Km有所下降,R7P的kcat显著性提高,但突变酶的kcat/Km均显著性降低。原酶的最适反应温度为50℃,突变酶R7C、R7P和R7V的则为40℃,其余突变酶的均为50℃。原酶于70℃下处理2 h具有61%的活性,相同处理条件下,突变酶R7F、R7H仍具有70%以上的活性,说明其热稳定性明显提高,R7A仅有20%的活性,剩余突变酶均有40%左右的活性。原酶的反应最适pH值为5. 0,而突变酶R7C的为6. 0,剩余突变酶的均为5. 0。本试验探究了精氨酸Arg7饱和突变后嗜热革节孢GH45家族内切葡聚糖酶的性质变化,可为GH45家族进一步的分子改造和功能研究提供参考。
关键词
嗜热革节孢
内切葡聚糖酶
饱和突变
酶学性质
热稳定性
Keywords
scytalidium thermophilium
Endoglucanase
Saturation mutation
Enzymatic properties
Thermal stability
分类号
Q783 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
嗜热革节孢内切葡聚糖酶EGⅠ中精氨酸Arg7的功能分析
于伟帅
李多川
《山东农业科学》
2020
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