Sdf1-Cxcr4信号在斑马鱼后侧线系统发育中的作用

为了探究Sdf1-Cxcr4信号在斑马鱼(Danio rerio)后侧线系统(Posterior lateral line system,PLLs)发育中的作用,本研究首先通过原位杂交发现斑马鱼cxcr4b在迁移的侧线原基-Ⅰ和原基-Ⅱ中表达,sdf1a在原基迁移路径上表达。进一步构建了由热激启动子控制的cxcr7b过表达转基因斑马鱼,在不同时间点过表达cxcr7b抑制Sdf1-Cxcr4信号。结果表明:相较于野生型斑马鱼,过表达cxcr7b的斑马鱼的原基-Ⅰ和原基-Ⅱ的迁移明显减慢。但体侧中线神经丘的腹部迁移、间生和针脚神经丘的形成不受过表达cxcr7b的影响。本研究为理解鱼类侧线系统发育调控和多样性产生奠定基础。

沉默MAT1基因通过SDF1-CXCR4信号通路抑制骨肉瘤细胞增殖与迁移

目的探讨沉默MAT1基因表达对骨肉瘤细胞增殖与迁移的影响,以及对SDF1-CXCR4信号通路的作用。方法qRT-PCR检测人成骨细胞hFOB1.19与骨肉瘤细胞株Saos-2、MG63、U2OS、143B中MAT1 mRNA的表达水平。将对数生长期143B细胞分为空白对照组(不进行转染)、阴性对照组(转染阴性对照siRNA-NC)和siRNA-MAT1组(转染siRNA-MAT1),通过CCK-8、流式细胞术及Transwell小室法分别检测各组143B细胞增殖活力、细胞周期和迁移能力,Western blot法检测各组143B细胞中SDF1和CXCR4蛋白表达情况。结果与hFOB1.19细胞比较,骨肉瘤细胞株Saos-2、MG63、U2OS中MAT1 mRNA的表达水平明显升高(P<0.01),143B细胞中MAT1 mRNA的表达水平显著升高(P=0.000);siRNA-MAT1组143B细胞中MAT1 mRNA的表达水平较空白对照组(Blank组)和siRNA-NC组明显下降(P<0.01);与Blank组和siRNA-NC组比较,siRNA-MAT1组143B细胞增殖力明显降低,G 1期比例升高而S期比例降低,细胞迁移能力受到抑制,SDF1和CXCR4蛋白表达水平也明显下降(P<0.01)。结论沉默FOSL2基因的表达可抑制骨肉瘤细胞143B的增殖和迁移能力,机制可能与下调SDF1和CXCR4表达有关。

SDF-1/CXCR4信号轴在牙髓血运重建中的作用

目的:研究基质细胞衍生因子-1/CXC趋化因子受体4(SDF-1/CXCR4)信号轴在牙髓血运重建中对组织再生的作用。方法:18只8周龄SD大鼠随机分为常规组(N组)、常规+SDF-1水凝胶组(N+SDF-1组)和常规+抗SDF-1抗体中和作用组(N+antiSDF-1组),每组6只,实验牙为双侧下颌第一磨牙,建立无髓根管模型后,按照分组进行处理。14 d后,收集双侧下颌骨,分别进行苏木精-伊红(HE)染色和免疫组织化学检测,观察根管新生组织类型以及CXCR4+细胞情况。结果:N组、N+SDF-1组根管新生组织冠方为不规则矿化基质,根尖方向可见成纤维样细胞组成的致密结缔组织,N+SDF-1组部分根管内可见新生小血管;N+anti SDF-1组典型组织学表现为根管内无明显的新生结缔组织,根尖孔区有大量的幼稚成纤维样细胞和小血管集聚,细胞无进入根管内的趋势。N组和N+SDF-1组根管内CXCR4+细胞,N+anti SDF-1组根管内见少量CXCR4+细胞。结论:SDF-1/CXCR4信号轴在牙髓血运重建中通过趋化细胞归巢进入根管内的方式,参与了组织再生,并具有促进血管新生的作用。

基于miR-381调控SDF-1/CXCR4信号通路探讨电针对缺血性脑卒中后神经损伤修复的影响

目的:观察电针对缺血性脑卒中模型大鼠miR-381、富含亮氨酸重复序列C4蛋白(LRRC4)及其下游基质细胞衍生因子1(SDF-1)/趋化因子受体4(CXCR4)信号通路的影响,探讨电针改善缺血性脑卒中神经损伤的作用机制。方法:从50只雄性SPF级SD大鼠中随机选取10只作为假手术组,剩余大鼠制备大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,将造模成功的30只大鼠随机分为模型组、电针组和激动剂组,每组10只。电针组大鼠于“百会”“大椎”行电针干预,选用疏密波,频率2 Hz/10 Hz,电流强度1 mA,每次30 min,每日1次,共干预14 d。激动剂组大鼠于侧脑室注射miR-381激动剂,每次10μL,7 d 1次,注射2次。干预后,观察各组大鼠ZeaLonga神经功能缺损评分;HE染色法观察各组大鼠缺血侧脑组织形态;ELISA法测定血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和神经生长因子(NGF)含量;Western blot法检测缺血侧脑组织LRRC4、SDF-1、CXCR4、细胞外信号调节激酶1(ERK1)蛋白表达;实时荧光定量PCR法检测缺血侧脑组织miR-381及LRRC4、SDF-1、CXCR4、ERK1 mRNA表达。结果:干预后,模型组大鼠脑组织细胞排列紊乱、数量减少,可见大量空泡,间质水肿明显;电针组和激动剂组大鼠脑组织细胞上述病理变化减轻。与假手术组比较,模型组大鼠ZeaLonga神经功能缺损评分及血清TNF-α、IL-6含量升高(P<0.01),血清NGF含量降低(P<0.01);缺血侧脑组织SDF-1、CXCR4、ERK1蛋白表达降低(P<0.01),LRRC4蛋白表达升高(P<0.01);缺血侧脑组织miR-381及SDF-1、CXCR4、ERK1 mRNA表达降低(P<0.01),LRRC4 mRNA表达升高(P<0.01)。与模型组比较,电针组、激动剂组大鼠ZeaLonga神经功能缺损评分及血清TNF-α、IL-6含量降低(P<0.05,P<0.01),血清NGF含量升高(P<0.05,P<0.01);缺血侧脑组织SDF-1、CXCR4、ERK1蛋白表达升高(P<0.01),LRRC4蛋白表达降低(P<0.01);缺血侧脑组织miR-381及SDF-1、CXCR4、ERK1 mRNA表达升高(P<0.05,P<0.01),LRRC4 mRNA表达降低(P<0.01)。结论:电针“百会”“大椎”可通过上调miR-381靶向抑制LRRC4表达,进而激活SDF-1/CXCR4信号通路,对缺血性脑卒中后神经损伤修复起到一定的促进作用。

独活续断汤口服和离子导入治疗肝肾亏虚型膝骨关节炎患者疗效及对膝关节液SDF-1/CXCR4信号通路的影响

目的:观察独活续断汤口服和离子导入治疗肝肾亏虚型膝骨关节炎(KOA)的临床疗效及对基质细胞衍生因子-1(SDF-1)/C-X-C趋化因子受体4型(CXCR4)信号通路的影响。方法:将150例天津中医药大学第一附属医院确诊的肝肾亏虚型KOA患者随机分为对照组、中药口服组和中药离子导入组,每组各50例,对照组给予硫酸氨基葡萄糖胶囊,口服0.5 g/次,2次/d口服,中药口服组给予独活续断汤150 m L/次,2次/d口服,中药离子导入组给予独活续断汤,于髋骨穴、膝关穴、膝眼穴及犊鼻穴进行离子导入,30 min/次,1次/d,三组患者均治疗4周;观察入组患者治疗前后膝关节肿胀程度及疼痛程度变化,并统计临床疗效;酶联免疫夹心吸附测定检测入组患者治疗前后膝关节液中SDF-1,CXCR4,基质金属蛋白酶-3(MMP-3)及MMP-13含量。结果:中药口服组疗效优于中药离子导入组和对照组,且复发率最低(P<0.05);与本组治疗前比较,中药口服组治疗后压痛值升高(P<0.05),中药口服组患者视觉模拟评分(VAS),膝关节肿胀评分、西安大略麦马斯特大学骨关节炎指数评分(WOMAC)及膝关节液SDF-1,CXCR4,MMP-3及MMP^-13蛋白含量均降低(P<0.05),且优于中药离子导入组和对照组(P<0.05)。结论:独活续断汤口服及离子导入治疗肝肾亏虚型KOA均有明显疗效,但口服疗效最佳,其机制可能与抑制SDF^-1/CXCR4炎症信号通路及软骨细胞降解有关。