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农杆菌介导的SeNHX1基因转化月季愈伤组织的研究 被引量:2
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作者 刘会超 刘孟刚 +1 位作者 郭丽娟 贾文庆 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2010年第4期617-621,共5页
’Pink Peace’rose was used to study the optimum conditions for transferring the SeNHX1 gene into the callus.The results showed that the optimal medium was MS+2,4-D 5.0 mg·L-1 + TDZ 0.5 mg·L-1.Agrobacterium ... ’Pink Peace’rose was used to study the optimum conditions for transferring the SeNHX1 gene into the callus.The results showed that the optimal medium was MS+2,4-D 5.0 mg·L-1 + TDZ 0.5 mg·L-1.Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation was able to take the target gene into callus and the blue spots were found.The optimum conditions for the transient expression of gusA gene are as following: bacterium density of OD was 0.5,infection time was 20 min,culture time was 3 days.Adding 100 μmol·L-1 AS,the frequency of transient expression of GUS gene was the highest,which reached about 85% in present study. 展开更多
关键词 月季 遗传转化 农杆菌介导 senhx1基因
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花粉管通道法转化SeNHX1基因对小麦主要农艺性状的影响 被引量:2
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作者 周岩 游建 +5 位作者 魏琦超 薛晓锋 何男男 马俊 张洁 袁重要 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2011年第5期21-23,共3页
以5个小麦品种(系)百农64、豫麦34、抗冻早30、百麦1号和矮抗58为试验材料,采用花粉管通道法将携带有外源耐盐基因SeNHX1的质粒DNA导入自花授粉后的小麦柱头内。对花粉管通道法介导后的植株进行田间正常管理,收获D0代种子,并于次年播种... 以5个小麦品种(系)百农64、豫麦34、抗冻早30、百麦1号和矮抗58为试验材料,采用花粉管通道法将携带有外源耐盐基因SeNHX1的质粒DNA导入自花授粉后的小麦柱头内。对花粉管通道法介导后的植株进行田间正常管理,收获D0代种子,并于次年播种。在次年小麦成熟期采用5点取样对D0代小麦株高、穗长、剑叶面积、千粒重等农艺性状进行测量并进行统计分析。结果表明,与对照比较,花粉管通道法处理的D0代植株的种子(D1代)千粒重均有所提高;5个小麦品种(系)受体转化D0代植株除抗冻早30外,其余受体与对照组相比株高差异均达到显著水平,甚至极显著水平;穗长除百麦1号差异不显著外,其余受体均达显著水平。5种小麦受体的叶面积差异均达到显著水平;叶长除豫麦34无明显变化外,其余受体差异均达到极显著水平;叶宽与受体相比均无明显差异。对D0代植株叶片基因组DNA进行PCR检测,24个样品中有7个出现阳性反应。 展开更多
关键词 小麦 senhx1基因 花粉管通道法 农艺性状
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超声波辅助农杆菌介导SeNHX1基因转化紫花苜蓿的研究 被引量:4
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作者 薛晓锋 周岩 +2 位作者 陈亚东 陶烨 陈燕绘 《中国农学通报》 CSCD 2014年第18期264-270,共7页
为建立高效快速的紫花苜蓿遗传转化体系,以紫花苜蓿6个栽培品种为材料,采用超声波辅助农杆菌介导法,对影响紫花苜蓿遗传转化体系的若干因素进行了研究。结果显示,6个栽培品种对卡那霉素敏感性不同,维多利亚为40 mg/L,而其他5个品种为50 ... 为建立高效快速的紫花苜蓿遗传转化体系,以紫花苜蓿6个栽培品种为材料,采用超声波辅助农杆菌介导法,对影响紫花苜蓿遗传转化体系的若干因素进行了研究。结果显示,6个栽培品种对卡那霉素敏感性不同,维多利亚为40 mg/L,而其他5个品种为50 mg/L;通过梯度实验表明:根癌农杆菌侵染浓度OD600为0.4-0.5,侵染时间为10-15 min,超声波处理时间为10 min是实现紫花苜蓿子叶转化及抗性愈伤组织形成较为有利的组合。卡那霉素抗性愈伤组织DNA的PCR扩增显示,转化体和质粒DNA分别扩增出长度大约为546bp的清晰条带,初步表明耐盐SeNHX1基因已整合至紫花苜蓿愈伤组织中。 展开更多
关键词 超声波辅助农杆菌介导 senhx1基因 紫花苜蓿
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SeNHX1与GFP融合基因在酵母中表达及其耐盐性表现 被引量:2
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作者 杨小玲 季静 +3 位作者 王罡 杨少辉 孙建学 张达威 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2008年第4期60-64,共5页
通过构建盐角草的液泡型Na^+/H^+反向转运蛋白SeNHX1基因的酵母表达载体,研究该基因对酵母耐盐性的影响。将SeNHXI基因与荧光报告基因GFP融合,分别构建酵母表达载体pYES2-SeNHX1-GFP、pYES2-SeNHX1和pYES2-GFP,转化酵母W303,诱导... 通过构建盐角草的液泡型Na^+/H^+反向转运蛋白SeNHX1基因的酵母表达载体,研究该基因对酵母耐盐性的影响。将SeNHXI基因与荧光报告基因GFP融合,分别构建酵母表达载体pYES2-SeNHX1-GFP、pYES2-SeNHX1和pYES2-GFP,转化酵母W303,诱导3个载体表达,并测定含有不同表达载体的酵母生长曲线。结果表明,荧光显微镜下观察到带有报告基因GFP的2个转化子W303(pYES2-SeNHX1-GFP)和W303(pYES2-GFP)均可发出绿色荧光,而没有报告基因的转化子W303(pYES2-SeNHX1)不发出荧光;在含有0.8mol/LNaCI培养基中培养0~48h内,W303(pYES2-SeNHX1-GFP)和W303(pYES2-SeNHX1)菌株前期生长比对照菌株W303(pYES2-GFP)慢,但在培养48h后则大大超过对照菌株。表明所构建带有目的基因SeNHX1的酵母表达载体已表达,且证实SeNHX1基因可提高酵母的耐扑件。 展开更多
关键词 senhx1基因 GFP基因 酵母 表达载体 生长曲线 荧光 耐盐性
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SeNHX1表达蛋白的亚细胞定位及其对Na^+的解毒功能 被引量:1
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作者 杨小玲 季静 王罡 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2012年第5期8-11,共4页
将带有目的基因SeNHX1、GFP的酵母表达载体pYES2-SeNHX1、pYES2-GFP、pYES2-SeNHX1-GFP分别导入nhx1酵母缺失型菌株296H,用共聚焦荧光显微镜观察SeNHX1表达蛋白的亚细胞定位;通过菌株在含盐培养基中生长状况研究该蛋白对Na+的解毒功能... 将带有目的基因SeNHX1、GFP的酵母表达载体pYES2-SeNHX1、pYES2-GFP、pYES2-SeNHX1-GFP分别导入nhx1酵母缺失型菌株296H,用共聚焦荧光显微镜观察SeNHX1表达蛋白的亚细胞定位;通过菌株在含盐培养基中生长状况研究该蛋白对Na+的解毒功能。结果表明,296H(pYES2-GFP)菌株的绿色荧光弥散于整个细胞质,而296H(pYES2-SeNHX1-GFP)菌株的绿色荧光包围于液泡膜的一圈,因此,SeNHX1蛋白定位于液泡膜;296H(pYES2-GFP)和296H缺陷型菌株在含0.5 mol/L NaCl的培养基中生长受到抑制;带有SeNHX1目的基因的转化子比以上2种菌株在含盐培养基中生长更快,表明SeNHX1基因可恢复nhx1酵母突变体Na+的解毒功能。SeNHX1疏水性分析、氨基酸序列分析、亚细胞定位及其对Na+的解毒功能结果说明,SeNHX1基因是可提高生物体耐盐性的液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因。 展开更多
关键词 senhx1基因 酵母 表达载体 GFP绿色荧光 耐盐性 亚细胞定位
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